Oxigênio • Aeróbios estritos ou obrigatórios • Aeróbios facultativos • Anaeróbios obrigatórios • Anaeróbios aerotolerantes • Microaerófilas (capnofílicas) Oxigênio Métodos especiais de cultivo Tensão de CO2 Meios de cultura Tipos de Meios de Cultura Meios Diferenciais Meios usados na microbiologia clínica • • • ÁGAR C.L.E.D. USO: meio de cultura que permite o isolamento, contagem e diferenciação de microorganismos isolados de amostras de urina . • • COMPOSIÇÃO : peptona 4 g/l, extrato de carne 3 g/l, peptona péptica de carne 4 g/l, L-cistina 0,128 g/l, lactose 10 g/l, azul de bromotimol 0,02 g/l, gelose 13 g/l. • • PREPARO: Homogenize o pó contido no frasco. Misture 34,2 g de meio desidratado a 1 litro de água destilada estéril até obter uma suspensão homogênea. Aqueça suavemente, agitando com freqüência e deixe ferver até completa dissolução. Esterilizar em autoclave a 121°C durante 15 minutos. Distribuir um volume de 18 ml em placa de Petry (90 x 15 mm) e deixar solidificar (meio pronto para uso). Ph final 7,3 + 0,2 • • • • INOCULAÇÃO : Inocule diretamente a partir da amostra em estudo (urina). INCUBAÇÃO : após a semeadura, as placas devem ser incubadas por 24 horas à 37°C . Meios usados na microbiologia clínica • • • • • Ágar sangue Composição: Peptona bacteriológica 10,0 g/L; extrato nutritivo 10,0 g/L; cloreto de sódio 5,0 g/L; agar 15,0 g/L; sangue de carneiro desfibrinado a 7 %; água para 1 L. - pH 7,3 ± 0,2 • • Descrição: Meio de uso geral para o cultivo de uma grande variedade de microrganismos, inclusive os exigentes. O sangue permite a determinação das reações hemolíticas. • • Modo de utilização: Inocular as placas por inundação de superfície ou por esgotamento do inoculo. Incubar a 35° ± 2°C por 24 a 48 horas. • • • • • • Controle de Qualidade: Microrganismo Crescimento Hemólise Controle Positivo Streptococcus pyogenes ATCC 1614 Bom + Controle Negativo Meio não inoculado Meios usados na microbiologia clínica • Chocolate Base Agar Agar Chocolate Base é recomendado para isolamento cultural de Neisseria gonorrhoeae e outros mecanismos exigentes. COMPOSIÇÃO g/L: · Peptona Proteose: 20.00 · Dextrose: 0.50 · Cloreto de Sódio: 5.00 · Fosfato Dissódio: 5.00 · Agar: 15.00 pH FINAL: 7.3 ± 0.2 COLORAÇÃO: Meio basal tem cor ambar claro. Com adição de Hemoglobina fica com cor marrom chocolate. CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO: Armazenar o pó a temperatura ambiente (abaixo de 30ºC). Meios usados na microbiologia clínica AGAR MACCONKEY • Finalidade de Uso: • Contém sorbitol ao invés de lactose, sendo usado na detecção de descendentes enteropatogênicos de Escherichia coli. • Composição em g/L: • Digestão péptica de tecido animal: 17.00 • Protease Peptona: 3.00 • Sorbitol: 10.00 • Sais biliares: 1.50 • Cloreto de sódio: 5.00 • Cristal Violeta: 0.001 • Vermelho neutro: 0.03 • Agar: 13.50 • pH Final (a 25ºC): 7.1 ± 0.2 • Procedimento de Preparação do Meio de Cultura: • Dissolva 50 gramas em 1000ml de água destilada. Aqueça até ferver agitando levemente para dissolver completamente • o Agar. Esterilizar autoclavando a 15lbs de pressão a 121ºC por 15 minutos. Evitar o superaquecimento. Esfriar para 45• 50ºC e colocar em placas de Petri estéreis. A superfície do meio deverá estar seca quando inoculado Crescimento bacteriano Divisão bacteriana Divisão Bacteriana Formação de esporos Contagem de microrganismos Contagem de microrganismos Contagem de microrganismos