AMOSTRAGEM
E AMOSTRAS
TÉCNICAS DE AMOSTRAGEM
AMOSTRAGEM
RETIRADA
REPRESENTATIVA
DE MATERIAL
PARA ANÁLISE E
CONTROLE
TÉCNICAS DE AMOSTRAGEM
AS NORMAS BRASILEIRAS NBR/IEC 17025 DE
2001 ESTABELECEM QUE:
 TODO LABORATÓRIO DEVE TER PLANO E
PROCEDIMENTO DE AMOSTRAGEM
 NO POP DEVEM CONSTAR DADOS
ESTATÍSTICOS, IDENTIFICAÇÃO DO
AMOSTRADOR, CONDIÇÕES AMBIENTAIS,
CRITÉRIOS DE SELEÇÃO, PLANO DE
AMOSTRAGEM E RETIRADA,
PREPRARAÇÃO DA AMOSTRA E DESVIOS
TÉCNICAS DE AMOSTRAGEM
AMOSTRAGEM:
É A PRIMEIRA ETAPA DENTRO DE UM
C.Q
 A AMOSTRA REPRESENTA O LOTE
TODO
 HÁ TÉCNICAS ESTATÍSTICAS PARA A
AMOSTRAGEM

TÉCNICAS DE AMOSTRAGEM
AS TÉCNICAS DE AMOSTRAGEM DEVEM
SEGUIR ALGUMAS CONSIDERAÇÕES:
TAMANHO DA AMOSTRA
 QUESITOS LEGAIS
 TESTES A SEREM EFETUADOS

AMOSTRA
AMOSTRA:
REPRESENTAÇÃO POR QUANTIDADE,
FRAGMENTOS
OU
PARTES
DE
QUALQUER MATÉRIA-PRIMA, PRODUTO
OU DEMAIS BENS, ESTRITAMENTE
NECESSÁRIO PARA DAR A CONHECER
SUA NATUREZA, ESPÉCIE E QUALIDADE.
AMOSTRA
AS AMOSTRAS PODEM SER:

AMOSTRAS DE REFÊRENCIA

AMOSTRAS INDICATIVAS

AMOSTRAS REPRESENTATIVAS
AMOSTRA
AMOSTRA DE REFERÊNCIA:
Amostra de matérias-primas e de produto
terminado, conservado pelo fabricante no
mínimo até 12 (doze) meses após a data de
vencimento
do
produto
terminado,
devidamente identificadas. A quantidade de
amostra deve ter pelo menos o dobro das
unidades requeridas para efetuar todas as
análises previstas em compêndios oficiais.
AMOSTRA
AMOSTRA INDICATIVA:
É
A AMOSTRA COMPOSTA POR UM
NÚMERO DE UNIDADES AMOSTRAIS
INFERIOR AO ESTABELECIDO PARA A
AMOSTRA
REPRESENTATIVA.
AMOSTRA
AMOSTRA REPRESENTATIVA:
QUANTIDADE
DE
AMOSTRA
ESTATISTICAMENTE CALCULADA,
REPRESENTATIVA DO UNIVERSO
AMOSTRADO.
AMOSTRA
CÁLCULO DA AMOSTRA:
 VÁRIAS FÓRMULAS ESTATÍSTICAS
UTILIZADAS
DEVE-SE CONSIDERAR:
 TAMANHO DA AMOSTRA (n)
 TAMANHO DA POPULAÇÃO (N)
AMOSTRA
DEVE-SE CONSIDERAR:
 COMPLEXIDADE DA AMOSTRA
 DIFERENTES CARACTERISTICAS DAS
FORMAS FARMACÊUTICAS
 NÚMERO DE TESTES REALIZADOS NO
CQ DE UM ÚNICO MEDICAMENTO OU
COSMÉTICO
 NÚMERO MÍNIMO DE UNIDADES A SER
UTILIZADO EM CADA TESTE.
AMOSTRA
DEVE-SE CONSIDERAR:
 DIRETRIZES FARMACOPÉICAS

ASPECTOS LEGAIS

RECOMENDAÇÕES DE ORGÃOS
REGULADORES
AMOSTRA
DEVE-SE DEFINIR O TAMANHO DA
AMOSTRA:

COM FÓRMULAS ESTATÍSTICAS
n=√N
E n = √ N+1
AMOSTRA
CÁLCULOS MAIS COMPLEXOS INCLUEM
DADOS SOBRE INTERVALO DE
CONFIANÇA:
2
n= Z
. p (1-p) , ONDE:
2
E
p É A PROPORÇÃO DO ATRIBUTO NA
POPULAÇÃO, CASO DESCONHECIDO
p=0,50
α
AMOSTRA
Zα  É O VALOR DE Z NO INTERVALO DE
CONFIANÇA α PRETENDIDO.
E0  ERRO AMOSTRAL TOLERÁVEL
AMOSTRA
n= N
.n
0
N + n0
Onde n0 é a primeira aproximação para
amostra
AMOSTRA


O TAMANHO DA AMOSTRA  depende do
número de análises, mas independe do
tamanho do lote, visto que a representatividade
está mais relacionada com a QUALIDADE do
que com a quantidade amostral.
Aspectos que definem a qualidade da amostra:
coleta (condições, prateleiras, equipamentos,
etc.), amostragem (condições assépticas,
temperatura, transporte, acondicionamento,
etc.)
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS:
 DIVERSAS TÉCNICAS PREPARATIVAS
 FINALIDADE É RECUPERAR O ANALITO
DA MATRIZ NUMA ESCALA POSSÍVEL DE
ANALISAR
 REALIZADA QUASE SEMPRE
MANUALMENTE – PONTO CRÍTICO DA
ANÁLISE
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PONTO CRÍTICO – EXATIDÃO E
PRECISÃO DEPENDENTES DE
PROCEDIMENTOS DE PREPARAÇÃO
 MAIOR ESFORÇO POR PARTE DO
OPERADOR.

PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS:
PROCEDIMENTO RÁPIDO COM POUCAS
ETAPAS, CAPAZ DE PRODUZIR
RECUPERAÇÕES QUANTITATIVAS E
REPRODUTIVAS DO ANALITO E
PREFERENCIALMENTE QUE
APRESENTE A POSSIBILIDADE DE
AUTOMAÇÃO.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS:
PROCEDIMENTO RÁPIDO COM POUCAS
ETAPAS, CAPAZ DE PRODUZIR
RECUPERAÇÕES QUANTITATIVAS E
REPRODUTIVAS DO ANALITO E
PREFERENCIALMENTE QUE
APRESENTE A POSSIBILIDADE DE
AUTOMAÇÃO.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS

ALGUNS ANALITOS NÃO REQUEREM
TRATAMENTOS PRÉVIOS – SÃO
ANALISADOS DIRETAMENTE NO
EQUIPAMENTO ANALÍTICO
(CROMATOGRAFIA GASOSA).
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
EXTRAÇÃO LÍQUIDO-LIQUÍDO (LLE):
DISTRIBUIÇÃO DO ANALÍTO ENTRE DOIS
LÍQUIDOS IMÍSCIVEIS EM FUNÇÃO DE UM
COEFICIENTE DE PARTIÇÃO.
 BOA REPRODUTITIBLIDADE, FÁCIL
MANUSEIO
 COMPOSTOS POUCO VOLÁTEIS
 SOLVENTES PUROS
 PRODUZ GRANDE QUANTIDADE DE
RESÍDUOS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
EXTRAÇÃO EM FASE SÓLIDA (SPE)
ADSORÇÃO SELETIVA DO ANALITO EM
MATERIAIS SÓLIDOS E POSTERIOR
DESSORÇÃO COM SOLVENTES. SEGUE
OS MECANISMOS DE CROMATOGRAFIA
EM COLUNA CLÁSSICA.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
EXTRAÇÃO EM FASE SÓLIDA (SPE)
 GRANDE DISPONIBILIDADE MATERIAIS
ADORVENTES
 BAIXO CONSUMO DE SOLVENTES
 ALTAS RECUPERAÇÕES
 TÉCNICA MAIS CARA E MAIS
COMPLICADA QUANDO REALIZADA
MANUALMENTE DEVIDO AO USO DE
CARTUCHOS E DISCOS.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
MICROEXTRAÇÃO EM FASE SÓLIDA
(SPME)
DISTRIBUIÇÃO DO ANALÍTO ENTRE
DUAS FASES IMISCÍVEIS ONDE A FASE
EXTRATORA É UM POLÍMERO QUE
REVESTE UMA FIBRA DE SÍLICA.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
MICROEXTRAÇÃO EM FASE SÓLIDA
(SPME)






TÉCNICA VERSÁTIL
BAIXO CONSUMO DE SOLVENTE
POUCA QUANTIDADE DE AMOSTRA
FIBRAS DE EXTRAÇÃO REAPROVEITÁVEIS
POUCO MATERIAL DE EXTRAÇÃO
DISPONÍVEL
LIMITES ALTOS DE QUANTIFICAÇÃO
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
EXTRAÇÃO POR FLUIDO SUPERCRÍTICO
SOLUBILIZAÇÃO DO ANALÍTO POR UM FLUIDO
NO ESTADO SUPERCRÍTICO QUE DEPOIS É
COLETADO EM UM LÍQUIDO OU ADSORVENTE.
 AMOSTRAS SÓLIDAS, SEMI-SÓLIDAS OU
LÍQUIDAS
 ANALITO PRECISA SER SOLÚVEL NO FLUIDO
SUPERCRÍTICO
 NÃO NECESSITA DE SOLVENTE ORGÂNICOS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
Esquema dos principais componentes do sistema SFE "home-made". 1. Cilindro de
CO2; 2. Banho de gelo; 3. Bomba de circulação; 4. Bomba de HPLC; 5. Câmara de
pré-mistura; 6. Válvula; 7. Forno do GC; 8. Cela de extração; 9. Restritor; 10. Tubo
de coleta e 11. Banho de gelo.
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
EXTRAÇÃO POR MENBRANA
PERMEAÇÃO SELETIVA DO ANALITO ATRAVÉS
E UMA MENBRANA QUE SEPARA DUAS FASES
LÍQUIDAS.
 EFICIENTE NA SEPARAÇÃO DE FÁRMACOS DE
PROTEÍNAS
 MENOR CAPACIDADE DE SEPARAÇÃO E
CONCENTRAÇÃO DO ANALITO
 SEPARAÇÃO MAIS DEMORADA
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PRECIPITAÇÃO PROTÉICA
ADIÇÃO DE SAIS E SOLVENTES ORGÂNICOS
QUE COMPETEM COM AS PROTEÍNAS PELA
ÁGUA DISPONÍVEL.
 TÉCNICA MUITO SIMPLES
 BAIXO CUSTO
 POUCO EFICIENTE NA RETIRADA DE
INTERFERENTES
 BAIXA REPRODUTIBILIDADE
 PERDA DO ANALITO
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS
PREPARAÇÃO DE
AMOSTRAS