Instituto de Biologia
Departamento de Biologia Celular e Molecular
Disciplina: Bioquímica - Curso Medicina Veterinária
Estudo Dirigido Tema: Cinética enzimática
Prof. Luiz Leão
1. Por que motivo a dosagem da atividade da
enzima
plasmática
não-funcional
creatina
fosfoquinase (CPK), demonstrada na figura ao
lado, pode auxiliar no diagnóstico de um infarto
do miocárdio?
Poderíamos dosar atividade de qualquer outra
enzima plasmática não-funcional com esta
finalidade? Justifique sua resposta.
2. A figura ao lado demonstra a relação entre
velocidade inicial da reação e concentração de
substrato para duas diferentes enzimas que utilizam o
mesmo substrato.
a) Defina o conceito de “Km”.
b) Baseando-se na figura ao lado, estime os valores
aproximados de “Km” para cada uma das duas
enzimas e identifique aquela que possui maior
afinidade pelo substrato.
c) Qual das duas enzimas converteria substrato em
produto
mais
rapidamente
nas
condições
de
concentração de substrato iguais a 20 e 100? Justifique
sua resposta.
3. Uma enzima purificada foi incubada com seu substrato em concentração saturante e a velocidade
máxima da reação foi determinada. A adição de uma substância X ao meio de reação reduziu a velocidade
da reação. No entanto, a velocidade máxima da reação na presença do inibidor foi muito próxima aquela
obtida na sua ausência, quando a concentração de substrato foi elevada em 10 vezes.
a)Explique o provável mecanismo de inibição enzimática promovida pela substância X?
b)Explique o provável efeito deste inibidor sobre o km e sobre a velocidade máxima da reação?
Instituto de Biologia
Departamento de Biologia Celular e Molecular
Disciplina: Bioquímica - Curso Medicina Veterinária
Estudo Dirigido Tema: Cinética enzimática
Prof. Luiz Leão
4. Dois ensaios foram realizados com a finalidade de estudar o mecanismo de ação de um inibidor
específico de uma atividade enzimática. A tabela abaixo mostra os resultados obtidos para a construção da
curva de dependência da concentração de substrato na velocidade inicial da reação ([S] x veloc. inicial da
reação), na presença e na ausência do inibidor.
[S]
Velocidades Iniciais (v0)
(Molar)
(nmoles x litro –1 x mg proteína x min-1)
Ausência de Inibidor Presença de Inibidor
PERGUNTA:
Imagine o gráfico contendo os dados da
tabela ao lado, considere que estamos
2.5 x 10
-6
24
12
tratando
3.3 x 10
-6
30
15
responda:
4.0 x 10
-6
34
17
5.0 x 10
-6
40
20
1.0 x 10-5
60
30
-5
80
40
4.0 x 10-5
96
48
1.0 x 10-4
109
54.5
2.0 x 10-3
119
59.5
1.0 x 10-2
120
60
2.0 x 10
de
um
inibidor
reversível
Qual deve ser o provável mecanismo de
ação deste inibidor? (Justifique sua
resposta considerando alterações nos
parâmetros cinéticos e