Produtos Naturais e o Controle
do Barbeiro Rhodnius prolixus,
vetor da Doença de Chagas
Alphonse Kelecom
Departamento de Biologia Geral
Universidade Federal Fluminense - Niterói, RJ
Colaboradores:



Marise Maleck de Oliveira Cabral
Elói de Souza Garcia
Patrícia Azambuja
O parasita, Trypanosoma cruzi, no tubo
digestivo do barbeiro, Rhodnius prolixus
Estágios de muda de ninfas de Rhodnius prolixus
A-E : ninfas de 1º - 5º estágio
Mamadeira para alimentação do barbeiro
membrana de látex
saída de água
sangue humano
entrada de água a ~37ºC
Rhonius prolixus, alimentado
Testes com ninfas de Rhodnius prolixus







Ninfas de 4º estágio
lotes de 25-30 animais
mantidos em jejum por
um período de 25-30 dias
alimentados uma única
vez ad libidum
pesados antes e depois
do repasto
mantidos a 28ºC durante
3-4 semanas
lote controle: sangue com
EtOH-salina (1:4)
testes: sangue contendo
1-500 mg/ml da amostra
testada
O objetivo original
COOCH3
O
OH
O
O
HO
O
O
CH3COO
OH
H
CH3COO
O
H
O
Azadirachtina A :
toxicidade, fagoinibição, deformação das pupas,
atraso no desenvolvimento do inseto (DE50 25mg/ml)
anti-muda (DE50 40 ng/ml)
Produtos Naturais de Melia(ceae)
Flanonóides
Antraquinonas
Cumarinas
OH
MeO
O
OCH3
OH
CH3
HO
O
HO
O
H
O
OGal
escopoletina
O
OH
O
nimbaflavona
Diterpenos
Esteróides
Limonóides
H
OH
O
O
O
H
O
H
H
O
nimosona
HO
OH
H
HO
H
azedarachol
OH
OH
OH
HO
meliantriol
Estudo fitoquímico de Melia azedarach
(Meliaceae)




Extração de sementes de M. azedarach com
MeOH (rdt.: 12%)
extrato apresenta atividades fagoinibidora e
anti-ecdise
purificação guiada por bioensaio
partição MeOH(5% aquoso) versus n-hexano
– fração hexânica : inativa

evapora-se o MeOH e a fase aquosa é extraída
com EtOAc
– fase EtOAc contém toda a atividade

filtração em gel de sílica e ensaio biológico
Efeito de uma fração do extrato de Melia azedarach,
contendo azadirachtina A, sobre a ecdise de larvas
de 4º estágio de Rhodnius prolixus
COOCH3
O
OH
O
O
HO
O
O
CH3COO
CH3COO
OH
H
O
azadirachtina A
• controle - •10 mg/ml -  25 mg/ml
O
H
Isolamento de cinamodiol
triterpeno inédito
da série do eufano
particularidades:
• posição da lactona (21-16)
• hidroxila em C-12
• hidroxila b em C-3
Atividade biológica em
Rhodnius prolixus :
• provoca ligeiro atraso da
muda
• inibe a ecdise em 27% na
conc. de 10 mg/ml
O
OH
O
H
H
HO
H
cinamodiol
Isolamento de quatro lignanas
OH
OH
1
2
O
OMe
H
MeO
H
O
H
MeO
OMe
H
O
O
HO
HO
OH
OH
OH
O
H
MeO
HO
HOOC
OMe
O
H
H
MeO
O
3
HO
OMe
H
O
COOH
4
1 pinoresinol , 2 bis-epi-pinoresinol , 3 hemicetal , 4 diácido
Atividades biológicas de pinoresinol
em Rhodnius prolixus 1.
140
25
OH
% m or tality
H
15
MeO
m g in g e s te d b lo o d
O
20
120
OMe
H
O
HO
10
100
80
60
40
5
20
0
0
c o n tr o l
1
10
c o n c e n t r a t io n
Toxicidade
tratamento contínuo
100
c o n tr o l
1 u g /m l
1 0 u g /m l
1 0 0 u g /m l
c o n c e n t r a t io n
Fagorrepelência
via repasto sangüíneo
120
120
100
100
80
80
% ecdysis
% ecdysis
Atividades biológicas de pinoresinol
em Rhodnius prolixus 2.
60
40
60
40
20
20
0
0
12
14
16
18
21
days after treatment
12
14
16
18
21
24
d a y s a fte r fe e d i n g
Anti-ecdise
Tratamento contínuo
Repasto sangüíneo
Legenda:  controle ; pinoresinol :  1 ,  10 ,  50 ,  100 &  500mg/ml
Atividades de lignanas em insetos
OMe
O
H
MeO
O
O
OMe
H
H
O
O
MeO
MeO
H
O
O
eudesmina:
• fagorrepelente
H
O
sesamina:
• inibe o crescimento e
• mimetiza o hormônio juvenil
O
O
HO
matairesinol:
H
OMe
OH

inseticida

exerce ação sinergística
Ação de lignanas e neolignanas
em Rhodnius prolixus
OH
H
O
O
O
H
MeO
OCH3
O
O
O
O
O
OMe
OMe
burchelina
podofilotoxina
em 10 mg/ml
• não é fagorrepelente
• atrasa a muda em 6 dias
• inibe a ecdise em 50%
• altamente tóxica
• inibe a diurese em ~90%
•não é fagorrepelente
• atrasa ligeiramente a muda
• não inibe a ecdise
• não é tóxica
• inibe a diurese em até 80%
Análise em CG-EM da hemolinfa de Rhodnius prolixus
tratado com 100 mg/ml de burchelina
OCH3
O
O
O
O
1a : cromatograma (CG) da hemolinfa coletada 30 min após o repasto
1b : cromatograma (GC) da hemolinfa coletada 1 hora após o repasto
Identificação dos produtos de degradação da
burchelina (1) na hemolinfa de Rhodnius prolixus
OCH3
OCH3
O
O
O
O
1
O
O
O
OH
O
OH
O
6
3
NH2
OCH3
OCH3
O
O
O
O
O
O
2
O
O
8a
8b
4
OCH3
OCH3
OCH3
OCH3
O
O
7b
O
HO
7a
O
O
7c
5
Mecanismo provável da degradação da burchelina
H
b
H a
b
c
O
O
O
O
a
O
O
b
H
-H2
8b
OCH3
OCH3
OCH3
O
O
b
H
-C3H4
O
O
OH
O
1
6
a,c
OCH3
O
O
O
OCH3
O
OCH3
8a
O
O
O
HO
H
O
HO
7a
O
O
OH
O
3
a degradação ocorre principalmente a nível do anel furânico
Preparação de derivados do álcool piperonílico
O
H
O
OH
O
O
O
OAc
O
16
14
O
OH
15
O
O
O
OCH3
O
O
O
17
18
CNPq, DAAD, FAPERJ
Agradeço pela sua atenção