III SIMPÓSIO ESTADUAL DE INFECÇÃO HOSPITALAR EXPERIÊNCIA DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ NA INVESTIGAÇÃO DE SURTOS TÂNIA MARA IBELLI VAZ Instituto Adolfo Lutz BACTÉRIAS DE IMPORTÂNCIA EM INFECÇÃO HOSPITALAR • GRAM POSITIVOS – Cocos / bacilos • GRAM NEGATIVOS – Cocos / bacilos BACILOS GRAM NEGATIVOS (BGN) Importância em infecção hospitalar - ENTEROBACTÉRIAS - BGN NÃO FERMENTADOR Família Enterobacteriaceae Classificação: Gêneros (42) Espécies (centenas) • Enteropatógenos clássicos (diarréias) • Infecção hospitalar - espécies importantes Patógenos oportunistas • Outras espécies - raras em material clínico • Espécies que não são isoladas em material clínico FAMÍLIA Enterobacteriaceae Enteropatógenos clássicos (diarréias) • Salmonella • Shigella • E.coli diarreiogênica • Y. enterocolitica (EPEC,ETEC,EHEC,EAEC, DAEC) FAMÍLIA Enterobacteriaceae Infecção hospitalar Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Proteus mirabilis Enterobacter spp Salmonella (sorotipos) Serratia marcescens Citrobacter spp Providencia spp Meio IAL (Pessoa e Silva) Identificação presuntiva BGN NÃO FERMENTADOR PRINCIPAIS GÊNEROS Pseudomonas, Burkholderia, Stenotrophomonas,Ralstonia, Brevundimonas, Comamonas e Acidovorax Acinetobacter , Moraxella, Shewanella, Chryseobacterium Achromobacter, Alcaligenes,Agrobacterium, Ochrobactrum Outros BGN NF Principais espécies de BGN Não Fermentador Pseudomonas aeruginosa infecções graves e fatais Acinetobacter baumannii Burkholderia cepacia Stenotrophomonas maltophilia Chryseobacterium meningosepticum Achromobacter xylosoxidans Achromobacter piechaudii Ochrobactrum anthropi infecções graves e fatais Conjunto de características morfológicas e metabólicas • SISTEMAS COMERCIAIS E AUTOMATIZADOS -Utilizados por muitos laboratórios clínicos - Permitem a identificação dos microrganismos em nível de espécie. - Resultados rápidos • SISTEMAS CONVENCIONAIS Testes bioquímicos - Laboratórios de Referência - Espécies não identificadas - Espécies atípicas e raras IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE Pode ser a primeira pista da ocorrência de um surto Clínica Falsos surtos Não identificação do surto (BGN NF) Permite a detecção de espécies raras e atípicas como causa de surtos MÉTODOS DE TIPAGEM Identificação de uma cepa particular em uma espécie - MÉTODOS FENOTÍPICOS - MÉTODOS GENOTÍPICOS • Escolha do método – depende da espécie MÉTODOS FENOTÍPICOS ANTIBIOGRAMA SOROTIPAGEM FAGOTIPAGEM MÉTODOS MOLECULARES: -RIBOTIPAGEM -PULSED FIELD GEL ELECTROPHORESIS (PFGE) -PERFIL PLASMIDIAL -RAPD (Randomly amplified polymorphic DNA) PFGE PCR Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral 73 amostras – 3 laboratórios IAL (VE) 57 E.cloacae / 7 – sangue 16 E.agglomerans / 2 sangue E.Cloacae (sangue e soluções) Biotipo 26 Sorotipos O3 Ribotipo E1B1 Perfil de S: CX CF AP GN Outros tipos foram encontrados em algumas bolsas ONT, O19, O14 E.Agglomerans Ribotipo E6B6 S - a todas as drogas Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral Perfil plasmídial Ribotipagem EcoRI e BamHI Ribotipos BamHI 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Kb Ec O3 6.3 3.2 E.Cloacae E.agglomerans Surto Infecção Hospitalar Kluyvera sp 1 2 3 4 5 6 Kb 6.3 3.2 1.5 4,5,6,7, Kluyvera sp 7 8 9 10 11 12 13 14 Surto de bacteriemia por Pseudomonas aeruginosa em uma unidade de hemodiálise Hemocultura de 11 pacientes .........P.aeruginosa (4) Água – P.aeruginosa e/ ou B. cepacia Sorotipos Piocinotipos Ribotipos Amostras dos pacientes e uma da água de hemodiálise: O15 P10 AP CF CL CO CX TT E1B1 Outras amostras de água : O4 O7,8 O10 O11 Surto de Klebsiella pneumoniae ESBL + berçário PFGE 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 KB 1,15 Padrão de massa molecular, 5- 11,13,14 -(KI)