IMUNOENSAIOS
PARÂMETROS DOS
TESTES
SOROLÓGICOS
Validação de Testes Sorológicos

Validade intrínseca de um teste=
Desempenho do teste quando
comparado com teste de referência
(gold standard)

Uso de populações sabidamente positivas e
negativas para o parâmetro que está sendo
avaliado
PARÂMETROS
 SENSIBILIDADE
 ESPECIFICIDADE
 VALOR
PREDITIVO
 LIMIAR DE REATIVIDADE
 EXATIDÃO, PRECISÃO,
REPRODUTIBILIDADE
SENSIBILIDADE
É A PORCENTAGEM DE
RESULTADOS POSITIVOS NA
POPULAÇÃO DOENTE,
PROPORÇÃO DE RESULTADOS
VERDADEIROS POSITIVOS
Mesmo em baixas quantidades
SENSIBILIDADE
TESTE
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIRO
PRESENTE
AUSENTE
VP
FP
FN
VN
VP + FN
FP + VN
S= VP
VP + FN
SENSIBILIDADE DA TÉCNICA
MEDE O LIMIAR DE
DETECÇÃO DA REAÇÃO
NÃO
CONFUNDIR!!!
ESPECIFICIDADE
É A PORCENTAGEM DE
RESULTADOS NEGATIVOS NA
POPULAÇÃO NÃO DOENTE,
PROPORÇÃO DE RESULTADOS
VERDADEIROS NEGATIVOS

Dá idéia da possibilidade de reação cruzada
ESPECIFICIDADE
TESTE
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIRO
PRESENTE
AUSENTE
VP
FP
FN
VN
VP + FN
FP + VN
E= VN
VN + FP
Quando temos falsos positivos e
como eliminar o problema?





Poliinfecções
Mimetismo molecular entre agentes
Tipo de antígeno utilizado na técnica
Utilização de 2-ME
Peptídeos sintetizados
EFICIÊNCIA
RELAÇÃO ENTRE A SOMATÓRIA DOS
VERDADEIROS RESULTADOS
POSITIVOS E NEGATIVOS COM A
POPULAÇÃO ESTUDADA
QUANTO MAIS PRÓXIMO DE 1,
MELHOR O TESTE
EFICIÊNCIA
TESTE
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
DOENÇA - DIAGNÓSTICO VERDADEIRO
PRESENTE
AUSENTE
VP
FP
FN
VN
VP + FN
FP + VN
zero
Eficiência=
VP + VN
VP + VN + FP + FN
VALOR PREDITIVO

POSITIVO = PROBABILIDADE DE
DOENÇA QUANDO O TESTE FOR
POSITIVO

NEGATIVO = PROBABILIDADE DE
NÃO-DOENÇA QUANDO O TESTE
FOR NEGATIVO
PARA UMA DOENÇA QUE TEM
20% DE INCIDÊNCIA
TESTE
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
DOENTES SAUDÁVEIS
380
80
20
1520
400
1600
VPP = VP/VP+FP
= 380/460
= 0,82
TOTAL
460
1540
2000
VPN = VN/VN+FN
= 1520/1540
= 0,98
VALORES PREDITIVOS

Dependem de:
• Sensibilidade do teste (intrínseco)
• Especificidade (intrínseco)
• Prevalência da doença na população em
estudo (extrínseca)
PREVALÊNCIA


Prevalência = Porcentagem de indivíduos
doentes em uma população
Prevalência Sorológica = Porcentagem de
casos positivos pelo teste
EXERCÍCIO
TESTE
DOENTES
SAUDÁVEIS
TOTAL
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
Sensibilidade: 95%
Especificidade: 95%
Incidência: 20%
2000
CALCULAR
EXERCÍCIO
TESTE
DOENTES
SAUDÁVEIS
TOTAL
POSITIVO
NEGATIVO
TOTAL
Sensibilidade: 92%
Especificidade: 70%
Incidência: 70%
2000
CALCULAR
LIMIAR DE REATIVIDADE
ou cut off
É O VALOR DO TESTE:
 ACIMA DO QUAL OS RESULTADOS
SÃO CONSIDERADOS POSITIVOS E
INDICAM DOENTES
 ABAIXO DO QUAL OS RESULTADOS
SÃO DADOS COMO NEGATIVOS E
INDICAM OS NÃO DOENTES
Escolha do limiar de reatividade
MÉDIA DOS NÃO DOENTES + 2, 3 ....DP
Escolha do Cut-off em ensaio
TÍTULO DOENTES
NÃO
SENSIBILIDADE ESPECIFICIDADE
DOENTES
10
1
30
99
70
20
8
25
91
95
40
16
5
75
100
Qual Título deve ser usado de cut-off em
BANCO DE SANGUE?
EM LAB. DIAGNÓSTICO?
SORO LIMIAR DE REATIVIDADE

Def: soro de indivíduos reagentes dilído
em soro não reagente

Resultado: Índice de Reatividade para
• DO TESTE
• DO SLR
PRECISÃO

DETERMINA A CONCORDÂNCIA
DOS RESULTADOS OBTIDOS
QUANDO O TESTE É FEITO
VÁRIAS VEZES

MEDE ERRO EXPERIMENTAL
EXATIDÃO

DETERMINA A CAPACIDADE DO
TESTE EM FORNECER
RESULTADOS MUITO PRÓXIMOS
AO VERDADEIRO
REPRODUTIBILIDADE

REFERE-SE À OBTENÇÃO DE
RESULTADOS IGUAIS, EM TESTES
COM A MESMA AMOSTRA, FEITOS
POR PESSOAS DIFERENTES, EM
LOCAIS DIFERENTES

ASSOCIADA A ERROS ACIDENTAIS E
SISTEMÁTICOS
Critérios para a escolha dos
Testes Sorológicos

Testes de Alta Sensibilidade:

Testes de Alta Especificidade
• Testes de triagem
• Falso-negativo é mais grave
• Doenças graves sem tratamento eficaz
• Teste confirmatório
• Teste admissional
• Falso-positivo é mais grave
Critérios para a escolha dos
Testes Sorológicos


Testes de Alta Eficiência:
•
•
•
Diagnóstico em geral
Falso-positivo e falso-negativo são igualmente graves
Maternidades, Hospitais gerais, Bancos de Sangue
Testes de Alta Reprodutibilidade
•
•
•
Acompanhamento sorológico para diagnóstico
Controle terapêutico
Fases de LES, cura de doenças
Critérios para a escolha dos
Testes Sorológicos

Diagnóstico de Doença congênita
•
•
•
•
•

Detecção de IgM e IgA, que não atravessam a
placenta
Acompanhamento sorológico com testes anti-IgG
IgG de baixa avidez
IgM total
Práticos na execução ou automatizável
Triagem sorológica de doadores de sangue
•
•
•
Alta sensibilidade
Automatizável
Janela sorológica