RESUMOS DO XXIV SEMINÁRIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA UFPA - 2013: ISSN 2176-1213. ASPECTOS MOLECULARES DA UTILIZAÇÃO DE COLESTEROL POR MYCOBACTERIUM. Pedro Henrique de AVIZ Silva (Bolsista PIBIC/UFPA-AF) [email protected] Curso de Biotecnologia, Instituto de Ciências Biológicas – ICB. Prof. Dr. Chubert Bernardo Castro de SENA (Orientador) - [email protected] Curso de Biotecnologia, Instituto de Ciências Biológicas – ICB. As Micobactérias são bacilos que podem infectar diversos animais, e em humanos é o agente causador de doenças com problemáticas de saúde pública alarmante, como a tuberculose e hanseníase. Para o bacilo ter sucesso na infecção, o Mycobacterium sp necessita modular a resposta imune da célula infectada (macrófago e/ou célula de Schwann), mediante componentes glicolipídicos como Lipoarabinomannan (LAM) e Lipomannan (LM), localizados na parede celular, e multiplicar-se em nichos particulares com excessivo acúmulo de lipídeos, em especial o colesterol, usado pelo bacilo como fonte alternativa de carbono e energia. No presente trabalho, buscamos estudar a influencia da captação e consumo de colesterol na biossíntese de LM/LAM, que tem demonstrado ser espécie-específica, cuja biossíntese é sujeita a modulações pela atividade de transferases. Inicialmente propomos superexpressar o transportador de colesterol (mce4) em cepa saprofítica de Mycobacterium smegmatis, considerada ineficaz para capturar e catabolizar completamente o colesterol. Porém, para a nossa surpresa, o cultivo in vitro de M. smegmatis (cepa selvagem) mostrou ser eficaz para captar colesterol em meio de cultura pobre de nutriente (Meio Mínimo, MM). A utilização do colesterol como fonte principal de energia e carbono proporcionou alterações significativas no padrão do crescimento bacteriano, tendo uma fase log mais longa e uma fase estacionária com numero reduzido de bacilos (50% do padrão de crescimento normal em meio de cultivo 7H9). Além disso, LAM apresentou um padrão de migração diferenciado em gel de SDS-PAGE, sugerindo que estes glicoconjugados tiveram sua biossíntese modificada pelo consumo preferencial de colesterol. Estes dados demonstram que cepas saprofíticas como M. smegmatis podem ser eficientes na captura e consumo de colesterol, modificando o padrão metabólico do bacilo, além da biossíntese de componentes importantes para a imunomodulação da célula hospedeira, adaptando-se às condições nutricionais alternativas como ocorre durante a infecção. Palavras-chave: Mycobacterium, Regulação gênica, Glicoconjugados. Titulo do projeto do orientador: POSSÍVEL MODULAÇÃO DA SÍNTESE DE LIPOARABINOMANNAN (LAM) APÓS CULTIVO DE MYCOBACTERIUM EM MEIO CONTENDO COLESTEROL COMO FONTE PRINCIPAL DE ENERGIA E CARBONO. Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento no CNPq Grande-área: Ciências Biológicas Área: Bioquímica Sub-área: Bioquímica dos Microorganismos