Anais do XIII Encontro de Iniciação Científica da PUC-Campinas - 21 e 22 de outubro de 2008
ISSN 1982-0178
DESENVOLVIMENTO E ESTUDOS DE ESTABILIDADE DE FORMULAÇÕES COSMÉTICAS CONTENDO SUBSTÂNCIAS ATIVAS
ENCAPSULADAS EM LIPOSSOMAS DESTINADAS À PREVENÇÃO
DO FOTOENVELHECIMENTO CUTÂNEO
Juliana Gobbo
Faculdade de Ciências Farmacêuticas
CCV
[email protected]
Resumo: A busca por substâncias ativas a serem
utilizadas em formulações cosméticas destinadas à
prevenção do fotoenvelhecimento cutâneo tem sido
uma constante na comunidade científica mundial. A
tendência atual em termos de formulação é a veiculação de diversas substâncias ativas num mesmo
produto, ou seja, de maneira associada, pela praticidade do uso de um produto multifuncional. O ascorbil
fosfato de magnésio foi recentemente apresentado
ao mercado cosmético mundial encapsulado em lipossomas, em associação com o ácido alfa-lipóico e
a n-6-furfuriladenina. O ácido alfa lipóico é uma
substância antioxidante que protege as membranas
biológicas. A n-6-furfuriladenina é um hormônio
vegetal do crescimento que em células animais tem
sido considerado como anti-tumoral, tem efeito sobre
os fibroblastos e acredita-se que seja capaz de reduzir as mudanças relacionadas com o envelhecimento de células cutâneas e também reverter os
danos causados pelo envelhecimento actínico.
Nesse trabalho, realizou-se o desenvolvimento e os
estudos de estabilidade de formulações contendo a
associação de ascorbil fosfato de magnésio, ácido
alfa-lipóico e a n-6-furfuriladenina encapsulados ou
não em lipossomas. Foram elaboradas 10 diferentes
formulações, que foram avaliadas quanto á centrifugação, pH, características organolépticas e estudo
reológico, segundo o Guia de Estabilidade de Produtos Cosméticos, uma publicação da Agência Nacional de Vigilância Sanitária [1]. As formulações objeto
de estudo mantiveram-se estáveis ao longo do tempo avaliado, sendo consideradas formulações extemporâneas.
Palavras-chave: lipossomas, ascorbil fosfato de
magnésio, n-6-furfuriladenina.
Área do Conhecimento:. D. Ciências da Saúde - 5.
Farmácia - D.5.1. Análise e Controle de Medicamentos.
Gisele Mara Silva Gonçalves
Grupo de Pesquisa Química dos Materiais
CEATEC
[email protected]
1. INTRODUÇÃO
O ácido alfa lipóico é uma substância antioxidante
que protege as membranas biológicas por interagir
conjuntamente com o ácido ascórbico e glutation [2].
A n-6-furfuriladenina é um hormônio vegetal do
crescimento que retarda o envelhecimento da planta.
Nas células animais tem sido considerado como antitumoral, tem efeito sobre os fibroblastos e acreditase que seja capaz de reduzir as mudanças relacionadas com o envelhecimento de células cutâneas e
também reverter os danos causados pelo envelhecimento actínico [3,4,5,6].
Os lipossomas podem ser definidos como vesículas
lipídicas de forma aproximadamente esférica, nas
quais um volume aquoso central é circundado por
uma ou mais bicamadas lipídicas concêntricas que
possuem propriedades de membranas. As bicamadas são constituídas principalmente por fosfolipídios
[7].
Esta associação apresentada, veiculada em lipossomas, permite a liberação das substâncias ativas
diretamente na pele, imediatamente após sua aplicação. Assim, pode-se obter o efeito sinérgico e evitar
a interação das substâncias entre si e com os demais constituintes da formulação, proporcionando
maior estabilidade e prazo de validade, além de ampliar a faixa de pH permitida. A ação sinérgica
prevista para essas substâncias, portanto, pode ser
de grande valia na proteção da pele contra os
radicais livres provenientes das diversas fontes às
quais a pele está exposta diariamente. Entretanto, é
necessário comprovar a sua eficácia e a avaliação
da atividade antioxidante desses princípios ativos
associados é peça chave na elucidação dos seus
benefícios.
2. OBJETIVO
O objetivo desse trabalho foi realizar desenvolvimento e os estudos de estabilidade de formulações con-
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tendo lipossomas carregados de ascorbil fosfato de
magnésio, ácido lipóico e n-6-furfuriladenina,
substâncias estas utilizadas na prevenção do envelhecimento cutâneo e das desordens ocasionadas
pela excessiva exposição solar.
3. METODOLOGIA
Inicialmente, foram elaboradas 5 formulações de gel
ou gel creme, para a seleção daquela com melhor
característica sensorial para a continuidade dos estudos. Dessa forma, foram elaboradas outras 5 formulações (base, base adicionada de ácido lipóico,
base adicionada de ascorbil fosfato de magnésio,
base adicionada de n-6-furfuriladenina e base adicionada de lipossomas KL contendo essas
substâncias ativas). Essas formulações foram então
avaliadas quanto á estabilidade frente à
centrifugação, pH, características organolépticas e
estudo reológico, quando armazenadas às
temperaturas ambiente, 40 e 60°C, durante um
período de 30 dias, de acordo com metodologias
descritas no Guia de Estabilidade de Produtos
Cosméticos, uma publicação da Agência Nacional de
Vigilância Sanitária [1].
O estudo de estabilidade química foi iniciado com o
desenvolvimento de metodologia analítica por cromatografia líquida de alta eficiência. Para isso, foi
necessário determinar o comprimento de onda de
máxima absorção para que o mesmo fosse utilizado
para detecção e quantificação das substâncias. Assim, procedeu-se com uma varredura em espectrofotômetro com as amostras devidamente diluídas, utilizando-se de cubeta de quartzo e varredura de 200 a
700 nm. Em seguida, procederam-se com a busca
da melhor fase móvel para a realização das análises,
avaliando-se diferentes composições, baseadas na
literatura investigada.
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Todas as formulações foram estáveis frente ao teste
de centrifugação. Em relação ao pH inicial das formulações, os valores encontrados foram ligeiramente ácidos tanto para a base quanto para as contendo
substâncias ativas, porém a contendo ascorbil fosfato de magnésio apresentou o maior valor de pH inicial, devido à natureza dessa substância. A formulação base ficou também com pH ácido devido a alguma matéria prima empregada em sua fórmula.
Optamos por não corrigir o pH. Ao longo do tempo
as formulações não sofreram grandes mudanças no
pH.
As formulações que mais se alteraram foram as de
números 1 e 6 que apresentaram progressivo escu-
recimento ao longo do tempo e também conforme o
aumento da temperatura de armazenagem, bem como ressecaram na temperatura de 60°C devido à
perda de água por evaporação. A formulação 6, que
contém o ascorbil fosfato de magnésio é bastante
instável. Comparando-a com a que continha os lipossomas (n°1), os resultados obtidos são bastante
semelhantes. Considerando que os lipossomas são
compostos de lipídios e que estes são instáveis ao
calor, e que à temperatura ambiente houve pouca
alteração, podemos considerar que essa alteração
deve-se tanto á presença do ascorbil fosfato de
magnésio quanto dos lipídios. Porém, seria desejável
que nenhuma alteração fosse observada.
Entretanto, se considerarmos que a associação de
ativos neste caso foi possível devido aos lipossomas,
então mesmo com esse escurecimento acreditamos
que ainda seja uma formulação desejável, com um
prazo de validade extemporâneo. Curiosamente a
formulação 8, contendo o ácido alfa lipóico descoloriu ao longo do tempo, uma alteração incomum. Essa
perda de coloração pode estar associada à decomposição do principio ativo.
A estabilidade física foi avaliada, uma vez que este
teste pode fornecer informações sobre a estabilidade
física da formulação ao longo de sua vida de prateleira e o desempenho no momento do uso. Neste
estudo, todas as formulações apresentaram comportamento pseudoplástico, bastante desejável pois,
durante a aplicação do produto na pele, ele é de fácil
espalhamento o que facilita seu uso.
De acordo com os resultados obtidos no estudo reológico, as formulações mantiveram-se estáveis ao
longo do tempo avaliado, principalmente quando estocadas em temperaturas mais baixas.
O passo seguinte dessa pesquisa foi a realização do
estudo de estabilidade química das formulações objeto de estudo. O passo inicial para essa fase do estudo foi a determinação dos comprimentos de onda
de detecção das substâncias ativas. Para isso, elas
foram diluídas, separadamente, e submetidas à varredura em espectrofotômetro, na faixa de 200 a 700
nm e, a partir dos comprimentos de onda de máxima
absorção obtidos selecionamos 333 e 268 nm para a
análise. Quando os lipossomas foram submetidos a
esse teste, foi observado que eles têm ampla faixa
de absorção, não sendo possível estabelecer um
comprimento de onda único, e impossibilitando a
análise das formulações pelo método da espectrofotometria, tendo em vista que os lipídios iriam interferir em todas as análises. Entretanto, o emprego da
CLAE poderia solucionar esse problema, visto que é
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um método de separação de substâncias. Foram
avaliadas diferentes fases móveis e em todas as situações ocorreu sobreposição dos picos. Quando
essa sobreposição de picos ocorre, inviabiliza o estudo quantitativo, pois a análise é feita a partir da
integração das áreas dos picos, que são identificados por comparação dos tempos de retenção obtidos
na amostra com os tempos de retenção obtidos nas
soluções padrão. Considerando que todas as substâncias objeto de estudo são altamente polares e
seus tempos de retenção são tão próximos nessas
condições experimentais, esse fato inviabilizou o
estudo de estabilidade química e o cálculo do prazo
de validade das formulações. Dessa forma, para a
avaliação da estabilidade das formulações, podemos
considerar apenas os demais resultados. Os resultados obtidos nos levam a crer que as formulações
têm uma boa estabilidade, porém não podemos afirmar com certeza qual seria o prazo de validade real.
5. CONCLUSÕES
Nas condições experimentais da presente pesquisa
foi possível concluir que:
•
Das formulações avaliadas, a que apresentou as melhores características sensoriais foi
a de número 1, um gel.
•
Todas as formulações foram estáveis frente
ao teste de centrifugação.
•
As formulações avaliadas não apresentaram
alterações de pH ao longo do tempo, sendo
condiseradas estáveis;
•
•
•
As formulações contendo os princípios ativos, com exceção daquelas contendo apenas ácido lipóico, apresentaram escurecimento gradual ao longo do estudo, sendo
esta alteração mais evidente na formulação
contendo ascorbil fosfato de magnésio.
Todas as formulações apresentaram comportamento pseudoplástico, no estudo reológico, mantendo-se estáveis ao longo do
tempo.
Nas varreduras, os comprimentos de onda
de máxima absorção foram: ácido lipóico:
333 nm; n-6-furfuriladenina: 268 nm; ascorbil
fosfato de magnésio: 257 nm e no caso dos
lipossomas KL diluídos em éter o comprimento de onda não pode ser identificado.
•
Não foi possível realizar o estudo de estabilidade química por CLAE devido à sobreposição dos picos das substancias objeto de
estudo em todas as condições cromatográficas avaliadas.
•
As formulações foram consideradas de estabilidade extemporânea.
6. AGRADECIMENTOS
Os autores agradecem ao Sr. José Mário Limongi Jr.
pelo auxílio técnico prestado.
7. REFERÊNCIAS
[1]. ANVISA (2006) Guia de Estabilidade de
Produtos Cosméticos - Séries Temáticas, volume 1, maio de 2004. Disponível em:
<www.anvisa.gov.br>. (Acesso em 05 de
março 2006).
[2]. LEXIS, L. A.; FASSETT, R. G.; COOMBES,
J. S. (2006) Tocopherol and a-Lipoic Acid
Enhance the Erythrocyte Antioxidant Defence in Cyclosporine A-Treated Rats Basic
& Clinical Pharmacology & Toxicology v. 98,
p.68–73.
[3]. RICHERT, A. SCHRADER AND K.
SCHRADER. (2003) Transdermal delivery of
two antioxidants from different cosmetic formulations. International Journal of Cosmetic
Science, v.25, p.513
[4]. SURESH I. S. RATTAN Hormetic Mechanisms of Anti-Aging and Rejuvenating Effects
of Repeated Mild Heat Stress on Human Fibroblasts (2004) in Vitro Rejuvenation Research. v.7, n.1, p.40-48
[5]. SURESH I.S. RATTAN N6-Furfuryladenine
(Kinetin) as a Potential Anti-Aging Molecule
(2002) Journal of Anti-Aging Medicine. v.5,
n.1, p.113-116.
[6]. SURESH, I.S.; RATTAN, L. S. Gerontomodulatory and Youth-Preserving Effects of Zeatin
on Human Skin Fibroblasts Undergoing Aging (2005) In Vitro Rejuvenation Research
v.8, n.1, p.46-57.
[7]. SANTOS, N. C.; CASTANHO, M. A. R. B. Lipossomas: a bala mágica acertou? (2002)
Quim. Nova, v.25, n.6b, p.181-1185.
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