INFECÇÃO HOSPITALAR POR STAPHYLOCOCCUS
AUREUS COM RESISTENTÊNCIA À METICILINA
(MRSA)
Beatriz Villas Bôas
Gabriela Carnevale
Giovana Giacomini
Milena do Valle
PROBLEMA:
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A resistência bacteriana a antibióticos é um grave problema
de saúde pública. Você foi convidado para fazer parte da
comissão de infecção hospitalar de um hospital da rede
pública para investigar a origem clonal de cepas de
Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) em
pacientes internados. Proponha uma estratégia baseada em
tecnologia de DNA, indicando as etapas e métodos a serem
utilizados para fazer essa investigação.
BRAINSTORM
Genômico (total)
Sequenciamento
Coleta de sangue
dos pacientes
Cultura de
S.aureus com
Meticilina
Hot Spot
(parcial)
Extração de
DNA
PCR
SSP ou RFLP
Digestões
(polimorfismos
bem descritos)
ESCOLHAS
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Quais são os polimorfismos relacionados à
resistência de Staphylococcus aureus a
meticilina?
Hospital público --- Relação custo X benefício
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
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O Staphylococcus aureus é encontrado colonizando a microbiota
normal, podendo tornar-se patogênico em condições como a
quebra da barreira cutânea ou diminuição da imunidade. É umas
das causas mais comuns de infecções nosocomiais (infecção
hospitalar).
RESISTÊNCIA À METICININA _ O QUE É?
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Resistência à penincilina.----
Beta-lactamases são enzimas produzidas por algumas bactérias e são
responsáveis por sua resistência a antibióticos beta-lactâmicos.
Foi criado o beta-lactâmico sintético meticilina, que era resistente à ação
das beta-lactamases que o S. aureus produzia.
MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina) -penicillinbinding protein, PBP2
e são resistentes a todos os
antimicrobianos beta-lactâmicos.
RESISTÊNCIA À METICININA _ COMO SE
DÁ?
ISS- 3’ orfx
"cassete cromossômico
estafilocócico mec"
fonte: http://www.staphylococcus.net/
TIPOS DE SCC
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Existem 7 tipos de SCC (I - VII), sendo que o SCCI -III estão
relacionados à infecções hospitalares (HA-MRSA)
Todos possuem a estrutura geral: (mec element)
mecA
2.1-kb mecA
ESCOLHA JUSTIFICADA - IMPLEMENTAÇÃO
Swab das feridas dos pacientes
Cultura de S. aureus em meio met+
Extração de DNA
PCR do gene mecA
Sequenciamento do gene mecA
QUESTÕES
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Onde estão os polimorfismos?
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Quantos são conhecidos?
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Qual seria o tamanho ideal do fragmento para sequenciamento ou digestão?
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Quantas etapas seriam necessárias no processo?
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Relação custo X benefício
campo pulsado).
no uso de enzimas de restrição
(eletroforese de
Polimorfismos existentes no complexo mec.
Análise genética de diversidade e os segmentos de DNA amplificados são
aleatórios.
Resolução ideal X urgência.
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resistencia a meticilina por S.aureus