unesp
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA
“JÚLIO DE MESQUITA FILHO”
Instituto de Biociências – Campus de Rio Claro
Departamento de Biologia
ESTUDO COMPARATIVO DE PROTOCOLOS DE EXTRAÇÃO E AMPLIFICAÇÃO DE
DNA EM DIFERENTES TECIDOS DE UMA PALMEIRA DA MATA ATLÂNTICA
LUCAS, M. S. ; CARVALHO, C. S.; HYPOLITO, G. B.; CÔRTES, M. C.
Unesp Rio Claro, Departamento de Ecologia
O DNA corresponde à matéria prima para os estudos em genética molecular, este pode ser extraído
de diferentes tipos de tecido. No entanto, utilizando plantas como sistema de estudo, esses variam a
qualidade e otimizações são necessárias nos protocolos de extração e amplificação de DNA para
garantir bons resultados. O objetivo desse trabalho foi otimizar a extração e a amplificação de DNA
de diferentes tecidos de planta. A espécie de estudo foi a palmeira Euterpe edulis. Nós utilizamos os
tecidos: caule, folha, raiz, endocarpo e embrião. As extrações foram feitas utilizando o protocolo
CTAB para isolamento de DNA de plantas adaptado de BG Milligan. Para PCRs foram utilizados
até 9 marcadores moleculares de microssatélites já desenvolvidos para a espécie, e após a
genotipagem os fragmentos foram analisados no programa GeneMapper. Os 5 tecidos utilizados são
possíveis e fácies de extrair e produzem uma boa quantidade de DNA, média: folha 140 µl, caule 94
µl, endocarpo 108 µl, embrião 100 µl e raiz 6 µl. Embrião e folha são os tecidos com melhor
qualidade e resultados para PCR e genotipagem (sucesso de amplificação de 100% e 98,4%,
respectivamente), seguidos do endocarpo, caule e raiz (sucesso de amplificação de 93,2%, 92% e
77,1%, respectivamente). Esses tecidos serão utilizados para diferentes estudos. A folha, caule e o
embrião serão utilizados para estudos de genética populacional, já o embrião estudos de polinização
e o endocarpo de dispersão de sementes da espécie.
Palavras-chave: Otimização; PCR; Planta; E. edulis
Financiamento: CNPq
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