CARVALHO, Daniel Cardoso;
KALAPOTHAKIS,Evanguedes; GODINHO, Hugo (c);
GODINHO, Alexandre (c)
Departamento de Farmacologia e Departamento de Zoologia
ICB-UFMG
Crescimento populacional
Maior demanda de energia elétrica
Construção de represas
Interrupção de vias migratórias
Figura I1: A figura mostra como ocorre o aumento (esquerda) ou diminuição (direita) no
número de repetições de microsatélites numa fita de DNA, durante a replicação através
do deslizamento da polimerase. (MOXON & WILLS, 1999)
 Biblioteca Genômica
 Isolamento dos clones
 Hibridização
 Sequenciamento
Sítio de corte da enzima utilizada
deixando extremidades coesivas
Mapa do vetor utilizado
Escolha da enzima apropriada
para a montagem da biblioteca
Corte do DNA total com Sau3A
Divisão das frações da
biblioteca
Técnica de transformação bacteriana utilizada (eletroporação)
Isolamento dos clones da biblioteca seguido de PCR
ou mini-prep para a posterior aplicação na
membrana
Hibridização com sondas radioativas
Oligonucleotídeos utilizados
como sonda: CA, TC, CTT,
ACGA, TA, GGA, AAAG,TATC
Equipamento de Sequenciamento automático utilizado:
ABI 310
Seqüência de um dos microsatélites encontrados
Seqüência de outro dos microsatélites encontrados
 PCR dos loci de microsatélite de cada indivíduo.
 Gel de poliacrilamida dos produtos de PCR.
 Montagem de tabela com nº e freqüência de MS.
 Cálculo da heterozigosidade observada e esperada.
 Definição da distância genética e fluxo gênico entre as populações.
Árvore Genealógica
 Verificação da necessidade de construçãode mecanismos de transposição.