UPCII - Microbiologia Aula Laboratorial 8 2012/2013 MJC 19-11-2012 Sumário P8: Leitura dos resultados da aula anterior: 19/11/2012 Leitura dos testes miniaturizados Strep 9R e STAF18R. Determinação da sensibilidade do microrganismo isolado a vários antibióticos Microbiologia 2012/2013 Caracterização Fisiológica e Bioquímica de Microrganismos o o o A leitura do teste incubado na semana anterior deve ser feita de acordo com o protocolo. Nalguns casos basta identificar a cor da solução no poço. Noutros casos é preciso adicionar reagentes para a revelação do teste. o O teste terá de ser lido primeiro identificando as reacções positivas e negativas. o Posteriormente é atribuído um valor às reacções positivas. 19/11/2012 Microbiologia 2012/2013 2010/2011 Para o STREP9R No poço 1-PYR adicionar 2 gotas de reagente PYR No poço 3-IPP adicionar 2 gotas de reagente Ninydrin 7% A atribuição de valores corresponde a um código que deve ser lido nas tabela fornecidas. marcando 1 para o 1º teste positivo de cada grupo (PYR, ONPG e RAF). Marcando 2 para o 2º teste positivo de cada grupo (ESC, ARA e BAC). Marcando 4 para o 3º teste positivo de cada grupo (IPP, MAN e OPT) Adicionar o total de cada grupo (obtendo um nº de 3 dígitos) e consultar a tabela. 19/11/2012 Microbiologia 2012/2013 Tabela de interpretação dos códigos Strep 9R 7/11/2011 Microbiologia 2010/2011 Para o STAF18R Adicionar 2 gotas de reagente alfa-naftol e 1 gota de NaOH no poço 3-VP aguardar 1520minutos e verificar se aparece uma cor rosa avermelhada. Adicionar 2 gotas de ácido sulfanílico e 2 gotas de alfa-naftilamina no poço 4-NIT. Aguardar alguns segundos por uma cor vermelha alaranjada. Observar os resultados de acordo com a tabela seguinte. 19/11/2012 Microbiologia 2012/2013 Leitura dos testes STAF18R 19/11/2012 Poço Positivo Negativo 1-ADC Violeta Amarelo 2-UR Fuschia Amarelo 3-vp Vermelho/rosa Amarelo 4-NIT Vermelho Laranja Amarelo 5-ONPG Amarelo Sem cor 6-NOV Amarelo-Laranja Vermelho 7-MAL Amarelo-Laranja Vermelho 8-TRE Amarelo-Laranja Vermelho 9-MAN Amarelo-Laranja Vermelho 10-XYL Amarelo-Laranja Vermelho 11-XYT Amarelo-Laranja Vermelho 12-CEL Amarelo-Laranja Vermelho 13-SAC Amarelo-Laranja Vermelho 14-MNN Amarelo-Laranja Vermelho 15 RIB Amarelo-Laranja Vermelho 16-RAF Amarelo-Laranja Vermelho 17-LAC Amarelo-Laranja Vermelho Amarelo-Laranja Vermelho 18-FRU Microbiologia 2012/2013 Para o STAF18R Depois de marcados os testes positivos e negativos: Atribuir os valores corresponde a um código: marcando 1 para o 1º teste positivo de cada grupo (ADC, NIT, MAL, XYL, SAC e RAF). Marcando 2 para o 2º teste positivo de cada grupo (UR, ONPG, TRE, XYT, MNN e LAC). Marcando 4 para o 3º teste positivo de cada grupo (VP, NOV, MAN, CEL, RIB E FRU) Adicionar o total de cada grupo (obtendo um nº de 6 dígitos) e consultar a tabela das espécies. 19/11/2012 Microbiologia 2012/2013 Leitura do antibiograma o Para ler o antibiograma será necessário usar uma régua graduada para medir as zonas de inibição. o Essas zonas de inibição são depois lidas em tabelas como a em anexo e determinada a susceptibilidade do microrganismo ao agente farmacológico. 19/11/2012 Microbiologia 2012/2013 2010/2011