"MTA ASSOCIADO À CLOREXIDINA GEL 2%: AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE EM FIBROBLASTOS GENGIVAIS HUMANOS" Aluno: Mariana Perdomo Colaboradores: Mariana Mayer Rosado, Emmanuel João Nogueira Leal da Silva, Helena Habang Orientador: Thais Accorsi-Mendonça Curso / Instituição de Ensino Superior: Odontologia / Unigranrio Introdução / Objetivos / Material e Métodos / Conclusões / Resultados / Referências Bibliográficas Introdução: O Agregado Trióxido Mineral (MTA) é um biomaterial que apresenta excelentes propriedades biológicas e de selamento, indicado em diversas situações clínicas. A clorexidina tem sido amplamente utilizada em Endodontia devido à sua ação antimicrobiana de amplo espectro e à sua substantividade. Quando o MTA é associado à clorexidina, sua atividade antimicrobiana é ampliada, porém a citotoxicidade dessa associação tem sido discutida. Objetivos: O objetivo deste estudo foi comparar in vitro a citotoxicidade do MTA com a da associação MTA e clorexidina gel 2% em cultura primária de fibroblastos gengivais humanos. Material e Métodos: As células foram cultivadas em meio DMEM, suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina e estreptomicina. Na 23ª passagem foram plaqueadas em placas de 96 poços, em duplicata, com densidade de 5 x 104 células por poço e incubadas por 24 h em estufa a 37°C e 5% de CO2. Moldes de polipropileno, com 3 mm de diâmetro interno e 2 mm de altura foram utilizados para amostras que foram divididas em três grupos (n=5): GI- MTA com água destilada; GII- MTA com clorexidina gel 2% e GIIIcontrole negativo. Nos GI e GII, os materiais testados foram manipulados e imediatamente acondicionados nos moldes, no GIII os moldes permaneceram vazios. As amostras foram inseridas em placas de 6 poços, mantidas em luz UV por 1 h, 3 mL de meio de cultura foram inseridos em cada um dos 15 poços utilizados e as placas foram então incubadas por 24 h em estufa a 37°C e 5% de CO2 para a obtenção dos extratos. Após esse período, o meio de cultura das células na placa de 96 poços foi substituído por 200 µL dos extratos, em concentrações de 100%, 50% e 25%. Após 24 h de incubação em estufa a 37°C e 5% de CO2, o meio de cultura foi removido, as células foram lavadas por PBS, foram acrescentados 50 µL da solução de MTT, em uma concentração de 1 mg/mL, em todos os poços e as células foram incubadas durante 2 h. O MTT foi removido e foram inseridos 100 µL de DMSO em cada poço. O conteúdo dos poços foi então agitado por 5 min e a densidade ótica foi observada em espectofotômetro com 570 nm, com referência a 650 nm. Os dados foram compilados e o teste ANOVA utilizado. Resultados: Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos testados (p<0,05) e entre estes e o grupo controle (p<0,05). Conclusão: Conclui-se que a substituição da água destilada por CLX gel 2% no preparo do MTA branco não alterou a citotoxicidade do material em fibroblastos gengivais humanos. Referências Bibliográficas: 1. Gomes BP, Vianna ME, Zaia AA, Almeida JF, Souza-Filho FJ, Ferraz CC. Chlorhexidine in endodontics. Braz Dent J. 2013Fev; 24(2):89-102. 2. Bidar M, Naderinasab M, Talati A, Ghazvini K, Asgari S, Hadizadeh B, et al. The effects of different concentrations of chlorhexidine gluconate on the antimicrobial properties of mineral trioxide aggregate and calcium enrich mixture. Dent Res J. 2012Jul; 9(4):466-71. 3. 4. Li YC, Kuan YH, Lee SS, Huang FM, Chang YC. Cytotoxicity and genotoxicity of chlorhexidine on macrophages in vitro. Environ Toxicol. 2014Apr; 29(4):452-8. 4. Silva EJ, Accorsi-Mendonça T, Almeida JF, Ferraz CC, Gomes BP, Zaia AA. Evaluation of cytotoxicity and up-regulation of gelatinases in human fibroblast cells by four root canal sealers. Int Endod J. 2012 Jan;45(1):49-56 5. Bernardi A, Teixeira, CS. The properties of chlorhexidine and undesired effects of its use in endodontics.Quintessence Int. 2015 Jul-Aug;46(7):575-82. Bolsa de Iniciação Científica (IC): O resumo deverá conter obrigatoriamente apenas 1(uma) página. PROPEP 2014