BACILOS GRAM NEGATIVOS IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL Profa. Cláudia de Mendonça Souza Microbiologia Clínica Depto de Patologia, Faculdade de Medicina, UFF Mais de 30 gêneros e mais de 130 espécies descritas. Encontradas no trato gastrintestinal de animais e seres humanos. Bactérias mais isoladas a partir de amostras clínicas. Exemplos: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabillis, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Salmonella, Shigella. Infecções: urinária, pulmonar, bacteremia, meningite, gastrointestinal, entre outras. Colônias Lactose positivas Colônias Lactose negativas Composição: Peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, cristal violeta, agar, vermelho neutro, água. Composição: Peptona, lactose, eosina, azul de metileno, agar, água. Colônias Lactose negativas (H2S +/ -) Colônias Lactose positivas Composição: peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, tiossulfato de sódio, citrato de amônio férrico, fucsina ácida, azul de timol, agar, água. BACILOS GRAM NEGATIVOS AGAR TRÍPLICE AÇÚCAR FERRO - TSI Utilização apenas da glicose Utilização dos 3 açúcares Glicose, Lactose e Sacarose Produção de H2S Indol - Sulfeto positivo Indol + Urease Citrato - + + + - + Fenilalamina Desaminase - Descarboxilação de aminoácidos: Lisina, Arginina e Ornitina Positivo Negativo Meio de Clark & Lubs + a-naftol e KOH 40% + Vermelho de Metila MEIO RUGAI Kit de EPM MILI: Série de 7 testes em 2 tubos para identificação bioquímica de enterobactérias Produção de gás, H2S, urease, L-triptofano desaminase Motilidade, indol, lisina descarboxilase BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF) Grupo heterogêneo de bactérias aeróbias, não esporulados, que não utilizam carboidratos ou não os degradam através da fermentação (15 famílias). Principais gêneros: Pseudomonas, Acinetobacter, Burkolderia, Stenotrophomonas. Meio O/F: Oxidação/Fermentação BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF) Móveis, flagelos polares Móveis, flagelos peritríquios Pseudomonas, Burkolderia, Stenotrophomonas, Ralstonia Alcaligenes, Achromobacter, Oligella Imóveis, oxidase positivos Imóveis, oxidase negativos Oligella, Flavobacterium, Cryseobacterium Acinetobacter MOBILIDADE/OXIDASE Pseudomonas aeruginosa Bacilo Gram negativo. Móvel. Aeróbio estrito. Pertence ao grupo fluorescente do gênero aeruginosa, P. fluorescens e P. putida (pioverdina): P. Produz pigmentos hidrossolúveis piocianina, piorrubina ou piomelanina a como pioverdina, Espécie de maior importância clínica entre os BGNNF IMPORTÂNCIA CLÍNICA http://gsbs.utmb.edu/microbook/ch027.htm Pseudomonas aeruginosa Diagnóstico Laboratorial Colônias grandes (mucóides bordas irregulares, odor de “uva” Citocromo-oxidase positiva (10 Produção de piocianina ou secas), achatadas, com segundos) Pseudomonas aeruginosa Diagnóstico Laboratorial Crescimento em MacConkey (lactose -) Mobilidade (gota pendente) Crescimento a 42oC Descarboxilação da arginina Agar Mac Conkey Acinetobacter spp Distribuição ampla no solo e na água. Resistência à dessecação. Cerca de 17 espécies descritas. Espécie mais freqüente em amostras biológicas: A. baumannii (A. calcoaceticus-A. baumnannii) Importante patógeno hospitalar Pneumonias associadas a ventilação mecânica, infecção urinária, bacteremia, infecção de pele e feridas. Acinetobacter spp. Cocobacilo Gram-negativo.* Aeróbio estrito, imóvel. Não possui a enzima citocromo-oxidase. Colônias convexas, bordas regulares. * Características morfo-tintoriais semelhantes às dos gêneros Moraxella e Neisseria. Acinetobacter spp. Cresce bem em MacConkey (lactose +). A. baumannii catalase positivo. BACILOS GRAM NEGATIVOS PATÓGENOS OPORTUNISTAS QUE APRESENTAM RESISTÊNCIA INTRÍNSECA & ADQUIRIDA A VÁRIOS ANTIMICROBIANOS CLSI: padronização de testes (BGNNF) apenas para Pseudomonas aeruginosa (16-18h), Acinetobacter spp., Burkolderia cepacia e S. maltophilia (20-24h).