MEIOS SELETIVOS PARA ISOLAMENTO DE GRAM POSITIVOS E GRAM NEGATIVOS Ágar Chapman/Ágar MacConkey, Ágar MacConkey/Ágar Cled, Ágar MacConkey/Ágar Sangue, Ágar MacConkey/Ágar Sangue Columbia, Ágar Sangue Azida/Ágar Sangue e Ágar EMB Teague/Ágar Sangue Indicações: Os Meios Seletivos para Isolamento de Gram positivos e de Gram negativos Probac são combinações dos meios tradicionalmente utilizados para isolamento e cultivo de enterobactérias e de cocos Gram positivos. Na maioria das vezes também demonstram características diferenciais do crescimento bacteriano. A linha é composta pelas combinações: Ágar Chapman/Ágar MacConkey, Ágar MacConkey/Ágar Cled, Ágar MacConkey/Ágar Sangue, Ágar MacConkey/Ágar Sangue Columbia, Ágar Sangue Azida/Ágar Sangue, Ágar EMB Teague/Ágar Sangue. Características dos componentes: Ágar MacConkey: O Ágar MacConkey é um meio seletivo (pela presença de sais biliares, cristal violeta e NaCl) para o isolamento de bacilos Gram negativos, principalmente as enterobactérias (Salmonellas, Shigellas e bactérias coliformes). Diferencia as bactérias fermentadoras de lactose (colônias vermelho tijolo a rosa, opacas se o crescimento for denso, podem estar rodeadas por zonas de precipitado de bile; possibilidades: E.coli, Klebsiella spp, Grupo Enterobacter spp) das não fermentadoras de lactose (colônias transparentes a incolores, observadas melhor a luz transmitida; possibilidades: Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp e Edwardsiella) pela presença de lactose e vermelho neutro na composição do produto. Ágar Sangue: meio utilizado para a maioria dos materiais clínicos. Permite o crescimento de grande parte dos patógenos não fastidiosos ou que requerem incubação especial. Devido a adição de sangue de carneiro desfribinado proporciona a leitura das hemólises causadas pelo genêro Streptococcus spp. Ágar Cled: meio utilizado para isolamento, contagem e identificação presuntiva de bactérias causadoras de infecção do trato urinário. Possui em sua composição digerido pancreático de gelatina e caseína, cistina, lactose, extrato de carne, azul de bromotimol e ágar. Ágar Chapman: para isolamento de Staphylococcus spp através da fermentação do manitol e produção de gelatinase (ver tabela 1) pela presença de manitol e gelatina em sua formulação. Ágar Sangue Columbia: meio utilizado para os mais fastidiosos microrganismos, quando em forma de ágar base de acordo com o suplemento adicionado pode ser utilizado para cultura de bactérias anaeróbias, leveduras e fungos, Streptococcus β hemolítico (devido a adição de sangue de carneiro desfribinado) entre outros. Ágar Sangue Azida: para isolamento de cocos Gram positivos. Meio seletivo com base de ágar sangue que possui em sua formulação azida de sódio que inibe a maioria dos bacilos Gram negativos. Ágar EMB Teague: para isolamento e diferenciação de bacilos entéricos e Enterobacteriaceae. Diferencia as bactérias capazes de fermentar a sacarose / lactose com correspondente absorção do corante eosina e azul metileno, pela presença deste componente em sua formulação (vide tabela 2). Procedimento: - Semear a partir da amostra clínica, seguindo-se a técnica padrão para isolamento de colônias. - Incubar a 35ºC, aerobicamente, 24 a 48 h. SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO “IN VITRO” PROBAC DO BRASIL Produtos Bacteriológicos Ltda. Rua Jaguaribe, 35- Santa Cecília - São Paulo - SP - CEP 01224-001 Fone: 55 11 3367 - 4777 - Fax: 55 11 3223 - 8368 CNPJ 45.597.176/0001 - 00 - Insc. Est. 110.485.842.111 Site: www.probacbrasil.com E-mail: [email protected] Rev: 02 Interpretação do resultado: Observar cada tipo diferente de morfologia de colônia, prosseguir com isolamento quando necessário e realizar, a partir de colônias puras, as provas bioquímicas e sorológicas (se aplicável) necessárias para identificação. Tabela 1 - Ágar Chapman Microrganismo Colônia Gelatinase* S. aureus Amarelo-laranja + S. epidermidis Branca + Streptococcus Grupo D Crescimento escasso E. faecalis Branco-amarela * Gelatinase (+): halo claro ao redor das colônias Manitol Fermenta Não fermenta Não fermenta Variável - se for positivo é levemente Tabela 2- Ágar EMB Teague Microrganismo Salmonella spp, Shigella spp Colônias Transparentes de cor âmbar E. coli Esverdeadas com brilho metálico a luz refletida, com o centro negro azulado a luz transmitida. Enterobacter spp,, Klebsiella spp e outros Maiores que as de E.coli, mucóides, confluentes, com centro marrom acinzentado a luz transmitida. Apresentação: Ágar Chapman/Ágar MacConkey, Ágar MacConkey/Ágar Cled, Ágar MacConkey/Ágar Sangue, Ágar MacConkey/Ágar Sangue Columbia, Ágar Sangue Azida/Ágar Sangue, Ágar EMB Teague/Ágar Sangue: Pacote com 10 placas divididas de 90mm. Conservação: Manter em geladeira (2º a 8ºC). Validade: 4 meses. Precauções: Após o uso, o produto deverá ser descartado conforme as recomendações vigentes para resíduos de serviços de saúde. Referências Bibliográficas: 1 Lennette, E. H.; Balows, A.; Hausler, W. J.; Shadomy, H. J. - Manual of Clinical Microbiology. American Society for Microbiology, Washington, D.C., 1985. 2 MacFaddin, J. F. - Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore. 3 Murray, P.R. et al. – Manual of Clinical Microbiology, 8th ed., ASM Press, Washington, DC, 2003. 4 Koneman, E. W.; Allen, S. D. et al: Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, 6th Edition. J. B. Linpcott Company, Philadelphia, 2006. SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO “IN VITRO” PROBAC DO BRASIL Produtos Bacteriológicos Ltda. Rua Jaguaribe, 35- Santa Cecília - São Paulo - SP - CEP 01224-001 Fone: 55 11 3367 - 4777 - Fax: 55 11 3223 - 8368 CNPJ 45.597.176/0001 - 00 - Insc. Est. 110.485.842.111 Site: www.probacbrasil.com E-mail: [email protected] Rev: 02