Diversidade dos tipos de HPV presentes em
tumores do colo do útero de mulheres
matriculadas no INCA
1
1
2
3
3
3
João Paulo Vidal , Shayany Pinto Felix , Neile A. Carvalho , Cláudia Bessa , Lina M. T. M. Vieira , Patrícia Patury , Vanessa F.
3
3
2
1
Franco , Aurenice C. L. Carvalho Silva , Liz Almeida , Miguel A. M. Moreira
1
2
Divisão de Genetica, Instituto Nacional de Cancer, Brazil; Divisão de Pesquisa Populacional, Instituto Nacional de Cancer, Brazil;
3
Serviço de Ginecologia, Instituto Nacional de Cancer, Brazil
INTRODUÇÃO
RESULTADOS PARCIAIS
O câncer cervical é o segundo câncer mais comum entre as mulheres em todo o mundo, com cerca
de 500.000 novos casos por ano e cerca de 230 mil mortes. Esta incidência é cerca de duas vezes
maior em países menos desenvolvidos em relação aos mais desenvolvidos. Vários estudos têm
demonstrado que em todo o mundo o papilomavírus humano (HPV) desempenha um papel
fundamental no desenvolvimento de displasia cervical. Mais de 120 tipos diferentes de HPV foram
descritos, e cerca de 40 podem infectar o epitélio do trato anogenital, além de outras áreas da
mucosa do corpo. Pelo menos 15 tipos de HPV de alto risco (HPV, incluindo os tipos 16, 18, 31, 33,
35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 e 82), estão fortemente associados com a progressão para o
câncer cervical invasivo. Sendo os tipos virais 16 e 18 o mais freqüente no câncer cervical e lesões de
alto grau do colo do útero. O HPV16 é o genótipo mais comum tanto em lesões pré malignas quanto
em carcinomas invasivos. Vários estudos epidemiológicos têm mostrado que as variantes intratipo
de HPV16 diferem na sua associação entre as neoplasia cervicais, como também na persistência
viral e na freqüência de recorrência da doença. Estas variantes são classificadas por origem
geográfica distinta, sendo agrupadas em seis diferentes grupos principais: Europeias (E), da Ásia
(as),Asian-American (AA), Africano 1 (AF1), Africano 2 (AF2), e Norte Americana 1 (NA1). Embora
poucos estudos tenham sido realizados sobre a distribuição de variantes HPV16 no câncer do colo
do útero não escamoso, existe uma evidência clara de que as variantes não européia são mais
comuns em adenocarcinoma do que em carcinoma de células escamosas, o que sugere um
comportamento clinico mais agressivo desses subtipos, especialmente o subtipo Africano.
Até o presente momento, foram coletadas amostras de 317 mulheres, sendo o materil de 262
submetidos ao protocolo de tipagem do virus. Do total, 179 eram HPV16; 28 amostras HPV18; 12
amostras HPV45, os HPVs dos tipos 35 e 58 com 7 amostras cada, 5 amostras HPV31, os HPVs dos
tipos 33 39 52 59 73 com 3 amostras cada, 2 amostras HPV68 e os HPVs 26 e 51 com uma amostra
cada. Em 5 amostras não foi possivel a detecção do DNA viral. Das 179 amostras tipada com HPV16,
até o momento 76 amostras foram submetidas ao protocolo de subtipagem e classificadas
filogeneticamanete quanto ao seu subtipo.
Frequencia dos tipos de HPV encontrados
HPV39
HPV33
3
3
HPV35
7%
HPV58 HPV31
5
7
Não detectado
HPV59 HPV26
5
1
3
HPV51
HPV73
1
HPV52
3
3
HPV45
12
HPV18
28
HPV 16
179
Estimar a freqüência dos tipos de HPV em amostras de câncer cervical uterino de mulheres
encaminhadas ao Hospital do Câncer II do Instituto Nacional de Câncer.
- Avaliar os tipos de HPV e variantes intra-tipo dos tumores encontrados e a sua associação com
diferentes tipos histológicos de tumores no colo do útero.
- Associar todos os resultados ao dados epidemiológicos das pacientes
58
59
56
53
52
50
49
48
47
43
42
41
35
34
28
27
26
25
24
23
21
19
18
15
13
12
11
3
4
6
7
38
44
30
40
36
14
62
EUROPEU GERMAN AF536179.1
EAST ASIAN TYPE AF534061.1
22
65
29
ASIATICO AMERICANO AF402678.1
17
63
20
60
2
8
16
31
32
33
45
51
54
1
AFRICAN TYPE II AF472509.1
5
10
55
61
AMAZONICO HM057182.1
64
AFRICAN TYPE I AF536180.1
9
37
39
46
57
HPV 45 EF202166.1
MATERIAL E MÉTODOS
Serão incluídas no estudo, no período entre julho de 2011 a julho de 2014, cerca de 800
mulheres matriculadas ao Hospital do Câncer II do Instituto Nacional de Câncer portadoras de
câncer de colo de útero nos estádios IB2, IIA, IIB, IIIA, IIIB, IVA e IVB.
Pacientes
Questionário
epidemiológico
Extração do DNA
Biopsia do tumor
RNA latter / Freezer –80ºC
Divisão de Genética e BNT – INCA
PCR (PGMY / GP)
Sequenciamento
0,1
Alinhamento
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Tipagem de HPV
-
Franco EL, Mahmud SM, Tota J, Ferenczy A, Coutlée F. The expected impact of HPV vaccination on the accuracy of cervical cancer
screening: the need for a paradigm change. Arch Med Res, 40:478-485 (2009).
-
Franco EL, Cuzick J, Hildesheim A, de Sanjosé S. Chapter 20: Issues in planning cervical cancer screening in the era of HPV vaccination.
Vaccine, 24 Suppl 3:171-177 (2006).
-
Gravitt PE, Peyton CL, Alessi TQ, Wheeler CM, Coutlée F, Hildesheim A, Schiffman MH, Scott DR, Apple RJ. Improved amplification of
genital human papillomaviruses. J Clin Microbiol;38 357-61 (2000)
Amostras HPV16
-
Jit M, Chapman R, Hughes O, Choi YH. Comparing bivalent and quadrivalent human papillomavirus vaccines: economic evaluation based
on transmission model. BMJ, 343:d5775 (2011).
PCR e Sequenciamento
com primers E6
-
Ministério da Saúde/INCA Diretrizes brasileiras para o rastreamento do câncer do colo do útero – MS/INCA
http://www1.inca.gov.br/inca/Arquivos/Diretrizes_rastreamento_cancer_colo_utero.pdf. (2011).
-
zur Hausen H. Papillomaviruses in the causation of human cancers – a brief historical account. Virology, 384:260-265 (2009)
-
Villa LL, Costa RL, Petta CA, Andrade RP, Ault KA, Giuliano AR, Wheeler CM, Koutsky LA, Malm C, Lehtinen M, Skjeldestad FE, Olsson SE,
Steinwall M, Brown DR, Kurman RJ, Ronnett BM, Stoler MH, Ferenczy A, Harper DM, Tamms GM, Yu J, Lupinacci L, Railkar R, Taddeo FJ,
Jansen KU, Esser MT, Sings HL, Saah AJ, Barr E. Prophylactic quadrivalent human papillomavirus (types 6, 11, 16, and 18) L1 virus-like
particle vaccine in young women: a randomised double-blind placebo-controlled multicentre phase II efficacy trial. Lancet Oncol.271278 (2005)
Subtipagem do HPV16
Análise filogenética
Suporte Financeiro
INCT para o Controle do Cancer (CNPq, Brazil), Pan American Health Organization (PAHO), INCA, Ministério da Saúde
Projeto Gráfico: Serviço de Edição e Informação Técnico-Científica / INCA
OBJETIVO