Cinética enzimática
E+
S
K1
ES
E+P
K2
K -1
K -2
V0 – Velocidade Inicial
Estado estacionário – [ES] constante
Então Formação de [ES] = Degradação de [ES]
Vo = K2 [ES]
[Et]=[E] + [ES]
V de Formação de ES = K1 [E] [S]
V de degradação de ES = K –1[ES] + K2 [ES]
Já que Formação de [ES] = Degradação de [ES]
K1 ([Et]-[ES]) [S] = K –1[ES] + K2 [ES]
K1[S][Et] - K1[S][ES] = (K –1+ K2) [ES]
[ES] =
[Et] [S]
[S] + (K –1+ K2) / k1)
Km
[ES] = [Et] [S]
Km
Se, V0 = k2 [Es]
+ [S]
Então: V0 = k2 [Et] [S]
Km +[S]
Em V máxima
[Et] = [ES]
Então V max = k2 [Et]
Sendo assim
Vo = Vmax [S]
Km +[S]
Reações enzimáticas com mais de um substrato
Ex:
ATP + Glicose
hexocinase
ADP + Glicose 6- P
Reações em que há 2 substratos envolvem a transferência de átomos ou grupos
funcionais de um substrato para o outro:
Sequencial (formação do complexo ternário)
Pingue-pongue ou duplo deslocamento
Su bst r at o (m M )
0.2
0.4
0.8
1.0
2.0
4.0
6.0
V0 (sem in ibid or )
m m ol .L -1 .m i n -1
5
7.5
1 0.0
1 0.7
1 2.5
1 3.6
1 3.5
V0 (com in ibid or )
m m ol .L -1 .m i n -1
3
5
7.5
8.3
1 0.7
1 2.5
1 3.5
-1
V0 (mol.L .min )
15
Sem inibidor
10
-1
Com inibidor
5
0
0
1
2
3
4
Substrato (mM)
5
6
7
Inibidores
Importância:
• Agentes farmacêuticos
• Ferramentas no estudo de mecanismo de funcionamento
das enzimas
• Ferramenta nos estudos das vias metabólicas
Irreversíveis
Inibidores
Inib. Competitiva
Reversíveis
Inib. Acompetitiva
Inib. Mista
Inibidores Irreversíveis
Inibição Reversível
Analgésicos... inibidores de Prostaglandinas
Ligação covalente
Inibidor irreversível
(suicída) - Aspirina
Interações sem ligação covalente
Inibidor competitivo e reversível –
Ponstan
Enzimas alostéricas... O que é isso?
Enzimas alostéricas... O que é isso?
Ex: Aspartato Transcarbamilase (AtCase) -síntese de piridinas

AtCase
Aspartato + carbamil-fosfato
N-carbamil aspartato
Citidina
trifosfato
Michaellis-Menten
Enzimas Alostéricas
Enzima Homotrópica
Efeito moduladores
Efeito moduladores
Exemplos de enzimas regulatórias
Fosfofrutokinase –1 (PFK-1):
ALOSTERIA
Glicogênio Fosforilase
ALOSTERIA
MODIFICAÇÃO COVALENTE
Modificação covalente reversível
Ativação Proteolítica