54º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008 Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 Construção e caracterização “in vitro” de vacinas de dna capazes de expressar a oncoproteina E7 do HPV-16 geneticamente fusionada à porção n-terminal da flagelina FliCd de Salmonella enterica sv muenchen Cerqueira, OLD1; Bibancos, M1; Porchia, BFMM1; Diniz, MO1; Ferreira, LCS1 Departamento de Microbiologia, ICB II, Universidade de São Paulo [email protected] 1 Palavras-chave: HPV, DNA Vaccines, Flagellin O câncer cervical é o segundo maior responsável por mortes atribuídas a câncer em mulheres. Aproximadamente 300.000 mortes acontecem por ano em todo o mundo. Dados epidemiológicos demonstram a associação entre a infecção do HPV e o desenvolvimento de Câncer cervical. Sabe-se que num dado momento da infecção, ocorre a integração do genoma viral ao genoma da célula hospedeira e conseqüente expressão de dois oncogenes virais, E6 e E7, o que contribui fortemente para a transformação dessa célula. Dentre os tipos de HPV, sobressaem-se aqueles caracterizados como de alto risco; sobretudo o HPV-16 que é diagnosticado em mais de 50% de todas as lesões neoplásicas do colo uterino. Apesar dos recentes avanços destinados a contenção da disseminação do vírus HPV, como a vacina Gardasil (Merck Shard & Domme); nenhuma vacina terapêutica foi licenciada para uso em humanos. Com base nessas informações, o presente trabalho propõe o uso de vacinas de DNA expressando a oncoproteína E7 do HPV-16 geneticamente fusionada à flagelina FliCd de Salmonella entérica sv müencheun. A escolha da flagelina como adjuvante baseou-se em suas propriedades imunodulatórias e, recentemente descritas, interação com receptores intracelulares do tipo Ipaf desencadeando uma potente resposta inflamatória via NF-КB. Nossos resultados demonstram que as vacinas de DNA foram construídas com êxito. Tal evidência foi observada ao transfectá-las em células COS-7, usando Lipofectamina2000 (Invitrogen); seguida de Imunofluorescência. Paralelamente, Western blott’s foram realizados e mostraram resultados concordantes. Assim, tem-se como perspectiva, a terceira e ultima etapa do trabalho que é a caracterização imunológica e potencial protetor das vacinas de DNA recém construídas. Orgão financiador: CAPES. 338