Vetores de Expressão em
Escherichia coli
1-Estratégia de clonagem no vetor pGEM-T
2-Vetores de expressão em Escherichia coli
3-Vetor caça promotores
Edmar Vaz de Andrade
www.ufam.edu.br/~edandrade
1-Estratégia de clonagem no vetor pGEM-T
Mapa do vetor comercial pGEM-T ( Promega®)
2-Vetores de expressão em Escherichia coli
Principais componentes estruturais de um vetor de
expressão em E. coli
2-Vetores de expressão em Escherichia coli
Espaçadores
TTGACA
Região -35
N17
TATAAT
N6
Região a ser transcrita
Região -10 Sítio de início de
transcrição (+1)
Seqüências consenso de promotores de E. coli
2-Vetores de expressão em Escherichia coli
Seqüência sinal Shine-Dalgarno no
mRNA bacteriano - Sub-unidade 30S
3-Vetor de clonagem caça promotores
Mapa do vetor pKK232-8 (Amersham Bioscience®)
Possui gene que codifica para a enzima
cloranfenicol acetil transferase (cat) sem promotor