Atividade de Água no controle microbiológico Tânia M. M. Shibata Decagon Devices LatAm. Queremos conhecer um pouco do seu trabalho e produto. Por favor, selecione uma ou mais opções nas perguntas a seguir e nos envie. Atividade de água ≠ Umidade Atividade de água Medida do estado da energia da água em um sistema. (Qualitativa). Uma qualidade interna que não depende da quantidade de amostra. Umidade Quantidade de água presente em uma amostra sobre base seca ou úmida. Uma propriedade extensiva que depende da quantidade de amostra. Atividade de água = Estado de energia da água Qual a diferença entre a água na esponja e a água no béquer? Entre tantas respostas uma delas é a energia da água. O estado da energia da água na esponja é menor do que o estado da energia da água no béquer. http://aqualabblog.wordpress.com/2012/07/27/basico-sobre-atividadede-agua-por-dr-gaylon-campbell/ Definindo Atividade de água - aw Definições de aw Potencial químico Constante Gases Temperatura µ = µo + RT ln (f/fo) Potencial químico de uma substância pura Fugacidade Definição de atividade Lewis e Randall (1961) : conceito de atividade. A fugacidade é igual a pressão vapor (f = p) aw = f/fo = p/po Pressão de vapor da água na amostra a ºC aw = —————————————————— Pressão de vapor da água pura ºC aw = URE (%) /100 Atividade de água Água pura Por que medir atividade de água? Prever o desenvolvimento microbiano Avaliar as reações químicas e vida de prateleira Estabilidade física Embalagem – proteção contra umidade ambiente. Transferência de umidade entre ingredientes Intercâmbio de umidade com o meio ambiente Predição da curva de isoterma – umidade vs aw Controle de aw para propósito de preservação Produtos desidratados, em pó, liofilizado, ou seja com redução de aw são convenientes economicamente tendo a vida de prateleira aumentada, diminuição de custos com a redução de embalagens, melhora nas propriedades para manuseio, transporte. Produtos minimamente processados podem ter a aw reduzida com adição de mínimo de umectantes. aw e Microbiologia Micro-organismos benéficos Lactobacillus Penicillium Streptoccus Sacharomyces Micro-organismos patogênicos Aspergillus Salmonella S. aureus Fusarium Clostridium Efeito da atividade de água na estabilidade microbiológica A aw é um dos principais fatores para prevenir ou limitar o desenvolvimento microbiano. Em vários casos, o parâmetro aw é responsável pela estabilidade do produto, modula a resposta microbiana e determina qual o tipo de micro-organismo desenvolverá no produto. Condições adversas de aw poderá causar estresse osmótico e provocar a esporulação nos micro-organismos que esporulam e em condições ótimas de aw induzem a germinação e crescimento. A produção de metabólitos secundários (toxinas) também são afetadas pelo valor de aw do meio. Fatores que influenciam o desenvolvimento, sobrevivência e morte dos micro-organismos Atividade de água Temperatura pH Oxigênio Nutrientes Inibidores naturais/preservantes Etc. Proliferação Microbiana – Tecnologia de Barreiras aw e micro-organismos : 56 anos !! Scott, WJ (pesquisador australiano) 1957 “Water Relations of Food Spoilage Microorganisms” Advances Food Research, 7:83-127 Proliferação microbiana Efeito de vários níveis de aw na curva de crescimento e fase estacionária de Staphylococcus aureus. Proliferação microbiana Efeito de aw na redução do crescimento da bactéria Fase estacionária Fase de proliferação exponencial Fase de latência Adaptado de Troller, J. A. (1987). Adaptation and growth of microorganisms in environments with reduced water activity. In: Water activity: Theory and applications to food Rockland, L. B. and Beuchat, L. R. eds. Marcel Dekker, Inc.New York p.101-117. Interação aw -pH Efeito osmótico Célula microbianas têm pressão osmótica interna mais elevada do que o meio ao seu redor, resultando em pressão túrgica exercida sobre a parede da célula, provendo uma força mecânica necessária para a expansão da célula e crescimento. Quando um micro-organismo é colocado em um ambiente com aw reduzida, a água migra do citoplasma da célula e a membrana perde o turgor. A homeostasia (equilíbrio interno) é perturbada e o microorganismo não se multiplicará e permanecerá na fase lag até o equilíbrio ser re-estabelecido. aw Limite para desenvolvimento e toxicidade Micro-organismos aw mínima para Desenvolvimento Produção Toxina Clostridium botulinum (E) 0,95-0,97 0,97 Clostridium botulinum (A) 0,93-0,95 0,94-0,95 Clostridium botulinum (B) 0,94 0,93-0,94 Staphylococcus aureus 0,86 0,87-0,90 enterotoxina A 0,97 enterotoxina B Escherichia coli 0,95 Salmonella 0,93 Listeria monocytogenes 0,93 Bacillus cereus 0,93 Efeito do NaCl e glicerol na aw mínima para desenvolvimento de bactérias patogências Bactéria aw ajustada com NaCl awajustada com Glicerol Clostridium botulinum E 0,966 0,943 Escherichia coli 0,949 0,940 Clostridium perfringens 0,945 0,930 Clostridium botulinum A e B 0,940 0,930 Vibrio parahaemolyticus 0,932 0,911 Bacillus cereus 0,930 0,920 Listeria monocytogenes 0,920 0,900 Staphylococcus aureus 0,860 0,890 Fonte: Chirife, J. 1994 specific solute effects with special reference to S. aureus. Journal of Food Engeineering 22:409-419 Tapia, M. Villegas, Y. & Martinez, A. 1991. Minimal water activity for grwoth of Listeria monocytogenes as affected by solute and temperature. International Journal of Food Microbiology 14:333-337 aw mínima para desenvolvimento de bactérias patogências em meio de cultura com ajuste de aw com sais e açúcares Bactéria NaCl KCl Sacarose Glucose Listeria monocytogenes 0,92 - 0,92 - Vibrio parahaemolyticus 0,936 0,936 0,940 - Clostridium botulinum G 0,965 - 0,965 - Clostridium botulinum E 0,972 0,972 0,972 0,975 Clostridium perfringens 0,945 - - 0,945 Staphylococcus aureus 0,864 - 0,867 - Fonte: Chirife, J. 1993. Physicochemical aspects of food preservation by combined factors. Food Control 4:210-215 Espécie Micotoxina aw mínima Desenvolvimento aw mínima Produção micotoxina Aspergillus flavus Aflatoxina 0,78-0,80 0,83-0,87 Aspergillus parasiticus Aflatoxina 0,82 0,87 Citrinina 0,80 - Aspergillus ochraceus Ocratoxina 0,77-0,83 0,83-0,87 Penicillium cyclopium Ocratoxina 0,81-0,85 0,87-0,90 Penicillium martensii Ácido penicílico 0,79-0,83 0,99 Penicillium cyclopium Ácido penicílico 0,82-0,87 0,97 Penicillium patulum Patulina 0,81-0,85 0,85-0,95 Penicillium expansum Patulina 0,83-0,85 0,99 Aspergillus clavatus Patulina 0,85 0,99 Tricotecina 0,90 - Penicillium citrinum Trichothecium roseum Influência de aw e tipo de soluto no valor de D para alguns bolores, leveduras Bolor / Levedura aw Temperatura °C Soluto Valor D (min) Aspergillus flavus (conidia) 0,99 55 Não 3 0,90 NaCl 70 0,90 Sacarose 66 0,85 Glucose 66 Não 31 0,89 Sacarose 30 0,93 NaCl 30 Sacarose 60 0,92 Sacarose 260 0,84 Sacarose 470 Controle 39 0,93 NaCl 48 0,89 Sacarose 49 Não 21 Penicillium puberulum (conidia) Byssochlamys nivea (ascosporo) 0,99 0,98 0,99 48 75 80 Saccharomyces cerevisiae 0,99 51 (célula vegetativa) 0,97 NaCl 24 0,93 NaCl 13 0,97 Sacarose 49 0,89 Sacarose 53 Proliferação Microbiana Todo micro-organismo tem um nível de aw limitante para sua proliferação. aw limite 0,91 0,86 0,88 0,80 0,70 0,62 0,61 0,60 Micro-organismos Bactéria Gram Negativa Bactéria Gram Positiva Leveduras (limite prática) Produção de micotoxinas Fungos (limite prática) Leveduras osmofilícias Bolores xerofílicos Limite absoluto para micro-organismos Controle de atividade de água Antimicrobianos: nitrito de sódio; nitrato de sódio sorbato de potássio; benzoato de sódio; sulfito; óleos essenciais; defumação Tratamento térmico Refrigeração Flora competitiva Agentes modificadores de aw Sais: NaCl; KCl. Açúcares: Sacarose; Glucose; Umectantes: Gliceróis; Sorbitol. Antiumectantes: Alumínio Silicato de Sódio; Carbonato de Cálcio; Carbonato de Magnésio. Plastificantes: Monoglicerídeos acetilados; Citratos de alquila (embalagens); Óleos vegetais. Instrumentos Decagon AquaLab Series 4TE Duo = atividade de água e umidade Ponto de Orvalho O espelho se resfria até que se forme o orvalho. Célula fotoelétrica detecta o ponto exato da primeira condensação no espelho. Um termopar grava a temperatura na qual ocorreu a condensação. AquaLab então emite um sinal sonoro e apresenta os valores de atividade de água final e temperatura. Agradecemos a sua participação Decagon Devices LatAm R. José Alves dos Santos, 281 Sala 102 Floradas de S. José 12.230-081 S.J dos Campos – SP Fone: (12) 3307-1016 [email protected]