Acrtr Frrrtrr. Boritrc~rc~tlsc~
20 ( 1): 53-7 (2001)
Kecihido el 16 de julio dc 2000
Aceptado el 3 I de enero de 2001
Controle da Hiperlipidemia em Coelhos Tratados
com ~lavonóidese ~ o r a n t e Naturais
s
do Urucum
Leonardo R. P. LIMA 1, Tinia T. OLIVEIRA 1 *, Taiius J. NAGEM 2, Aloisio S. PINTO 3,
Paulo C. STRINGHETA 4, Maria G . A. OLIVEIRA 1, Adelson L. A. TINOCO 5 ,
Marly L. OLIVEIRA 1 & José F. SILVA 6
1 Departanzerito de Bioqulnzica e Biologia Molecular da Utiiversidade Federal de Vicosa,
36571-000, Vicosa, Mitias Gerais, Brasil. 2 Depto. de Qufnuca da Utliv. Federal de Ouro Preto,
5100-000, Ouro Preto, Mirias Gerais, Brasil. 3 Depto. de Veterindria da Utiiv. Federal de Vicosa,
36571-000, Vicosa,Minas Gerais, Brasil. 4 Depto. de Tecriologia de Alimentos, Univ. Federal de Vicosa,
36571 -000, Vicosa, Mitias Gerais, Brasil. 5 Depto. de Nutricao,
Univ. Federal de Vicosa, 36571 -000, Vicosa,Mirias Gerais, Brasil.
6 Depto. de Zootecnia, Uriiv. Federal de Vicosa, 36571-000, Vicosa,Mirias Gerais, Brasil.
RESUMO. Tendo em vista que a hiperlipidemia se constitui em fator de risco para o sistema cardiocirculatório, levando ao aparecimento da aterosclerose, o presente trabalho foi desenvolvido, objetivando o controle de lipídeos com os flavonóides luteolina e apigenina, bem como do corante natural do urucum, bixina
30% e bixina 95%, em coelhos hiperlipidemicos induzidos com triton. Decorridos 20 horas da aplica~áodo
triton, foram administrados os compostos na dose de 10 mmoVKg e, 24 horas após, dosados no soro dos
animais, colesterol total, colesterol-HDL e triacilgliceróis. Os resultados mostram que os tratamentos foram eficazes em reduzir os níveis de colesterol total; a exceqáo de bixina 30%, mantiveram os níveis elevados de colesterol-HDL e a bixina 30% diminuiu significativamente os valores de triacilgliceróis.
SUMMARY. "Control of Iiyperlipidaeinia iii treated rabbits witli flavonoids aiid iiatural dyes of urucum". The hyperlipidaeniia is a risk factor for the development of atherosclefosis in the cardiovascular system. The present
work evaluated the effects of three winpouiids isolated froin the urucum, the flavonoids luteolin and apigenin
aiid the natural coloriiig bixiii (30% aiid 95%), oii the control of serum lipids in triton-induced hyperlipidaemic
rabbits. After 20 hours tritoii 300mg/Kg weight was administered intraperitoneal(i.p.)the rabbits were injected
¡.p. with bixin 30%. bixiii 95%, luteolin or apigeiiin at the dose of 10 mmol/Kg weigth. 24 hours latter total
cholesterol. cholesterol-HDL and triacylglycerolswere dosed in the serum of the animals. The results showed
that al1 coinpounds were effective iii reduciiig tlie levels of total cholesterol. Except bixin 30% the treatments incresed tlie levels of cliolesterol-HDL, notably apigeiiin by about three fold. Bixine 30% was the only treatment
tliat reduced tlie levels of tracylglicerols. It inay be suggested that these natural wmpounds may have beneficia1
effects iii coiitrolliiig seruiii lipids levels wlieii used as flavoriiig or coloriiig of foods.
~VTRODU@O
Inegável foi a colaboracao do's aditivos sintéticos na nielhoria das caractesísticas sensoriais
dos ali~iieritose na sua preservaciio, contribuindo de forrna significativa n a e x p a n s i i o d a s
agroindústrias. Entretanto, nunca se deixou de
considerar a necessidade d a substituiciio parcial
o u total desses sintéticos por substancias riatiirais, con1 o intuito, priricipalrnerite, d e rrielhorar
a qualidade d o alimento a ser consuniido.
Nesse sentido, pesquisadores tem estudado
unia gama de espécies cultivadas e exóticas, ria
tentativa de se dispor, e n i curto espaco de tempo, de urna variedade d e substancias c o ~ ncarac-
terísticas q u e possam, economicamente, atender
As exigencias mercadológicas l .
Estudos d e s e n v o l v i d o s 2 m o s t r a m q u e o s
efeitos d a é p o c a de controle d e plantas daninhas n o desenvolvimento d e urucueiros (Bixa
orella?za),iia presenca e ausencia de irrigaciio
ern diferentes períodos mostrarn q u e nos períodos d e abril a julho e agosto a novembro houve
maior desenvolvimento desta cultura.
Melhoraniento genético tem sido pesquisado
tarilbérn através d e técnicas d e hibridaciio para
se obter cultivares mais resistentes e com maior
produciio de semerites de urucum 3.
A toxicidade de alguns corantes sintéticos,
PALAVRAS-CHAVE: Luteoliiia, Apigeiiiiia Bixina, Hiperlipideinia, Coelhos.
KEY WORDS: Luteoliii, Apigeiiiii, Bixiii, Hyperlipidaemia. Rabbits.
*
Autor para correspondencia.
ISSN 0326-2383
Lima, I,.R.P., T.T> Oliveira, T.J. Nageni. A.S. Pinto. P.C. Stringheta, M.G.A. Olivcira, A.I..A. 'l'in<~ci.
M.I.. Olivcira & J.1:. Silva
quando utilizados por um longo período pela
indústria cle alimentos, foi generalizada a todos
os corantes sintéticos, fazendo desses pigmentos
uma espécie d e aditivo indesejável ao consumidor 4.
Muito embora, airida seja grande a utilizaciio
d e corantes sintéticos, eles estiio cedendo espago rapidamente para os naturais 5.
O corante de uiucum apresenta-se convencionalmente d e duas formas: ein extrato lipossolúvel (solúvel e m óleo/óleo-resina), na forma
dispersível, no qual a bixina é o princípio ativo,
e em extrato hidrossolúvel, n o qual a nor-bixina
é o princípio ativo 5,6.
Harborne 7 relata o isolamento do urucum
de flavonóides derivados da quercetina, canferol
e da isoramnetina.
Flavonóides polihidroxilados, como a luteolina, fisetina e quercetina, possuem atividade antiproliferativa e m presenca de diferentes linhagens de células cancerígenas (Ex: leucemia, cancer gástrico, d o cólon, ovariano) 810.
Estudos con1 apigenina mostram várias atividades biológicas para este flavonóide. Varnia 11
mostra o seu efeito inibidor, na concentraciio de
10-4 M, sobre a aldose redutase (98% de inibi@o). Esta enzinia converte acúcares em álcool e
pode formar cataratas em indivíduos diabéticos.
Outros pesquisadores testaram a aciio antiinflamatória de apigenina dimetil éter, mostrando
que este composto, na dose d e 75 mg/Kg de
peso, apresentou inibigiio em processos inflamatórios em patas d e ratos, cujo edema foi induzid o por carragenina 12. Também foi verificado a
capacidade desta substancia de inativar o visus
Iandia, machos, con1 peso medio d e 2500 I
200g e idade mitdia de oito semanas, provenientes d o Departamento de Zootecnia da Lniversidade Federal de Vi~osa.Os animais receberam
racao comercial Nutricoelhos e água a vontade.
Após um período de 5 dias de adaptacio em
gaiolas apropriadas, os coell-ios foram separados
em 6 gmpos, contendo cada um 6 animais, distribuídos ao acaso, que receberam as uhstáncias, conforme descrito:
Gsupo 1 - (Racio), Gmpo 2 - (Kacao + 'Priton), Grupo 3 - (Raga0 + Triton + Bixina. 30'H~).
Grupo 4 - (Racao + Triton + Bixina. 95?4, Gnipo 5 - (Raga0 + Triton + Luteolina), Gmpo 6 (Raciio + Triton + Apigenina).
Para induzir a hiperlipidemia, foi administrad o triton (Sigina St Louis, MO, USA), na dose de
300 mg/ Kg de peso, dissolvido em SaCl 0,7?4,,
por via intsaperitoneal. Após 20 horas da administraciio d o Triton, foram administradas as
substancias (apigenina, luteolina, bixina a 30V1 e
a 90%) na dose de 10 mmol/Kg de peso corporal, tarnbém, por via intsaperitoneal.
Decorridos 24 horas dessas administracoes.
foram coletadas amostras de sangue dos anirnais, atsavés da veia marginal da orelha, sendo,
ern seguida, centrifugadas a 7100 x G, durante
15 minutos, para obtenciio d o soro. As dosagens
sorológicas foram efetuadas, utilizando-se kits
Biolab e o aparelho Alize (hnalizaclor Xutomático de Bioquímica) Os resultados obtidos foram
expressos em nig/dL de colesterol. colesterolHDL e triacilgliceróis.
HSVl
RESULTADOS E DISCUSSAO
13.
Dentro da busca d e noiras acoes biológicas
para a classe de flavonóides e também dqs corantes d o urucum, o presente traballio foi desenvolvido con1 o objetivo de testar o efeito de
bixina (30%), bixiria (95%), beni corno dos flavonóides luteolina e apigenina, também presentes no usucum, em coelhos con1 hiperlipideniia
induzida coni triton.
MATERIAL E MÉTODOS
As subst21icias utilizadas nos testes biológicos forani extraídas d o urucuni sendo que os
flavonóides foraiii purificados por crori~atografia
preparativa líquida d e alta eficiencia.
Este experi~iientofoi instalado no delineamento inteiraniente a o acaso, coi11 seis tratainentos, eril seis repetigoes.
Foram ~itilizadoscoelhos da raga Nova Ze-
Os resultados obtidos e111 ii-ig/dL de colesterol total, colestesol-HDL e triacilgliceróis estio
apresentados nas Tabelas 1. 2 e 3. respecti1.ariiente.
De acordo con1 os resultados obtidos observa-se que a bixiria 30?4 foi rnais eficaz na seducao de colesterol~otaldo que a bixina W1)ó Li
primeira apresentou urna percentageiii de variac i o de 61,73?/n,enquanto a segunda reduziu em
38,25%. Nota-se tambérri que os fla~,onóidesreduzirani o colesterol total, a luteolina ern 5 2 , 5 9 0
e a apigenina eni 49,%%. Possíveliiierite. a bixina a 30% deve ter apresentado uiii resultado
iiiellior que a biuina a 9j1b.ó,porclue a prinieisa
deve estar iiiistcii-ada a coricrntsac6es iiiaioies
de flavonóides e a bixina a 959'0 n i o contérii os
flavonóides.
Estes resultados s i o interessantes unia vez
que na utilizagao de ~riedicameritos usuais se
ocla farn~acéirriccibonaerense - vol. 20 no 1 - aiio 2001
O/o
Grupos
1-~agao
(R)
76,16 I 2,78
2-R + Tritoii i?3
676,O.i + 43,15
3-R + T + B~xuia30%
258,73 + 42,Ol b
4-R + T + Bixuia 95%
417,44 t 23,80 a
de variaqk em rela$áo a:
-
Colesterol (mg/dL)
Raq5o
Raqao + Triton
448,ll *
-38,25 *
Tabela 1.Valores niédios de colesterol total (terro-padrao) de coelhos hiperlipidernicos uiduzidos com triton.
Médias seguidas de mesrna letra minúscula nao diferem entre si pelo teste de Tukey (P>0,05)
Estatisticamente diferente dos grupos-conmole pelo teste de Dumett (P<0,05).
DMS (diferenga r r h n a significativa) Dunnett = 84,10 mg/dL.
Grupos
Colesterol-HDL(mg/dL)
Raqb
1-Ras20 (R)
2-R
+
Triton (13
3-R + T
Rqáo + Triton
284,96 t 36,01
403,51 t 60,46
Bixina 30%
274,20 t 35,58 c
-3,78
-32,05
4-R + T + Bixina 95%
575,Ol t 93,39 b
101,79 *
42,50 *
5-R
488,81 t %,63 bc
71,54
21,14
1.539,91t 12,72 a
440,40
281,63 *
+
+
T + Luteolina
6-R + T + Apigeriina
Tabela 2. Valores médios de colesterol-HDL (*erro-padriio) de coelhos hiperlipidGmicos uiduzidos com triton.
Médias seguidas de mesma letra minúscula nao diferem entre si pelo teste de Tukey (P>0,05).
Estatisticamente diferente dos gruposcontrole pelo teste de Dumett (P<0,05).
DMS (diferenca mínima significativa) Dumett 164,66 mg/dL.
-
% de variqiio em relq5o a:
Triacilgüceróis(mg/dL)
Grupos
Rac50
Racáo + Triton
2-R + Tritoii (T)
1.501,82 + 95,36
4-R + T
+
Bixuia 95%
1.694,00 I 27.37 a
844,OO
12,60 '
5-R + T
+
Luteolina
1.530,38t 51,83 a
752,82
l,90
Tabela 3. Valores niédios de triacilgliceróis (?erro-padrao) de coelhos hiperlipidemicos uiduzidos com triton.
Médias seguidas de mesina letra minúscula 1150 diferem entre si pelo teste de Tukey (P>0,05).
Estatisticamente diferente dos gruposcontrole pelo teste de Dunnett (P<0.05).
DMS (diferenga múiima significatica) Diinnett 166,68 mg/dL.
-
utiliza un1 medicamento para controle de colesterol e outro para controle de tsiacilgliceróis.
Novos estudos deveriio ser conduzidos para
que se possa ter o inecanisrno de aciio destes
coinpostos.
De acordo coin os resultados apresentados
no Tabela 2, observa-se que os tratamentos efetuados, con1 a exceciio de bixina 30%, elevaram
os níveis de colesterol-HDL, sendo significativos
para bixina 95% e para a luteolina, em relaciio
Lima, L.R.P., T.T> Oliveira, T.J.Nagem, A.S. Pinto, P.C. Stringheta, M.G.A. Oliveira, A.L.A. Tinoco, M.L. Oliveira & J.F. Silva
ao grupo 2 (R + Triton), que já se encoritrava
hiperlipidSmico. Deste modo, os resultados siio
positivos, visto que esta lipoproteína realiza o
transporte do colesterol da circulaciio periférica
para o fígado, onde será nietabolizado. Tanto a
bixina nas duas concentracoes quanto a apigenina e luteolina foram interessantes no controle
d o colesterol-1-IDL. Nos seus efeitos farmacológicos é interesante lenibrar que se os seus níveis
se mantém constantes ou se siio aumentados
pelo efeito de constituintes químico isto é bom
para o organismo animal. Esta lipoproteína retira colesterol da circulaciio sanguínea e portanto
deve se rnanter em seus níveis ou ser aumentada. Esta aciio já pode ser considerado um dos
mecanismos de aciio dos compostos testados.
Na Tabela 3, observa-se que os riíveis de
triacilgliceróis tiveram uma maior percentagem
de reduciio, utilizando-se também a bixina 2
30%.
Para explicar o mecanismo de aciio de alguns flavonóides, pesquisadores tem mostrado
diversos dos seus efeitos biológicos.
Flavonóides tem apresentados uma variedade de papéis em células de mamíferos. Muitos
possuem atividade antioxidante, antialérgica, anti-hemorrágica. Eles também inibem diversas erizinias, como as fosfolipases, ciclooxigenase, lipoxigenase e aldose redutase 12.14.
Estudos realizados 15 mostrarn o efeito de flavonódes sobre a estrogenio sintetase citocromo
p-450 que catalisa a conversiio de androgeriio
para estrogEnios. Diversos flavonóides tern a ~ i i o
iriibidora sobre a aromatizaciio da androstenodiona para estrona e de testosterona para estradiol. Segundo estes pesquisadores, os flavonóides podem competir corn os esteróides e sua interagao corn certas monoxigenases alteram o
metabolismo dos hormonios esteroidais. Esta
agiio se reverte de grande importancia, visto que
os glicorticóides aumentam a taxa de niobilizaciio de gordura pelo aumento da permeabilidade da membrana celular.
Além da capacidade de reduzir lipídeos na
circulaciio sanguínea, como mostsam nossos resultados, outros pesquisadores relatam que diversos eventos que ocorrem nas desordens cardíacas, como a aterosclerose, podem ser prevenidas ou interrompidas em seus vários processos pela aciio dos flavonóides.
Nestes eventos, tem-se que os monossacarídeos, ao sofrerern auto-oxiclaciio, provocani
abertura de cadeias em esuuturas de colágenos
ligados 5 a@cares (tais conio glicose, rnanose,
galactose, xilose, fsutose, etc.). Ocorre urna gli-
caciio, que é unia condensaciio niio enzimática,
no qual um a@car reage corn uma amina, produzindo um glicato. Os produtos formados siio
charnados compostos de Amadori, quando ocorre uma reaciio entre urn carboidrato da classe
das aldoses e unia aniiria. Tambérn forniam-se
glicatos, clramados produtos de Meys, que siio
formados pela reagiio entre urii carboidrato da
classe das cetoses e uma aniina. Os flavonóides
poden1 atuar nesta etapa, iiripedindo a glicacao l b .
Logo após a reaciio de glicacao, os glicatos
reagem corn o LDL e ocorre uma glico-oxida@o. Nestas reacoes, formam-se radicais livres e
também o LDL pode ser oxidado. Os produtos
firiais da glicaciio (AGE) se ligam a receptores
(RAGE) nas células endoteliais e fagócitos mononucleares. Nesta etapa, os flavonóides podem
atuar inipedindo a oxidaciio do LDL 17. Esta etapa pode estar associada a uma replicardo vira1
e/ou a uma replicaciio bacteriana, que corn seus
compostos antigenicos e toxinas inflamatórias
siio responsáveis pela ativacio dos leucócitos e
liberaciio de mediadores inflamatórios. Apos a
ativaciio dos leucócitos, ocorre a adesao e diapedese. Em seguida, ocorre uma liberagiio de
fatores inflamatórios que viio para as células
n~uscularese há estímulo de formaciio de células em espuma e proliferaciio celular. Quando
todos os processos associados ocorrem, formase a placa aterosclerótica corn depósito de colesterol, levando a oclusiio da artéria, resultando
ern isquemia e ativaciio de várias proteases. Esta
ativaciio das proteases local e sistemica induz a
instabilidade da placa e degerieraciio dos miócitos. Os flavonóides, além de impedirem a glicaciio e a oxidaciio do LDL, atuam tambem nestes
processos como anti-vísus, anti-bacterianos e antiinflania:órios, bem como se ligam a receptores
de estsogenios, provocando efeitos benéficos na
transduciio de sinais 18.
Recentes estudos sobre o mecanismo de
asa0 dos flavonóides no rnetabolisnio lipídico
t61ri riostrad do que éstes corilpostos siio capazes
dc aumentar a atividade da lipase, enzima que
hidi'olisa os triacilgliceróis 19.
Pode-se concluir que a apigenina tem um
efeito rnelhor sobre os níveis de colesterol HDL.
Já para os níveis de colesterol e triacilgliceróis o
melhor tsatamento foi o de bixina a 30%. Portanto é possível sugerir que a bixina como corante e a apigenina como flavorioide flavorizante siio substancias indicadas conio as de maiores
efeitos benéficos sobre os níveis de lipídeos séricos.
acta farmacéutica boriaererrse - vol. 20 no 1 - año 2001
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