Estudo Dirigido I
Bioenergética
Grupo V
Componentes: Diego Salazar
Felipe Martins
João Alfama
Kenner David
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Vários estudos têm sido feitos para o
melhor entendimento do metabolismo dos
carboidratos em Streptococcus. mutans ,
com o objetivo de entender as adaptações
bioquímicas e fisiológicas que permitem
que essa bactéria produza ácidos e seja
capaz de sobreviver em ambientes de
baixo pH na cavidade oral.
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A maioria dos membros da microbiota oral
é dependente de açúcar como fonte de
energia, a digestão de carboidratos
provoca excreção de ácidos orgânicos
resultando na queda do pH oral (na maior
parte do tempo alcalino).
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Isto justifica a necessidade de a bactéria
se adaptar a essas variações.
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1- Qual o objetivo do trabalho?
R: Analisar as diferentes expressões de
enzimas da via glicolítica de células das
bactérias Streptococcus mutans com um
pH neutro e pH ácido.
2- Qual foi a metodologia empregada?
R: Culturas de Stroptococcus mutans
foram cultivadas em condições
anaeróbias, a uma taxa de controlada,
com a glicose como nutriente limitante. As
células são preparadas para passar por
uma eletroforese, através do gel
eletroforético bidimensional.
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3- Identifique na tabela 1, os “ spots” e o nome das
enzimas da via glicolítica até a formação de piruvato.
SPOT Nº
Nome da enzima
3
Glicose quinase
4
Glicose -6- fosfato isomerase
5 (a,b)
6- Fosfofrutoquinase
6 (a-c)
Frutose-1,6- bifosfato aldolase
7 (a-c)
Triosefosfato isomerase
8 (a-h)
Gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase
9 (a,b)
Gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase NADP dependente
10 (a-h)
Fosfoglicerato quinase
11 (a,b)
Fosfogliceromutase
12 (a-i)
Enolase
13 (a-d)
Piruvato quinase
4- Faca um gráfico de barras para cada isoforma de enzima,
envolvida na via glicolítica, mostrando o número de
vezes que a sua expressão foi modificada, quando
crescida em pH 4,0 (comparado com pH 7,0).
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5- A piruvato quinase é uma enzima
chave no metabolismo da glicose em S.
mutans, explique de que maneira ela é
regulada.
R: É ativada pela Glicose-6-Fosfato e
frutose-1,6-bifosfato quando o nível de
fosfato inorgânico está baixo e é
inibida pela alta concentração de
fosfato inorgânico.
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6- Qual seria uma hipótese para
explicar porque atividade da enolase
está fortemente inibida, quando as
bactérias são crescidas em pH 4,0.
R: Devido ao pH estar demasiadamente
ácido, a isoforma “b” da enzima
Fosfogliceromutase desaparece, ela é
enzima anterior na via e necessária
para que haja a ativação da Enolase.
The End