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Talita da Silva Mendes de Farias
Os efeitos da pinealectomia sobre a expressão de clock genes e lipogênese no
tecido adiposo branco epididimal de ratos adultos Wistar
Tese apresentada ao Programa de PósGraduação em Fisiologia Humana do Instituto
de Ciências Biomédicas da Universidade de
São Paulo, para obtenção do Título de Doutor
em Ciências.
Área de Concentração: Fisiologia Humana
Orientador: Prof. Dr. Fábio Bessa Lima
Versão original
São Paulo
2014
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RESUMO
FARIAS, T. S. M. Os efeitos da pinealectomia na expressão de Clock genes e
lipogênese no tecido adiposo branco epididimal de ratos adultos Wistar. 2014.
87 f. Tese (Doutorado em Fisiologia Humana) - Instituto de Ciências Biomédicas,
Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014.
A melatonina, um hormônio produzido pela glândula pineal, é secretada de maneira
cíclica num período de 24 horas, sendo essa oscilação importante para influenciar
uma série de eventos circadianos, como por exemplo, a expressão dos clock genes
(efeito cronobiótico), além de modular de maneira endócrina uma série de funções
em vários tecidos periféricos. Assim, admitindo-se que a expressão circadiana dos
clock genes esteja envolvida na regulação do metabolismo energético e que tal
padrão oscilatório esteja sob influência da melatonina, o presente estudo teve o
objetivo de analisar o processo de incorporação de glicose em lipídeos no tecido
adiposo de animais controles e pinealectomizados para verificar se a ausência da
pineal e, portanto, de melatonina afeta este importante processo metabólico do
tecido adiposo branco, além de verificar se a pinealectomia possui interferência na
expressão dos genes relógio no tecido branco epididimal de ratos. Os nossos
resultados mostram que a pinealectomia alterou o padrão circadiano de expressão
dos clock genes (Clock, Per2 e Cry1) e aumentou significativamente a expressão de
Rev-erbα no Zt 8. A ausência de melatonina também alterou a expressão, ao longo
de 24 horas, do gene Pparγ, indicando que a pinealectomia pode interferir no
metabolismo de lipídeos. Além disso, a ausência da glândula pineal provocou
alterações na secreção de hormônios promovendo um aumento nas concentrações
séricas de corticosterona e diminuição nas concentrações de leptina. No entanto, o
processo de incorporação de glicose em lipídeos ao longo de 24 horas não foi
alterado pela pinealectomia. Também foi demonstrado que, no momento em que
ocorre maior esvaziamento gástrico e, portanto maior liberação de nutrientes (ZT4),
os animais controle, mas não os animais pinealectomizados, apresentam um pico de
atividade das enzimas lipogênicas, sugerindo que a melatonina e a alimentação
atuam cooperativamente no controle da atividade dessas enzimas, o que faz supor
que haja uma co-regulação desses fatores no processo de síntese de novo de
ácidos graxos. Sendo assim, os pontos relacionados acima mostram indícios de que
a ausência da melatonina durante o período de 4 semanas, já é capaz de afetar uma
série de eventos moleculares e metabólicos. Porém se os animais permanecessem
pinealectomizados por um tempo mais prolongado, poderia ocorrer uma maior
dessincronização nesses animais, e assim poderíamos evidenciar repercussões
metabólicas mais significativas.
Palavras-chave: Pinealectomia. Clock genes. Tecido adiposo branco. Metabolismo.
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ABSTRACT
FARIAS, T. S. M. The effects of pinealectomy on the expression of Clock
genes and lipogenesis in epididymal white adipose tissue of Wistar adults
rats. 2014. 87 p. [Ph. D. thesis (Human Physiology)] - Instituto de Ciências
Biomédicas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014.
Melatonin, a hormone produced by the pineal gland, is secreted in a cyclic
fashion over 24 hours, and this oscillation is important for influencing a range of
circadian events, such as the expression of clock genes (chronobiotic effect), in
addition to endocrine modulation of a number of functions in various peripheral
tissues. Thus, assuming that expression of clock genes is involved in the
regulation of energy metabolism and that oscillatory pattern is under influence
of melatonin, the present study aimed to analyze the process of glucose
incorporation into triglycerides in adipose tissue of pinealectomized and controls
animals. The intention was to verify whether the absence of the pineal gland
and therefore melatonin affects this important metabolic process of white
adipose tissue, and to determine whether pinealectomy interferes with the
expression of clock genes in epididymal white adipose tissue of rats. Our
results show that pinealectomy alters the circadian pattern of clock genes
expression (Clock, Per2 and Cry1) and increases significantly the expression of
Rev-erbα in Zt 8. The absence of melatonin also altered the expression of
Pparγ gene over 24 hours, indicating that pinealectomy may interfere with the
metabolism of lipids. Furthermore, the absence of the pineal gland promoted
an increase in corticosterone and decrease in leptin plasma levels. However,
the incorporation of glucose into lipids over 24 hours was not altered by
pinealectomy. It was also shown that, at the time that occurs most gastric
emptying, and therefore greater release of nutrients (ZT4), the control animals
but not the pinealectomized animals show a peak of activity of lipogenic
enzymes, suggesting that melatonin and food act cooperatively to control the
activity of these enzymes. This leads to the supposition that there is a coregulation of these factors in the de novo synthesis of fatty acids process. Thus,
the points listed above show evidence that the absence of melatonin during the
four-week period, it is able to affect a number of molecular and metabolic
events. However if animals remain pinealectomized for a longer time, a larger
desynchonization could occur in these animals, and so we could highlight the
most significant metabolic impact.
Keywords: Pinealectomy. Clock genes. White adipose tissue. Metabolism.
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1 INTRODUÇÃO
Muitos comportamentos e atividades fisiológicas, na grande maioria dos
seres vivos, ocorrem de maneira rítmica circadiana, permitindo que estes
organismos antecipem e se preparem para as mudanças ambientais. A
manutenção dessa ritmicidade é importante para uma relação temporal
constante entre os diversos ritmos fisiológicos e para determinação de uma
ordem temporal interna imprescindível à saúde do organismo (JOHNSTON et
al., 2009).
Em seres humanos e demais mamíferos, processos como o ciclo
sono/vigilia, a alimentação, a temperatura corporal, a secreção hormonal e o
metabolismo, ocorrem de maneira circadiana e são "governados" por um
relógio biológico. Assim, alterações nessa organização temporal estão
envolvidas na etiologia de várias doenças e na redução da expectativa de vida
do indivíduo (CARDINALI et al., 2011; GARAULET; MADRID, 2009).
Os núcleos supraquiasmáticos (NSQ), localizados no hipotálamo, são os
principais marcapassos centrais que dirigem todo o processo circadiano
enviando sinais neurais e humorais para outras áreas do cérebro e também
para tecidos periféricos. A melatonina, hormônio produzido pela glândula pineal
e cuja secreção é controlada pelo ciclo claro/escuro, é um dos hormônios
responsáveis por conferir sincronização a tecidos centrais e periféricos. Por ser
produzida apenas no período noturno, ela age como um zeitgeiber interno,
sincronizando diversas funções fundamentais para a sobrevivência dos
organismos e conferindo ritmos a uma série de funções neuroendócrinas que
modulam, por exemplo, o ciclo sono-vigília e a atividade reprodutora e
metabólica de várias espécies (BARTNESS; GOLDMAN, 1989).
Muitos estudos indicam que distúrbios na secreção de melatonina estão
associados com uma maior propensão para o desenvolvimento de diversas
doenças como a obesidade e diabetes tipo 2. Corroborando estes estudos,
evidências sugerem que trabalhadores noturnos possuem maior risco de
desenvolver doenças metabólicas, cardiovasculares, aumento no risco de
desenvolvimento de câncer e outras doenças crônicas (WANG et al., 2011).
A melatonina, além de atuar diretamente sobre os diversos tipos
celulares presentes no organismo, também tem a capacidade de agir em
5
sistemas osciladores (efeito cronobiótico), controlando principalmente a
transcrição e tradução dos clock genes. Estes estão envolvidos na autogeração
de ritmicidade circadiana, apresentando um padrão temporal de expressão em
diferentes tecidos como o hepático, o renal e o adiposo.
Diante de todos os trabalhos que apontam uma forte associação entre
secreção de melatonina, metabolismo do tecido adiposo branco e clock genes,
o nosso estudo teve como principal objetivo verificar as alterações provocadas
pela ausência da melatonina na expressão dos clock genes (ao longo de 24 h)
no tecido adiposo e as possíveis consequências metabólicas para este tecido.
6
CONCLUSÃO
A ausência de melatonina em ratos, durante o período de quatro
semanas:

Não altera a capacidade de incorporação de glicose em lipídeos
em adipócitos brancos epididimais durante o período de 24 h;

Não altera o ritmo alimentar;

Indica que a melatonina e a alimentação possam atuar de modo
complementar (co-regulação) na sincronização de atividade de
enzimas envolvidas no processo de lipogênese de novo (análise
de correlação). A forte correlação positiva entre atividade
enzimática X conteúdo estomacal encontrada em animais controle
no ZT4, momento este que coincide com a maior taxa de
esvaziamento gástrico, foi perdida em animais pinealectomizados;

Não promove alterações na atividade máxima das enzimas
G6PDH, Málica, Fas e
ACL, embora a atividade desta última
tenha apresentado uma tendência em ser maior nos animais
PINX;

Promove um aumento nos níveis de corticosterona entre os ZTs 8
e 16 e diminuição na concentração plasmática de leptina;

Não afeta a secreção de insulina e adiponectina;

Altera o ritmo circadiano dos clock genes Clock, Per2 e Cry1 nos
animais pinealectomizados;

Aumenta de modo significativo a expressão do gene Rev-erbα
nos animais pinealectomizados no Zt 8;

Promove uma alteração no padrão diário oscilatório de expressão
do gene Pparγ nos animais pinealectomizados.
Sendo assim, os pontos relacionados acima mostram indícios de que a
pinealectomia pode afetar uma série de eventos moleculares e metabólicos e
promover dentro de um prazo mais longo de tempo certo grau de
dessincronização nos animais com ausência de melatonina, uma vez que
foram encontradas diferenças no padrão circadiano dos genes do relógio
7
Clock, Per2 e Cry1 e da expressão do gene Rev-erbα, e ainda promoveu
alterações na produção e atividade de hormônios e enzimas. No entanto, o
período de quatro semanas de pinealectomia mostrou-se relativamente curto
para se evidenciarem repercussões metabólicas mais significantes no animal.
8
REFERÊNCIAS1
AKASHI, M.; TSUCHIYA ,Y.; YOSHINO, T.; NISHIDA, E. Control of intra
cellular dynamics of mammalian periods proteins by casein kinase I epsilon
(CKI epsilon) and CKI delta in cultured cells. Mol. Cell. Biol., v. 22, p. 19631703, 2002.
ALONSO-VALE, M. I. C.; ANHE, G. F.; BORGES-SILVA, C. N.; ANDREOTTI,
S.; PERES, S. B.; CIPOLLA-NETO, J.; LIMA, F. B. Pinealectomy alters adipose
tissue adaptability to fasting in rats. Metabolism., v. 53, p. 500-506, 2004a.
ALONSO-VALE, M. I. C.; BORGES-SILVA, C. N.; ANHE, G. F.; ANDREOTTI,
S.; MACHADO, M. A.; CIPOLLA-NETO, J.; LIMA, F. B. Light/dark cycledependent metabolic changes in adipose tissue of pinealectomized rats. Horm.
Metab. Res., v. 36, p. 474-479, 2004b.
ALONSO-VALE, M. I. C.; ANDREOTTI, S.; BORGES-SILVA, C.N.; MUKAI, P.
Y.; CIPOLLA-NETO, J.; LIMA, F. B. Intermittent and rhythmic exposure to
melatonin in primary cultured adipocytes enhances the Insulin and
dexamethasone effects on leptin expression. J. Pineal Res., v. 41, p. 28-34,
2005.
ALONSO-VALE, M. I. C.; ANDREOTTI, S.; MUKAI, P. Y.; BORGES-SILVA, C.
N.; PERES, S. B.; CIPOLLA-NETO, J.; LIMA, F. B. Melatonin and the circadian
entrainment of metabolic ano hormonal activies in primary isolated adipocytes.
J. Pineal Res., v. 45, p. 422-429, 2008.
AHIMA, R. S.; FLIER, J. S. Adipose tissue as an endocrine organ. Trends
Endocrinol. Metab., v. 11, p. 327-332, 2000.
ANDREWS, J. L.; ZHANG, X.; MCCARTHY, J. J. CLOCK and BMAL1 regulate
MyoD and are necessary for maintenance of skeletal muscle phenotype and
function. Proc. Natl. Acad. Sci., v.107, p. 19090–19095, 2010.
ARENDT, J. Melatonin and the mammalian pineal gland. London: Chapman
e Hill, 1995.
ARMSTRONG, S. M. Melatonin and circadian control in mammals. Experientia,
v. 45, p. 932-938, 1989.
BARTNESS, T. J.; WADE, G. N. Photoperiodic control of seasonal body weight
cycles in hamsters. Neuro Biobehav. Rev., v. 9, p. 599-612,1985.
BARTNESS, T. J.; GOLDMAN, B. D. Mammalian pineal melatonin: a Clock for
all seasons. Experientia, v. 45 p. 939-945, 1989.
1
De acordo com:
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. NBR 6023: informação e documentação:
referências: elaboração. Rio de Janeiro, 2002.
9
BASALOBRE, A. Clock genes in mammalian peripheral tissues. Cel. Tissue
Res., v. 309, p. 193-199, 2002.
BASS, J.; TAKAHASHI, J. S. Circadian integration of metabolism and energetic.
Science, v. 3, p. 1349-1354, 2010.
BAZIN, R.; FERRE, P. Assays of lipogenic enzymes. Methods Mol. Biol., v.
155, p. 121-127, 2001.
BECKER-ANDRE, M.; WIESENBERG, I.; SCHAEREN-WIEMERS, N.; ANDRE,
E.; MISSBACH, M.; SAURAT, J. H.; CARLBERG, C. Pineal gland hormone
melatonin binds and activates an orphan of the nuclear receptor superfamily. J.
Biol. Chem., v. 269, p. 28531–28534, 1994.
BERGMEYER, H. U.; BERNT, E.; SCHMIDT, F.; STORK, H. Methods of
enzymatic analysis. Orlando, FL: Academic Press; 1974
BRAY, M. S.; YOUNG, M. E. Circadian rhythms in the development of obesity:
potential role for the circadian Clock within the adipocyte. Obes. Rev., v. 8, p.
169-181, 2007.
BORGES-SILVA, C. N.; FONSECA-ALANIZ, M. H.; ALONSO-VALE, M. I. C.;
TAKADA, J.; ANDREOTTI, S.; PERES, S. B.; CIPOLLA-NETO, J.; PITHONCURI, T. C.; LIMA, F. B. Reduced lipolysis and increased lipogenesis in
adipose tissue from pinealectomized rats adapted to training. J. Pineal Res., v.
39, p. 178-184, 2005.
BUSINO, L.; BASSERMANN, F.; MAIOLICA, A.; LEE, C., NOLAN, P. M.;
GODINHO, S. I.; DRAETTA, G. F.; PAGANO, M. SCFFbxl3 controls the
oscillation of the circadian Clock by directing the degradation of cryptochrome
proteins. Science, v: 316, p. 900–904. 2007.
CAILOTTO, C.; VAN HEIJNINGEN, C.; VAN DER VLIET, J.; VAN DER
PLASSE, G.; HABOLD,C.; KALSBEEK, A.; PEVET, P.; BUIJS, R. M. Daily
rhythms in metabolic liver enzymes and plasma glucose require a balance in
the autonomic output to the liver. Endocrinol., v. 149, p. 1914–1925, 2008.
CAILOTTO, C.; LEI, J.; VLIET, J. V. D.; HEIJNINGEN, C. V.; EDEN, C. G. V.;
KALSBEEK, A.; PE´VET, P.; RUUD, M.; BUIJS R. M. Effects of Nocturnal Light
on (Clock) Gene Expression in Peripheral Organs: A Role for the Autonomic
Innervation of the Liver. PLoS One, v. 21, p. e5650, 2009. doi:
10.1371/journal.pone.0005650.
CANAPLE, L.; RAMBAUD, J.; DKHISSI-BENYAHYA, O.; RAYET, B.; TAN, N.
S.; MICHALIK, L.; DELAUNAY, F.; WAHLI, W.; LAUDET, V. Reciprocal
regulation of brain and muscle Arnt-likprotein 1 and peroxisome proliferatoractivated receptor α defines a novel positive feedback loop in the rodent liver
circadian Clock. Mol. Endocrinol., v. 20, p. 1715–1727, 2006.
10
CARDINALI, D. P.; CANO, P.; JIMENEZ-ORTEGA, V.; ESQUIFINO, A.I.
Melatonin and the metabolic syndrome: physiopathology and therapeutically
implications. Neuroendocrinology, v. 93, p.133- 142, 2011.
CIPOLLA-NETO, J.; AFECHE, S. C. Glândula pineal. In: AIRES M. M.
Fisiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 980-990.
COOMAN, S C. P.; VAN DEN BERG, S. A. A.; HOUBEN, T.; KLINKEN, J. V.;
BERG, R. V. D.; PRONK A, C. M.; HAVEKES, L. M.; ROMIJN, J. A.; DIJK, K.
W. V.; BIERMASZ, N. R.; MEIJER, J. H. Detrimental effects of constant light
exposure and high-fat diet on circadian energy metabolism and insulin
sensitivity. FASEB J., v. 27, p. 1721- 1732, 2013
CURI, R. Integração do metabolismo. In: CURI, R.; PROCÓPIO, J. Fisiologia
Básica. São Paulo: Ed. Guanabara Koogan, 2009. p. 783.
DALLMANN, R.; WEAVER, D. R. Altered body mass regulation in male
mPeriod mutant mice on high fat diet. Chronobiol. Int., v. 27, p. 1317–1328,
2010.
DAMIOLA, F.; LE MINH, N.; PREITNER, N.; KORNMANN, B.; FLEURYOLELA, F.; SCHIBLER, U. Restricted feeding uncouples circadian oscillators in
peripheral tissues from the central pacemaker in the suprachiasmatic nucleus.
Genes Dev., v. 14, p. 2950–2961, 2000.
DELEZIE, J.; DUMONT, S.; DARDENTE, H.; OUDART, H.; GRÉCHEZCASSIAU, A.; KLOSEN, P.; TEBOUL, M.; DELAUNAY, F.; PAUL PÉVET, P.;
CHALLET E. The nuclear receptor REV-ERB is required for the daily balance of
carbohydrate and lipid metabolism. FASEB J., v. 26, p. 3321–3335, 2012.
DIAZ, B.; BLAZQUEZ, E. Effect of pinealectomy on plasma glucose, insulin and
glucagon levels in the rat. Horm. Metab. Res., v. 18, p. 225-229, 1986.
DI LORENZO, L.; DE PERGOLA, G.; ZOCCHETTI, C.; L’ABBATE, N.; BASSO,
A.; PANNACCIULLI, N.; CIGNARELLI, M.; GIORGINO, R.; SOLEO, L. Effect of
shift work on body mass index: results of a study performed in 319 glucosetolerant men working in a Southern Italian industry. Int. J. Ob-Es. Relat. Metal.
Desora., v. 27, p. 1353–1358, 2003.
DUAN, S. Z.; IVASHCHENKO, C. Y.; WHITESALL, S. E.; D’ALECY, L. G.;
DUQUAINE, D. C. Hypotension, lipodystrophy, and insulin resistance in
generalized PPARgamma-deficient mice rescued from embryonic lethality. J.
Clin. Invest., v, 117, p, 812–822, 2007.
FINE, J. B.; DI GIROLAMO, M. A simple method to predict cellular density in
adipocyte metabolic incubations. Intern. J. Obesity., v. 1, p. 764-768, 1997.
11
FONSECA-ALANIZ, M. H.; TAKADA, J.; ALONSO-VALE, M. I. C.; LIMA, F.
B.The adipose tissue as a regulatory center of the metabolism. Arq. Bras.
Endócrino. Metanol., v. 50, p. 216-229, 2006.
FROY, O. Metabolism and circadian rhythms – implications for obesity. Endocr.
Rev., v.31, p. 1-24, 2010.
FUKUDA, H.; IRITANI, N. Diurnal variations of lipogenic enzyme mRNA
quantities in rat liver. Biochim. Biophys. Acta., v. 1086, n. 3, p. 261-264, 1991.
GARALEUT, M.; MADRID, J. A. Chronobiology, genetics and metabolic
syndrome. Cur. Open Lip. idol., v. 20, p. 127–134, 2009.
GAVRILA, A.; PENG, C. K.; CHAN, J. L.; MIETUS, J. E.; GOLDBERGER, A. L.;
MANTZOROS, C. S. Diurnal and Ultradian Dynamics of Serum Adiponectin in
Healthy Men: Comparison with Leptin, Circulating Soluble Leptin Receptor, and
Cortisol Patterns. J. Clin. Endocrinol. Metab., v. 88, p. 2838–2843, 2003.
GIMBLE, J. M.; FLOYD, Z. E. Fat circadian biology. J. Appl. Physiol., v. 107,
n. 5, p. 1629-1637, 2009.
GIMBLE, J. M.; SUTTON, G. M.; BUNNELL, B. A.; PTITSYN, A. A; FLOYD, Z.
E. Prospective influences of circadian clocks in adipose tissue and metabolism.
Nat. Rev. Endocrinol., v. 7, p. 98-107, 2011.
GRIMALDI, B.; BELLET, M. M.; KATADA, S. PER2 controls lipid metabolism by
direct regulation of PPARg. Cell Metab., v. 12, p. 509–520, 2010.
GODINO, S. I.; MAYWOOD, E. S.; SHAW, L.; TUCCI, V.; BARNARD, A. R.;
BUSINO, L.; PAGANO, M.; KENDALL, R.; QUWAILID, M. M.; ROMERO, M. R.;
O’NEILL, J.; CHESHAM, J. E.; BROOKER, D.; LALANNE, Z.; HASTINGS, M.
H.; NOLAN, P. M. The after-hours mutant reveals a role for Fbxl3 in determining
mammalian circadian period. Science v. 316, p. 897– 900, 2007.
GÓMEZ-ABELLÁN, P.; HERNÁNDEZ-MORANTE, J. J.; LUJÁN, J. A.; MADRID,
J. A.; GARAULET, M. Clock genes are implicated in the human metabolic
syndrome. International Journal of Obesity, v. 32, p. 121-128, 2008.
GÓMEZ-ABELLÁN, P.; GÓMEZ-SANTOS, C.; MADRID, J. A.; MILAGRO, F. I.;
CAMPION, J.; MARTÍNEZ, J. A. Site-specific circadian expression of leptin and
its receptor in human adipose tissue. Nutr. Hosp., v. 26, p. 1394-1401, 2011.
GÓMEZ-ABELLÁN, P.; MADRID, J. A.; ORDOVÁS, J. M.; GARAULET, M.
Aspectos cronobiológicos de la obesidad y el síndrome metabólico.
Endocrinol. Nutr., v. 59, p. 50-61, 2012.
GÓMEZ-SANTOS, C.; GÓMEZ-ABELLÁN, P.; MADRID, J. A.; HERNÁNDEZMORANTE, J. J.; LUJÁN, J. A.; ORDOVAS, J. M.; GARAULET, M. Circadian
rhythm of Clock genes in human adipose tissue. Obesity, v.17, p. 1481-1485,
2009.
12
GONDRET, F.; FERRÉ, P.; DUGAIL, I. ADD-1/SREBP-1 is a major determinant
of tissue differential lipogenic capacity in mammalian and avian species. J.
Lipid. Res., v. 42, p. 106-113, 2001.
GREEN, C. B.; TAKAHASHI, J. S.; BASS, J. The Meter of Metabolism. Cell, v.
134, p. 728-742, 2008.
GUO, B.; CHATTERJEE, S.; LI, L.; KIM, J. M.; LEE, J.; YECHOOR, V.
K.; MINZE, L.; HSUEH, W.; MA, K . The clock gene, brain and muscle Arnt-like
1, regulates adipogenesis via Wnt signaling pathway. FASEB J., v. 26, p. 3453
- 3463, 2012.
HARDELAND, R. Melatonin: Signaling mechanisms of a pleiotropic agent.
BioFactors, v. 35, p. 183 - 192, 2009.
HE, W.; BARAK, Y.; HEVENER, A.; OLSON, P.; LIAO, D. Adipose-specific
peroxisome proliferator-activated receptor gamma knockout causes insulin
resistance in fat and liver but not in muscle. Proc. Natl. Acad. Sci., v. 100, p.
15712–15717, 2003.
HOLMBACK, U.; FORSLUND, A.; FORSLUND, J.; HAMBRAEUS, L.;
LENNERNAS, M.; LOWDEN, A.; STRIDSBERG, M.; AKERSTEDT, T.
Metabolic responses to nocturnal eating in men are affected by sources of
dietary energy. J. Nutr., v. 132, p. 1892–1899, 2002.
JOHNSTON, J. D.; FROST, G.; OTWAY, D. T. Adipose tissue, adipocytes and
the circadian timing system. Obes. Rev., v. 10, p. 52-60, 2009.
JOHNSTON, J. D. Adipose circadian rhythms: Translating cellular and animal
studies to human physiology. Molecular and Cellular Endocrinology, v, 349,
p. 45–50, 2012.
KAEFFER, B.; PARDINI, L. Clock genes of mammalian cells: pratical
implications in tissue culture. In Vitro Cell. Dev. Biol. Animal, v. 41, p. 311-320,
2005.
KREIRER, F.; FLIERS, E.; VOSHOL, P. J.; EDEN, C. G.; HAVEKES, L. M.;
KALSBEEK, A. Selective parasympathetic innervation of subcutaneous and
intra-abdominal fat – functional implications. J. Clan. Invest., v. 110, p. 12431250, 2002.
KALSBEEK, A.; LA FLEUR, S.; VAN HEIJNINGEN, C.; BUIJS, R. M.
Suprachiasmatic GABAergic inputs to the paraventricular nucleus control plasm
glucose concentrations in the rat via sympathetic innervation of the liver. J.
Neurosci., v. 24, p, 7604–7613, 2004.
LAMIA, K. A.; SACHDEVA, U. M.; DITACCHIO, L.; WILLIAMS, E.;
C.,ALVAREZ, J. G.; EGAN, D. F.; VASQUEZ, D. S.; JUGUILON, H.; PANDA,
S.; SHAW, R. J.; THOMPSON, C. B.; EVANS, R. M. AMPK regulates the
13
circadian clock by cryptochrome phosphorylation and degradation. Science, v.
326, p. 437–440, 2009.
LICINIO, J.; MANTZOROS, C.; NEGRAO, A. B.; CIZZA, G.; WONG, M. L.;
BONGIORNO, P. B.; CHROUSOS, G. P.; KARP, B.; ALLEN, C.; FLIER, J. S.;
GOLD, P. W. Human leptin levels are pulsatil and inversely related to pituitaryadrenal function. Nat. Med., v. 3, p. 575–579, 1997.
LIMA, F. B.; MATSUSHITA, D. H.; HELL, N. S.; DOLNIKOFF, M. S.;
OKAMOTO, M. M.; CIPOLLA NETO, J. The regulation of insulin action in
isolated adipocytes. Role of the periodicity of food, time of day and melatonin.
Braz. J. Med. Biolg. Res., v. 27, p. 995-1000, 1994.
LIMA, F. B.; MACHADO, U. F.; BARTOL, I.; SERAPHIM, P. M.; SUMIDA, D. H.;
MORAES, S. M. ; HELL, N. S. ; OKAMOTO, M. M. ; SAAD, M. J. ; CARVALHO,
C. R.; CIPOLLA-NETO, J. Pinealectomy causes glucose intolerance and
decreases adipose cell responsiveness to insulin in rats. Am. J. Physiol., v.
275, p. 934-941, 1998.
MACCHI, M. M.; BRUCE, J. N. Human pineal physiology and functional
significance of melatonin. Frontiers in Neuroendocrinology, v. 25, p. 177-195,
2004.
MANTELE, S.; OTWAY, D. T.; MIDDLETON, B.; BRETSCHNEIDER, S.;
WRIGHT, J.; ROBERTSON, D.; DEBRA, J. SKENE, D. J.; JOHNSTON, J. D.
Daily Rhythms of Plasma Melatonin, but Not Plasma Leptin or Leptin mRNA,
Vary between Lean, Obese and Type 2 Diabetic Men. PLoS One, v. 7, p.
e37123, 2012.
MENNA-BARRETO, L. O tempo na biologia. In: MARQUES N.; MENNABARRETO L. Cronobiologia: Princípios e Aplicações. São Paulo: Ed. Edusp,
1997. p. 18-21.
NOSJEAN, O.; NICOLAS, J. P.; KLUPSCH, F.; DELAGRANGE, P.; CANET,
E.; BOUTIN, J. A. Comparative pharmacological studies of melatonin receptor:
MT1, MT2 e MT3/QR2. Tissue distribuition of MT3/QR2. Biochem.
Pharmacol., v. 61, p.1369-1379, 2001.
OISHI, K.; SHIRAI, H.; ISHIDA, N. CLOCK is involved in the circadian
transactivation of peroxisome-proliferator-activated receptor α (PPARα) in mice.
Biochem. J., v. 386, p. 575–581, 2005.
OXENKRUG, G. F.; MCINTYRE, I. M.; GERSHON, S. Effects of pinealectomy
and aging on the serum corticosterone circadian rhythm in rats. J. Pineal Res.,
v. 1, p. 181-185, 1984.
PANDI-PERUMAL, S. R.; TRAKHT, I.; SRINIVASAN, V.; SPENCE, D. W.;
MAESTRONI, G. J.; ZISAPEL, N.; CARDINALI, D. P. Physiological effects of
14
melatonin: role of melatoni receptors and signal transduction pathways. Prog.
Neurobiol., v. 85, p. 335-53, 2008.
PENICAUD, L.; COUSIN, B.; LELOUP, C.; LORSIGNOLO, A.; CASTEILLA, L.
The autonomic nervous system, adipose tissue plasticity, and energy balance.
Nutrition, v. 16, p. 903-908, 2000.
POCAI, A.; OBICI, S.; SCHWARTZ, G. J.; ROSSETTI, L. A brain-liver circuit
regulates glucose homeostasis. Cell Metab., v. 1, p. 53–61, 2005.
PREITNER, N.; DAMIOLA, F.; LOPEZ-MOLINA, L.; ZAKANY, J.; DUBOULE,D.;
ALBRECHT, U.; SCHIBLER, U. The orphan nuclear receptor REV-ERB α
controls circadian transcription within the positive limb of the mammalian
circadian oscillator. Cell v. 110, p. 251–260, 2002.
PRUNET-MARCASSUS, B.; DESBAZEILLE M., BROS A., LOUCHE K.,
DELAGRANGE P.; RENARD P.; CASTEILLA L.; PENICAUD L.: Melatonin
reduces body weight gain in Sprague Dawley rats with diet-induced obesity.
Endocrinology, v. 144, p. 5347-5352, 2003.
QIN, L. Q.; LI, J.; WANG, J.; XU, J. Y.; KANEKO, T. The effects of nocturnal life
on endocrine circadian patterns in healthy adults, Life Sci., v. 73, p. 1467-1475,
2003.
RASMUSSEN, D. D.; MITTON, D. R.; LARSEN, S. A.; YELLON, S. M. Agingdependent changes in the effect of daily melatonin supplementation on rat
metabolic and behavioral responses. J. Pineal Res., v. 31, p. 89-94, 2001.
REDDY, P.; ZEHRING, W. A.; WHEELER, D. A.; PIRROTA, V.; HADFIELD, C.;
HALL, J. C.; ROSBASH, M. Molecular analisys of the period locus in Drosophila
melanogaster and identification of a transcripition involved in biological rhythms.
Cell, v. 38, p. 701-710, 1984.
REITER, R. J. Pineal melatonin: cell biology of its synthesis and of its
physiological interactions. Endocrine Rev., v. 12, p. 151-180, 1991.
RODBELL, M. Metabolism of isolated fat cells. Effects of hormones on glucose
metabolism and lipids. J. Biol. Chem., v. 239, p. 357-380, 1964.
ROSEN, E. D.; WALKEY, C. J.; PUIGSERVER, P.; SPIEGELMAN, B. M.
Transcriptional regulation of adipogenesis. Genes Dev., v. 14, p. 1293–1307,
2000.
RUDIC, R. D.; MCNAMARA, P.; CURTIS, A. M.; HOGENESCH, J. B.;
FITZGERALD, G. A. BMAL1 and CLOCK, two essential components of the
circadian clock, are involved in glucose homeostasis.PLoS Biol., v. 2, p. e377,
2004.
RUSAK, B. ; ZUCKER I. Neural regulation of circadian rhythms. Physiol. Rev.,
v. 59, p. 449-526, 1979.
15
SAAD, M. F.; RIAD-GABRIEL, M. G; KHAN, A., SHARMA, A.; MICHEL, R.;
JINAGOUDA, S. D.; BOYADJIAN, R.; STEIL, G. M. Diurnal and ultradian
rhythmicity of plasma leptin: effects of gender and adiposity. J. Clin.
Endocrinol. Metab., v. 83, p.453–459, 1998
SAHAR, S.; ZOCCHI, L.; KINOSHITA, C.; BORRELLI, E.; SASSONE-CORSI,
P. Regulation of BMAL1 protein stability and circadian function by GSK3 betamediated phosphorylation. PLoS ONE, v. 5, p. e8561, 2010.
SHIMBA, S.; ISHII, N.; OHTA, Y.; OHNO, T.; WATABE, Y.; HAYASHI, M.;
WADA, T.; AOYAGI, T.; TEZUKA, M. Brain and muscle Arnt-like protein-1
(BMAL1), a component of the molecular Clock, regulates adipogenesis. Proc.
Natl. Acad. Sci., v. 102, p. 12071–12076, 2005.
SHIMBA, S.; OGAWA, T.; HITOSUGI, S.; ICHIHASHI, Y.; NAKADAIRA, Y.;
KOBAYASHI, M.; TEZUKA, M.; KOSUGE, Y.; ISHIGE, K.; ITO, Y.; KOMIYAMA,
K.; OKAMATSU-OGURA, Y.; KIMURA, K.; SAITO, M. Deficient of a clock gene,
brain and muscle arnt-like protein-1 (bmal1), induces dyslipidemia and ectopic
fat formation. PLoS ONE, v. 6, p. e25231, 2011.
SIMONNEAUX, V.; POIREL, V. J.; GARIDOU, M. L.; NGUYEN, D.; DIAZRODRIGUEZ, E.; PÉVET, P. Daily rhythm and regulation of Clock gene
expression in the rat pineal gland. Molecular Brain Research, v. 120, p. 164172, 2004.
SINGH, M.; JADHAR, H. R. Melatonin: funtions and ligands. Drug Discov
Today. 2014. doi: 10.1016/j.drudis.2014.04.014.
SMIRNOV, A. N. Nuclear melatonin receptors. Biochemistry, v. 66, p. 19-26,
2001.
SOLT, L. A.; WANG, Y.; BANERJEE, S.; HUGHES, T.; KOJETIN, D. J.;
LUNDASEN, T.; SHIN, Y.; LIU, J.; CAMERONM, D.; NOEL, R.; HEEYOO, S.;
TAKAHASHI, J. S.; BUTLER, A. A.; KAMENECKA, T. M.; BURRIS, T. P.
Regulation of circadian behaviour and metabolism by synthetic REV-ERB
agonists. Nature, v. 485, p. 62-68, 2012.
SUZUKI, M.; SHIMOMURA, Y.; SATOH, Y. Diurnal changes in lipolytic activity
of isolated fat cells and their increased responsiveness to epinephrine and
theophylline with meal feeding in rats. J. Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokyo), v. 29,
p. 399-411, 1983.
TAKAHASHI, J. S.; HONG, H. K.; KO, C. H.; MCDEARMON, E. L. The genetics
of mammalian circadian order and disorder: implications for physiology and
disease. Nat. Rev. Genet., v. 9, p. 764-775, 2008.
TRAYHURN, P.; BEATTIE, J. H. Physiological role of adipose tissue: white
adipose tissue as an endocrine and secretory organ. Proc. Nutr. Soc., v. 60, p.
329-339, 2001.
16
TUREK, F. W.; JOSHU, C.; KOHSAKA, A.; LIN, E.; IVANOVA, G.;
McDEARMON, E.; LAPOSKY. A.; LOSEE-OLSON, S.; EASTON, A.; JENSEN,
D. R. Obesity and metabolic syndrome in circadian clock mutant mice. Science,
v. 308, p. 1043–1045, 2005.
UEDA, H. R.; CHEN, W.; ADACHI, A.; WAKAMATSU, H.; HAYASHI,
S.;TAKASUGI, T.; NAGANO, M.; NAKAHAMA, K.; SUZUKI, Y.; SUGANO, S.;
IINO, M.; SHIGEYOSHI, Y.; HASHIMOTO, S. A transcription factor response
element for gene expression during circadian night. Nature, v. 418, p. 534–539,
2002.
WAJCHENBERG, B. L. Subcutaneous and visceral adipose tissue: their relation
to the metabolic syndrome. Endocr. Rev., v. 21, p. 697-738, 2000.
WANG, J.; LAZAR, M. A. Bifunctional role of rev-ervalfa in adipocyte
differentiation. Mol. Cell. Biol., v. 28, p. 2213 -2220, 2008.
WANG, X. S.; ARMSTRONG, M. E. G.; CAIRNS, B. J.; KEY, T. J.; TRAVIS, R.
C. Shift work and chronic disease: the epidemiological evidence. Occupational
Medicine, v. 61, p. 78–89, 2011.
YANG, G.; JIA, Z.; AOYAGI, T.; MCCLAIN, D.; MORTENSEN, R. M.; YANG, T.
Systemic Pparγ Deletion Impairs Circadian Rhythms of Behavior and
Metabolism. PLos One, v. 7, p. e38117, 2012.
YILDIZ, B. O.; SUCHARD, M. A.; WONG, M. L; MCCANN, S. M.; LICINIO, J.
Alterations in the dynamics of circulating ghrelin, adiponectin, and leptin in
human obesity. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v. 101, p. 10434–10439, 2004.
ZANQUETTA, M. M.; CORREA-GIANNELLA, M. L.; MONTEIRO, M. B.
VILLARES, S. M. Body weight, metabolism and Clock genes. Diabetol. Metab.
Syndr., v. 16, p. 2-53, 2010.
ZARDOYA, R.; DIEZ, A.; SERRADILLA, M. C.; MADRID, J. A.; BAUTISTA, J.
M.; GARRIDO PERTIERRA, A. Lipogenic activities in rat liver are subjected to
circadian rhythms. Rev. Esp. Fisiol., v. 50, p. 239-244, 1994.
ZHANG, E. E.; LIU, Y.; DENTIN, R. Cryptochrome mediates circadian
regulation of cAMP signaling and hepatic gluconeogenesis. Nat. Med., v. 16, p.
1152–1156, 2010.
ZVONIC, S.; PTITSYN, A. A.; CONRAD, S. A. Characterization of peripheral
circadian Clocks in adipose tissues. Diabetes, v. 55, p. 962-970, 2006.