Diferenciação Celular • Processo iniciado na fertilização; • Entrada do núcleo masculino gera inúmeras mudanças no ovócito; Onda de Ca2+ inicia desenvolvimento embrionário e causa mudanças na superfície do óvulo Eliminação do segundo corpúsculo polar • Início divisão – clivagem sem crescimento celular; – Mórula (64 células) – Blástula – bombeamento de água para o interior do embrião e genoma não funcional até metade desta fase; – Determinantes citoplasmáticos: substâncias interiorizadas as quais irão mediarão a diferenciação morfológica e ativação gênica; • Processo dependente da quantidade de determinantes presentes • Concentrações distintas levam a ativação de genes distintos Primeiros experimentos permitiram verificação de que núcleo e citoplasma possuem uma ligação importante na diferenciação celular • Corte do ápice de A. crenulata e substituição por caule de A. mediterranea; • Crescimento inicial da espécie enxertada e posterior volta do ápice da espécie original; • Núcleo direciona a formação de estruturas; • Porém nesse caso RNAm de longa duração induziram a formação do ápice da espécie enxertada; • Primórdios da clonagem: • Retirada e um núcleo somático e inserção em ovócito não fertilizado anucleado; • Citoplasma reprograma o núcleo; • Conclusão: inativações do genoma são processos reversíveis; • Dolly • Primeiro experimento de clonagem em mamíferos com sucesso; • Processo confirmou a hipótese de que o genoma é mantido em todas as células do indivíduo; • Determinantes citoplasmáticos produzidos na célula materna; • Pólo vegetativo – local de formação de gônadas – Irradiação por UV leva a esterilidade; – Destruição dos determinantes citoplasmáticos; • Determinação – célula morfologicamente idêntica as outras; • Diferenciação – célula morfologicamente diferenciada; • Drosophila – Divisão dos núcleos porém não ocorrência da citocinese; – Migração para a periferia seguida da realização da citosinese, formação da pupa e por fim a mosca; – Proteína bicóide migra pelo corpo do indivíduo determinando o eixo antero-posterior; – O gradiente está relacionado a ativação de genes específicos que darão origem a diferentes partes do corpo do animal; Genes Homeobox - genes associados ao desenvolvimento do embrião que foram conservados ao longo da evolução Determinantes citoplasmáticos estão associados a ativação de genes homeobox