Animais de Laboratório
Identificação dos
Genes de Pigmentação
Erick
Introdução:
O camundongo, ao longo dos anos, tem sido o animal mais utilizado na pesquisa
científica. E como se sabe, o background genético dos animais de laboratório pode
ser um fator crucial para o sucesso de um experimento. Para os animais inbred,
portanto é de extrema importância, o monitoramento genético das linhagens. Este
monitoramento pode ser feito através de diversas técnicas, como o PCR, análise de
histocompatibilidade, análise de particularidades fisiológicas e patológicas de
certas linhagens, e identificação de genes através da pelagem. Dentre estas
técnicas, a de identificação dos genes de pigmentação possui vantagens para uma
instituição pública: não onera o biotério, pois é um método simples e barato, e se
ajusta dentro da rotina normal de criação dos animais, não necessitando outros
materiais. Porém, tem como fator limitante, atender somente o controle das
linhagens albinas e explorar um pequeno número de loci.
Objetivo:
Testar a isogenicidade das linhagens albinas de camundongos através da
verificação da expressão de genes na pelagem da prole destes camundongos com
outros de linhagens de referência.
Perfil Genético:
O conceito de um perfil genético é baseado no fato de que cada linhagem de
camundongos possui localizado em seus cromossomos um grupo único de genes
que os distinguem de outras linhagens. O desenvolvimento e subsequente
manutenção de uma linhagem inbred por um sistema estrito de criação irá produzir
uma linhagem de camundongos que apresenta um conjunto idêntico de pares de
genes.
Pigmentação de Pelagem:
Presentemente, são conhecidos cerca de 127 genes que influem na pigmentação da
pelagem, mesmo que o gene em questão não seja um gene de pigmentação (ex.
bcl2).
Para este trabalho, 4 genes se destacam em importância:
Símbolo: a
Cromossomo 2
Nome: nonagouti
Alelos: a (não agouti), A (agouti)
Atua nos folículos capilares afetando a
distribuição e quantidade de pigmentos
Símbolo: Tyrp1
Cromossomo 4
Nome: tyrosinase-related protein 1
Alelos: b (marrom), B (preto)
Influi na produção de melanina
controlando a cor do pelo
Símbolo: Tyr
Cromossomo 7
Nome: Tyrosinase
Alelos: c (albino), C (não albino)
A homozigose c/c é dominante sobre
os outros genes.
Símbolo: Myo5a
Cromossomo 9
Nome: myosin Va
Alelos: d (diluído), D (não diluído)
Pode causar uma estrutura dos
melanócitos anormal.
Metodologia:
O teste consiste na realização de cruzamentos entre um camundongo albino da
linhagem que se deseja avaliar com um camundongo pigmentado de uma linhagem
de referência.
As linhagens albinas utilizadas neste trabalho foram: Balb/c, A e A/J. Estas estão
entre as linhagens albinas mais utilizadas em pesquisas científicas, portanto muitos
laboratórios possuem uma criação destes animais. Por isso essas linhagens foram
escolhidas.
As linhagens de referência usadas foram a DBA/2 e C57BL/6. Estas também
muito comuns na pesquisa científica e fáceis de se obter para ocasião do teste.
Como já se sabe quais são os alelos para os genes em questão que cada linhagem
possuí, é possível prever a cor da pigmentação dos filhotes.
Os cruzamentos realizados estão especificados nos resultados.
A e A/J
Balb/C
C57BL/6
DBA/2
Resultados:
O Cruzamento entre uma linhagem albina e a linhagem de referência, causa a
heterozigose do gene Tyr. Os genes que estavam ‘escondidos’ nos camundongos
albinos, podem ser avaliados na cor da pelagem da prole.
Os resultados que obtivemos foram de acordo com o esperado para o genótipo da
prole:
Cruzamento Balb/C e DBA/2 – Filhotes Marrom Agouti
Balb/C x DBA/2
A e A/J x DBA/2
A x C57BL/6