Construção de uma Biblioteca
Genômica
Fagos: veículos de clonagem que
Permitem a clonagem de grandes
Fragmentos (25 Kb)
Célula Bacteriana infectada por fagos
Biblioteca plaqueada para isolamento de genes
Isolamento do gene desejado em uma livraria
genômica
Síntese do cDNA:
Objetivo:
Construção de uma
biblioteca dos genes
expressos
Em uma única reação:
Milhares de fragmentos de cDNAs são]
Ligados ao vetor (fago, plasmídeo):
População de bactérias contendo
plasmídeos ou fagos com inserções
diferentes = biblioteca
Isolamento do gene desejado em uma biblioteca
de cDNA
História da descoberta de
um gene
Clonando um gene em uma biblioteca de expressão
Clonando um gene em uma
biblioteca de expressão
Clonando um gene utilizando PCR (Polimerase Chain Reaction)
Clonando um gene utilizando PCR (Polimerase Chain Reaction
Clonando genes usando iniciadores degenerados
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Metodologias em Biologia Molecular 2