"MTA ASSOCIADO À CLOREXIDINA GEL 2%: AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE EM
FIBROBLASTOS GENGIVAIS HUMANOS"
Aluno: Mariana Perdomo
Colaboradores: Mariana Mayer Rosado, Emmanuel João Nogueira Leal da Silva, Helena Habang
Orientador: Thais Accorsi-Mendonça
Curso / Instituição de Ensino Superior: Odontologia / Unigranrio
Introdução / Objetivos / Material e Métodos / Conclusões / Resultados / Referências Bibliográficas
Introdução: O Agregado Trióxido Mineral (MTA) é um biomaterial que apresenta excelentes propriedades biológicas e
de selamento, indicado em diversas situações clínicas. A clorexidina tem sido amplamente utilizada em Endodontia
devido à sua ação antimicrobiana de amplo espectro e à sua substantividade. Quando o MTA é associado à clorexidina,
sua atividade antimicrobiana é ampliada, porém a citotoxicidade dessa associação tem sido discutida. Objetivos: O
objetivo deste estudo foi comparar in vitro a citotoxicidade do MTA com a da associação MTA e clorexidina gel 2% em
cultura primária de fibroblastos gengivais humanos. Material e Métodos: As células foram cultivadas em meio DMEM,
suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina e estreptomicina. Na 23ª passagem foram plaqueadas
em placas de 96 poços, em duplicata, com densidade de 5 x 104 células por poço e incubadas por 24 h em estufa a 37°C
e 5% de CO2. Moldes de polipropileno, com 3 mm de diâmetro interno e 2 mm de altura foram utilizados para amostras
que foram divididas em três grupos (n=5): GI- MTA com água destilada; GII- MTA com clorexidina gel 2% e GIIIcontrole negativo. Nos GI e GII, os materiais testados foram manipulados e imediatamente acondicionados nos moldes,
no GIII os moldes permaneceram vazios. As amostras foram inseridas em placas de 6 poços, mantidas em luz UV por 1
h, 3 mL de meio de cultura foram inseridos em cada um dos 15 poços utilizados e as placas foram então incubadas por
24 h em estufa a 37°C e 5% de CO2 para a obtenção dos extratos. Após esse período, o meio de cultura das células na
placa de 96 poços foi substituído por 200 µL dos extratos, em concentrações de 100%, 50% e 25%. Após 24 h de
incubação em estufa a 37°C e 5% de CO2, o meio de cultura foi removido, as células foram lavadas por PBS, foram
acrescentados 50 µL da solução de MTT, em uma concentração de 1 mg/mL, em todos os poços e as células foram
incubadas durante 2 h. O MTT foi removido e foram inseridos 100 µL de DMSO em cada poço. O conteúdo dos poços
foi então agitado por 5 min e a densidade ótica foi observada em espectofotômetro com 570 nm, com referência a 650
nm. Os dados foram compilados e o teste ANOVA utilizado. Resultados: Não houve diferença estatisticamente
significante entre os grupos testados (p<0,05) e entre estes e o grupo controle (p<0,05). Conclusão: Conclui-se que a
substituição da água destilada por CLX gel 2% no preparo do MTA branco não alterou a citotoxicidade do material em
fibroblastos gengivais humanos.
Referências Bibliográficas: 1. Gomes BP, Vianna ME, Zaia AA, Almeida JF, Souza-Filho FJ, Ferraz CC. Chlorhexidine
in endodontics. Braz Dent J. 2013Fev; 24(2):89-102. 2. Bidar M, Naderinasab M, Talati A, Ghazvini K, Asgari S,
Hadizadeh B, et al. The effects of different concentrations of chlorhexidine gluconate on the antimicrobial properties of
mineral trioxide aggregate and calcium enrich mixture. Dent Res J. 2012Jul; 9(4):466-71. 3. 4. Li YC, Kuan YH, Lee
SS, Huang FM, Chang YC. Cytotoxicity and genotoxicity of chlorhexidine on macrophages in vitro. Environ Toxicol.
2014Apr; 29(4):452-8. 4. Silva EJ, Accorsi-Mendonça T, Almeida JF, Ferraz CC, Gomes BP, Zaia AA. Evaluation of
cytotoxicity and up-regulation of gelatinases in human fibroblast cells by four root canal sealers. Int Endod J. 2012
Jan;45(1):49-56 5. Bernardi A, Teixeira, CS. The properties of chlorhexidine and undesired effects of its use in
endodontics.Quintessence Int. 2015 Jul-Aug;46(7):575-82.
Bolsa de Iniciação Científica (IC):
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PROPEP 2014
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