Modalidade da bolsa:
PROBITI/FAPERGS
Projeto: Pró-Amazônia
Camila Cantele, Roselei Claudete Fontana, Marli Camassola, Aldo José Pinheiro Dillon
Universidade de Caxias do Sul - Instituto de Biotecnologia - Laboratório de Enzimas e Biomassa
As fenol-oxidases são enzimas lignolíticas dotadas de um sistema
Nos cultivos em biorreator de agitação mecânica, foram
enzimático com baixa seletividade de substratos que lhes permite oxidar
obtidos valores superiores da atividade de lacases nas condições de
compostos fenólicos inespecíficos (Modin et al., 2014).
pH não controlado (1950,6±42,7 U.mL-1) em 96 h, livre - pH 6
(1901,2±85,5 U.mL-1) em 96 h e fixo - pH 7 (1851,8±0,0 U.mL-1) em
Essa capacidade confere às fenol-oxidases elevada significância
biotecnológica, pois possibilita a utilização dessas enzimas em
144 h de cultivo.
processos de biorremediação destacando a necessidade de obtê-las em
Para peroxidases totais, foram observados valores máximos
nas condições de pH não controlado (518,5±0,0 U.mL-1) e fixo - pH 5
larga escala e com custos reduzidos (Madhavi & Lele, 2009).
(555,5±52,3 U.mL-1) em 72 e 96 h, respectivamente. A condição livre
uma espécie de Agaricales (VE-111) em biorreator de agitação
- pH 6 apresentou títulos superiores de manganês peroxidases,
mecânica em diferentes condições de pH. Adicionalmente, foi avaliada a
sendo observado pico de 52,2±1,8 U.mL-1 em 168 h.
Linhagem
VE-111
(espécie de
Agaricales)

pH não controlado
pH fixo em 5,0; 6,0
e 7,0
pH não controlado
e controlado após
atingir 5,0; 6,0 e
7,0
)
Caldo resultante de
180 g/L de batata
50 mL/L de solução
mineral (MTV-20)
20 g/L de glicose
100 mL/L de inóculo
(Wolfenden & Willson,
1982);
0
24
48
60
20
-1
B
600
400
200
0
0
24
48
72 96 120 144 168
Tempo (h)
15000
C
40
0
72 96 120 144 168
Tempo (h)
800
D
10000
5000
0
Controle
L1
L2
L5
72 96 120 144 168
Tempo (h)
Figura 1. Variação da atividade de lacases (A), peroxidases totais (B), manganês peroxidases
(C) e atividade de lacases após processo de concentração (D) em cultivo de uma espécie de
Agaricales em biorreator de agitação mecânica.
0
24
48
Para os testes de concentração, a condição fixo pH 7 - 144 h,
Cultivo
conduzido
por 168
horas
Amostras
retiradas a
cada 24
horas
Extrato
enzimático
da condição
fixo pH 7 em
144 horas
apresentou atividade de lacases de 4098,7±342,1 U.mL-1 quando
concentrada 2 vezes; e para a concentração de 5 vezes de
11358,02±427,6 U.mL-1, sendo a atividade do extrato controle de
3037,03±64,1 U.mL-1. Portanto, o aumento da atividade de lacases
foi praticamente proporcional à concentração. Dessa forma, essa
Análises
Enzimáticas
Lacases;
500
-1
Cultivos em
biorreator
Diferentes
condições de pH


1000
Manganês peroxidases (U.mL
Extrato obtido de 200
g/L de batata
50 mL/L de solução
mineral (MTV-20)
10 g/L de glicose
1500
0
Foto: Letícia O. da Rosa
Inóculo
2000
A
Lacases (U.mL-1)
Lacases (U.mL
-1
)
manutenção das lacases após processo de concentração.
Fixo - pH 5
Livre - pH 5
Fixo - pH 6
Livre - pH 6
Fixo - pH 7
Livre - pH 7
pH não
controlado
Peroxidases totais (U.mL
2500
)
Nesse contexto, foi avaliada a produção de fenol-oxidases por
Concentração
em 2 e 5 
metodologia poderia ser utilizada para fins comerciais.
Peroxidases totais
(Heinzkill et al., 1998);
Manganês
Peroxidases (Kuwahara
Os resultados obtidos evidenciam a relevante produção de
fenol-oxidases por esta espécie de Agaricales, enfatizando o seu
et al., 1984).
potencial para aplicação em processos biotecnológicos.
HEINZKILL, M.; BECH, L.; HALKIER, T.; SCHNEIDER, P.; ANKE, T. (1998). Appl. Environ. Microbiol. 64:
1601-1606.
KUWAHARA, M.; GLENN, J. K.; MORGAN, M. A.; GOLD, M. H. (1984). FEBS Lett. 169: 247-250.
MANDELS, M.; REESE, E.T. (1957). J. Bacteriol. 73:269-278.
MADHAVI, V.; LELE, S.S. (2009). BioResources, 4:1694–1717.
MODIN, O; HAI, F. I.; NGHIEM, L. D.; BASILE, A. (2014). IWA publishing, UK, 2014 (ISBN:
9781780400655), pp. 299-333.
WOLFENDEN, B. S.; WILLSON, R. L. (1982). J. Chem. Soc. Perkin Trans. II. 02: 805-812.