"Há dois tipos de pessoas: As que fazem as coisas, e
as que dizem que fizeram as coisas. Tente ficar no
primeiro tipo. Há menos competição."
Indira Ghandi
DUPLICAÇÃO DO DNA
POSSÍVEIS
MECANISMOS
(HIPÓTESES)
CONSERVATIVA
SEMICONSERVATIVA
DISPERSIVA
MESELSON E STAHL (1958)
 TÉCNICA: ULTRACENTRIFUGAÇÃO EM GRADIENTE DE CLORETO DE CÉSIO (CSCL)
1. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS
CULTIVADAS EM MC COM N14
3. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS
CULTIVADAS POR 1 GERAÇÃO EM MC
COM N14, APÓS 14 GERAÇÕES EM MC
COM N15
2. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS
CULTIVADAS EM MC COM N15
4. DNA EXTRAÍDO DE BACTÉRIAS
CULTIVADAS POR 2 GERAÇÕES EM
MC COM N14, APÓS 14 GERAÇÕES EM
MC COM N15
KORNBERG (1956): DNA
ATUA COMO MOLDE PARA SÍNTESE DAS CADEIAS
COMPLEMENTARES

DESCOBRIRAM ENZ.
DNA IN VITRO:
DNA
POLIMERASE (DE
E.
COLI) QUE DIRIGE A SÍNTESE DE
POLI I
DESOXIRRIBONUCLEOTÍDEOS TRIFOSFATADOS
+ DNASEMENTE
(MOLDE)
DNASEMENTE
+
DNA SINTETIZADO IN VITRO
+
PIROFOSFATO

ESTUDOS POSTERIORES: ALÉM DA POLI
POLI II E POLI III.
I,
HÁ
+2
POLIMERASES EM BACTÉRIAS:
 DNA DE BACTÉRIAS: CIRCULAR
PARA SE DUPLICAR  DESENROLAMENTO DA DUPLA HÉLICE (EXPOR AS CADEIAS MOLDE)
PROTEÍNAS DNAa: SEPARAM AS CADEIAS DE DNA NOS PONTOS DE ORIGEM DA DUPLICAÇÃO.
 PROTEÍNAS DE DESEMPARELHAMENTO (= HELICASES): SEPARAM AS CADEIAS AO LONGO DA MOLÉCULA DE
DNA, FORMANDO A BOLHA DE REPLICAÇÃO.
PROTEÍNAS SSP: MANTÉM CADEIAS DE DNA
SEPARADAS
 PROTEÍNAS DE RELAXAMENTO (TOPOISOMERASES): QUEBRA UMA DAS CADEIAS, PERMITINDO QUE ELA
REALIZE UMA SÉRIE DE GIROS SOBRE A OUTRA CADEIA.
 A DUPLICAÇÃO PROGRIDE EM AMBOS OS SENTIDOS ATÉ OS CHAMADOS PONTOS DE TÉRMINO.
 EM E. COLI:
EM
- 1 PONTO DE ORIGEM
- 1 PONTO DE TÉRMINO
E. COLI: DNA COMPORTA-SE COMO UMA UNIDADE DE DUPLICAÇÃO (REPLICON).
MOLÉCULAS ENVOLVIDAS NA DUPLICAÇÃO DO DNA
DUPLICAÇÃO:
•SEMICONSERVATIVA
•BIDIRECIONAL
•SEMI-DESCONTÍNUA
•ASSINCRÔNICA: REGIÕES DE DUPLICAÇÃO TARDIA E DE DUPLICAÇÃO PRECOCE – FAMÍLIA DE RÉPLICONS (REPLICON
CLUSTERS)
DECIFRAÇÃO DO CÓDIGO GENÉTICO
 QUAL A RELAÇÃO ENTRE SEQÜÊNCIAS ESPECÍFICAS DE NUCLEOTÍDEOS E SEQUÊNCIAS
DE A.A.?
4 NUCLEOTÍDEOS  20 AA
GEORGE GAMOW (FÍSICO - 1954): HIPÓTESE: CADA A.A. SERIA CODIFICADO POR UM
CONJUNTO DE 3 NUCLEOTÍDEOS (= TRINCA = CODON)
4 BASES  20 A.A. (X)
16 COMBINAÇÕES DE DUPLAS DE BASES  20 A.A. (X)
64 COMBINAÇÕES DE TRINCAS DE BASES  20 A.A.
CRICK E COL. (1961) CONFIRMARAM A HIPÓTESE USANDO FAGO T4:

A LEITURA DA MENSAGEM INICIA-SE NUM EXTREMO E DESLOCA-SE EM BLOCOS
CONSECUTIVOS DE 3 BASES, SEM PONTUAÇÃO.
TABELA DO CÓDIGO GENÉTICO
1ª posição
extremidade 5’
U
C
A
G
2ª posição
U
UUU-Phe
UUC-Phe
UUA-Leu
UUG-Leu
C
UCU-Ser
UCC-Ser
UCA-Ser
UCG-Ser
A
UAU-Tyr
UAC-Tyr
UAA- *
UAG- *
G
UGU-Cys
UGC-Cys
UGA- *
UGG-Trp
3ª posição
extremidade 3’
U
C
A
G
CUU-Leu
CUC-Leu
CUA-Leu
CUG-Leu
CCU-Pro
CCC-Pro
CCA-Pro
CCG-Pro
CAU-His
CAC-His
CAA-Gln
CAG-Gln
CGU-Arg
CGC-Arg
CGA-Arg
CGG-Arg
U
C
A
G
AUU-Ile
AUC-Ile
AUA-Ile
AUG-Met**
ACU-Trh
ACC-Trh
ACA-Trh
ACG-Trh
AAU-Asn
AAC-Asn
AAA-Lys
AAG-Lys
AGU-Ser
AGC-Ser
AGA-Arg
AGG-Arg
U
C
A
G
GUU-Val
GUC-Val
GUA-Val
GUG-Val
GCU-Ala
GCC-Ala
GCA-Ala
GCG-Ala
GAU-Asp
GAC-Asp
GAA-Glu
GAG-Glu
GGU-Gly
GGC-Gly
GGA-Gly
GGG-Gly
U
C
A
G
*: códons de terminação
**: códon de iniciação
CÓDIGO GENÉTICO
Códon Código universal
Código mitocondrial
Mamíferos Drosophila Leveduras Plantas
UGA
TERM
TRP
TRP
TRP
TERM
AUA
ILE
MET
MET
MET
ILE
CUA
LEU
LEU
LEU
THR
LEU
AGA
AGG
ARG
TERM
SER
ARG
ARG
SÍNTESE PROTÉICA
(PROCARIONTES)
 ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA
1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO
SÍNTESE PROTÉICA
(PROCARIONTES)
 ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA
1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO
2 - INICIAÇÃO
 FORMILAÇÃO DA METIONINA  A.A. QUE INICIA A SÍNTESE
 FORMAÇÃO DO COMPLEXO:
RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO
SÍNTESE PROTÉICA
(PROCARIONTES)
 ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA
1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO
2 - INICIAÇÃO
 FORMILAÇÃO DA METIONINA  A.A. QUE INICIA A SÍNTESE
 FORMAÇÃO DO COMPLEXO:
RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO
3 - ELONGAÇÃO
 CRESCIMENTO DO POLIPEPTÍDEO
SÍNTESE PROTÉICA
(PROCARIONTES)
 ENVOLVE OS 3 TIPOS DE RNA
1 - LIGAÇÃO DO A.A. AO SEU RNAT ESPECÍFICO
2 - INICIAÇÃO
 FORMILAÇÃO DA METIONINA  A.A. QUE INICIA A SÍNTESE
 FORMAÇÃO DO COMPLEXO:
RNATA.A + RNAM + RIBOSSOMO
3 - ELONGAÇÃO
 CRESCIMENTO DO POLIPEPTÍDEO
4 - TERMINALIZAÇÃO
CODON DE TERMINAÇÃO NO SÍTIO A
+
FATOR DE TERMINALIZAÇÃO (RF)
+
GTP
LIBERAÇÃO
- ÚLTIMO RNAT
- POLIPEPTÍDEO
- SUBUNIDADES DO
RIBOSSOMO
- RNAM