ANÁLISE DA EXPRESSÃO E FUNÇÃO DE UMA
POSSÍVEL PROTEÍNA DESACOPLADORA EM
RHODNIUS PROLIXUS
Vinicius de Lima
INTRODUÇÃO
O modelo de estudo:
 Inseto hematófago obrigatório
 Hemíptero da família Reduviidae e subfamília
Triatominae
 Importância para a saúde pública mundial –
Transmissor do T. cruzi.
INTRODUÇÃO
Idéia geral do funcionamento da UCP
INTRODUÇÃO
UCP em rhodnius prolixus
 Alimentação sanguínea = muitos ROS
 Teoria dos vampiros
 UCP seria uma adaptação ao estresse
oxidativo?
INTRODUÇÃO
UCP na termogênese
 Descrita em vários organismos como uma
proteína termogênica
 Poderia esta ser responsável pela geração de
calor em órgãos tais como o músculo de vôo?
METODOLOGIA
Genômica
 Busca do(s) gene(s) para UCP no genoma de
Rhodnius prolixus usando seqüências de UCP
de outros insetos
 Montagem do gene usando o algorítimo
GeneWise
 Confirmação filogenética usando o programa
MEGA 4.
METODOLOGIA
Experimentos de bancada:
 Elaboração de iniciadores específicos para UCP
de Rhodnius prolixus
 RT-PCR – Confirmação da expressão gênica em
determinados órgãos -> Alvos como Intestino
médio posterior, corpo gorduroso e músculo de
vôo

METODOLOGIA
RT-qPCR para análise de quantificação da
expressão gênica
 Fabricação de um peptídeo sintético a partir da
seqüência de UCP e posterior síntese de anticorpo
policlonal
 Western Blotting / imunohistoquímica nesses
órgãos analisados sob situação de jejum,
alimentação sanguínea e vôo.
 RNAi – Análise de fenótipo por microscopia de
fluorescência: marcação de ROS
 Calorimetria do músculo de vôo

RESULTADOS E CONCLUSÕES ESPERADAS
Rhdnius prolixus possuirá UCP em seu
genoma.
 Essa(s) UCP(s) deve(m) ser expressa(s) nos três
órgãos analisados.
 Suas expressões tanto gênicas quanto
protéicas devem sofrer regulações em função
do estado fisiológico do inseto

RESULTADOS E CONCLUSÕES ESPERADAS
UCP deve proteger, principalmente os
intestinos, de um estresse oxidativo mediado
pela presença do grupo Heme
 UCP deve aumentar a produção de calor no
músculo de vôo e sem esta o vôo deve ser
comprometido
 Ausência de UCP deve resultar em possível
morte ou não postura de ovos

PUBLICAÇÃO
Em dois anos:
Insect Biochemistry and Molecular Biology,
Journal of Insect Science, Isect Physiology
ou Journal of Biological Chemistry
