Expressão de proteínas do trigo (Triticum aestivum L.) cocultivada com a bactéria Herbaspirillun seropedicae SmR1
Andressa Estevam
Iniciação Científica UFPR/TN
Marise Fonseca dos Santos
Introdução/Objetivos: O trigo (Triticum aestivum L.) é
um dos cereais mais importantes na base alimentar
mundial. As bactérias promotoras de crescimento
vegetal além de auxiliar na disponibilização de macro
e micro nutrientes, são Fixadoras Bilógicas de
Nitrogênio .O objetivo deste trabalho é conhecer,
através da proteômica, as proteínas envolvidas nessa
interação benéfica entre Herbaspirillun seropedicae
SmR1 e trigo
(Triticum aestivim L) CD 120
COODETEC.
Método: As plântulas de trigo foram obtidas da cultura
de embriões maduros (Neiverth et al., 2010) no estádio
de desenvolvimento Zadok 12-13 e mantidas em tubos
de ensaio contendo meio MS 1/10 liquído. Após 24 h
as plântulas foram inoculadas com 107 células de H.
seropedicae e permaneceram em co - cultivo por 7
dias, os tubos de controle seguiram os mesmo
procedimentos. Ao final ,as amostras foram divididas
em parte aérea e raiz e as proteínas extraídas
segundo Wang et al., 2003, para aplicação na
eletroforese 2DE, para posterior análise de imagem.
.
NEIVERTH, A., J. B. SILVA, et al. Regenration of wheat plants from wheat
(Triticum aestivum L. cv CD104) mature embryos. Scientia Agraria, v.11,
n.2, Mar/Apr 2010, p.000-000. 2010.
WANG, W., M. SCALI, et al. Protein extraction for two-dimensional
electrophoresis from olive leaf, a plant tissue containing high levels of
interfering compounds. Electrophoresis, v.24, n.14, Jul, p.2369-75.
2003.
Resultados/Discussão: Após quantificadas as proteínas totais
pelo método de BCA, a concentração em média das amostras
de raiz foi de 0,5 mg/mL, enquanto que a parte aérea
apresentou 1 mg/mL. Nos géis de raiz e parte aérea foram
observadas um número médio de 105 ‘spots’ com peso
molecular entre 100 e 10KDa, exceto para os de raiz com peso
menor que 70KDa. Avalia-se que a raiz apresentou maior efeito
da inoculação da bactéria que a parte aérea nestes estágios
iniciais da associação pelo maior número de spots diferencias
(Fig1), entretanto o total destes é menor que 10% podendo
estar relacionado aos estágios iniciais da infecção .
Figura 1: Géis 2DE de parte aérea (esquerdo) e raiz (direito)
das plântulas de trigo cv. CD 120 controle (A) e inoculada (B).
Conclusões: As avaliações iniciais deste experimento indicam
que a análise proteômica deste sistema é promissor. As
proteínas que forem identificadas em etapa subsequente
podem estar envolvidas na fase inicial de infecção.