Modulação por íons cálcio da expressão do
gene rfaL de Herbaspirillum seropedicae.
Estevan Rafael Tomazini - Iniciação ciêntifica- PIBIC/ Fundação Araucária
Rose Adele Monteiro; Marcelo Bueno Batista; Eduardo Balsanelli.
Introdução:
Resultados/Discussão:
Herbaspirillum seropedicae é uma bactéria
diazotrófica capaz de se associar à gramíneas
através de reentracias nas raizes de forma não
invasiva. Essa associação é dependente de LPS
íntegro e sua biossíntese é dependente do gene rfal,
modulado por íons cálcio. O objetivo desse trabalho
é determinar a porção do gene rfaL que contem o
sítio de modulação por cálcio em H. Seropedicae.
Fonte: BALSANELLI, 2010.
Fonte: Esse trabalho.
Método:
Para essa análise foram construídas 4 fusões plasmidiais: pLig4 (rfaL::lacZ integro), pLig2 (rfaL::lacZ
com deleção de 200pb), pLig3 (rfaL::lacZ com
deleção de 400pb) e pLig1 (rfaL::lacZ com deleção
de 600pb), estas fusões foram transformadas em
H. seropedicae. A expressão dessas fusões foi avaliada em ensaios de β-galactosidase com cultivo
sob presença e ausência de cálcio.
Referências:
BALSANELLI, E. et al. Herbaspirillum seropedicae
rfbB and rfbC genes are required for maize coloniza
tion. Environmental Microbiology. v.12, n.8,
p.2233–2244, 2010.
Balsanelli et al. (2010) mostrou que os genes rfbB e rfbC
envolvidos na biossíntese de ramnose, são induzidos por íons
cálcio. Os dados obtidos nesse trabalho mostram uma baixa
atividade de β-galactosidase em todas as condições e
estirpes testadas. A expressão da fusão rfaL::lacZ contendo a
região intacta não ocorreu da como observado nos
experimentos realizados por Balsanelli em 2010.
Conclusões:
Esses experimentos devem ser repetidos com o objetivo de otimizarmos as condições do ensaio para que possamos determinar realmente o padrão de expressão das frações testadas.