Universidade Camilo Castelo Branco
Pós-Graduação em Produção Animal
MAURO JOSÉ VIANA FERREIRA
BEZERRAS DA RAÇA HOLANDESA SUPLEMENTADAS COM
COENZIMA Q10: DESEMPENHO E PERFIL METABÓLICO
Descalvado, SP
2010
Mauro José Viana Ferreira
BEZERRAS DA RAÇA HOLANDESA SUPLEMENTADAS COM
COENZIMA Q10: DESEMPENHO E PERFIL METABÓLICO
Orientador: Dr. Gabriel Maurício Peruca de Melo
Co-orientador: Dra. Liandra Maria Abaker Bertipaglia
Dissertação apresentada ao curso de
Mestrado
Profissional,
Programa
de
Produção Animal, Unicastelo, Campus de
Descalvado, como complementação de
créditos para obtenção do título de Mestre
em Produção Animal.
Descalvado, SP
2010
F442b
Ferreira, Mauro José Viana
Bezerras da raça Holandesa Suplementadas com Coenzima
Q10: Desempenho e Perfil Metabólico. Mauro José Viana Ferreira
Descalvado – SP : [sn.], 2010.
63 p.; 21cm
Dissertação de Mestrado apresentada à Universidade Camilo Castelo
Branco. Curso de Mestrado Profissionalizante em Produção Animal.
Orientador: Dr. Gabriel Maurício Peruca de Melo. Co-orientador: Dra
Liandra Maria Abaker Bertipaglia
1.Ganho de Peso. 2. Semiquinona. 3. Ubiquinona. I. Gabriel Maurício
Peruca de Melo. II. Dra. Liandra Maria Abaker Bertipaglia. Universidade
Camilo Castelo Branco. Curso de Mestrado Profissionalizante em
Produção Animal.
CDD 636.23
Autorizo exclusivamente para fins acadêmicos e científicos, a reprodução total ou
parcial desta dissertação, por processos xerográficos ou eletrônicos.
Descalvado, 05 de junho de 2010.
i
ii
Dedicatória
Dedico o presente trabalho a minha esposa e mãe
que sempre estão do meu lado me orientando e
ajudando.
i
Agradecimentos
Agradeço a vida por estar me ensinando muitas lições valiosas e a
minha família que sempre estará ao meu lado.
Aos meus professores do Mestrado,
Mestrado principalmente ao Prof. Gabriel
Maurício Peruca de Melo que acreditou em mim e me deu todo apoio e
a equipe do Laboratório de Biogeoquímica e Nutrição Animal da
UNICASTELO.
Ao Carlos Marcelo Benvenga, proprietário da Fazenda São Carlos,
pelo apoio que deu ao projeto.
ii
A melhor coisa da vida é vivê-la intensamente
cada minuto com as pessoas pelas quais você têm
grande carinho e admiração, pois quando
termina não têm mais volta então, aproveite da
melhor forma.
iii
SUMÁRIO
RESUMO .................................................................................................................................... 1
1.
INTRODUÇÃO..................................................................................................................... 2
2.
OBJETIVOS ........................................................................................................................ 4
3.
4.
2.1.
Objetivo geral ........................................................................................................... 4
2.2.
Objetivos específicos ................................................................................................ 4
REVISÃO DE LITERATURA ................................................................................................ 5
3.1.
Características da coenzima Q10 (COQ10) .............................................................. 5
3.2.
CoQ10 e produção de energia .................................................................................. 7
3.3.
CoQ10 e função antioxidante .................................................................................... 8
3.4.
Biossíntese ............................................................................................................... 8
3.5.
CoQ10 e outras funções ........................................................................................... 9
3.6.
Produção................................................................................................................. 10
3.7.
Fontes dietéticas e consumo de CoQ10 .................................................................. 12
3.8.
Níveis de segurança ............................................................................................... 13
MATERIAL E MÉTODOS .................................................................................................. 14
4.1.
Local do experimento ............................................................................................. 14
4.2.
Animais................................................................................................................... 14
4.3.
Manejo alimentar .................................................................................................... 14
4.4.
Delineamento experimental e tratamentos.............................................................. 15
4.5.
Pesagem dos animais ............................................................................................ 15
4.6.
Amostragem e avaliações nas amostras de sangue ............................................... 16
4.6.1. Teores de cálcio e fósforo no soro .......................................................................... 17
4.6.2. Teores de magnésio e cloreto no soro .................................................................... 17
4.6.3. Teor de glicose no plasma ...................................................................................... 18
4.6.4. Teores de colesterol total e colesterol HDL nas amostras de soro.......................... 18
4.6.5. Teores de triglicerídeos nas amostras de soro ....................................................... 18
4.6.6. Teores de lipídios totais nas amostras de soro ....................................................... 19
iv
4.6.7. Determinação de teores de enxofre na amostra de soro. ....................................... 19
4.6.8. Determinação da proteína total e da uréia nas amostras de soro ........................... 19
4.6.9. Determinação de creatinina em amostras de soro .................................................. 20
4.6.10. Determinação da atividade de fosfatase nas amostras de soro .............................. 20
4.6.11. Determinação da albumina nas amostras de soro .................................................. 20
4.6.12. Determinação transaminase glutâmico oxalacética (TGO) ..................................... 20
5.
RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................................................................................... 22
5.1. Desempenho ponderal ................................................................................................ 22
5.2. Perfil Metabólico ......................................................................................................... 23
5.2.1. Glicose plasmática.................................................................................................. 23
5.2.2. Cálcio sérico ........................................................................................................... 25
5.2.3. Fósforo ................................................................................................................... 26
5.2.4. Uréia sérica ............................................................................................................ 27
5.2.5 Albumina sérica ........................................................................................................ 29
5.2.6 Lipídeos totais séricos ............................................................................................... 31
5.2.7 Fosfatase alcalina sérica ........................................................................................... 32
5.2.8 Magnésio sérico ........................................................................................................ 33
5.2.9 Creatina sérica .......................................................................................................... 34
5.2.10. Proteínas séricas totais .......................................................................................... 36
5.2.11. Colesterol total e HDL séricos ................................................................................ 37
5.2.12 Triglicerídeos séricos .............................................................................................. 38
5.2.13 Enxofre sérico ......................................................................................................... 39
5.2.14 Aspartato aminotransferase (TGO) ......................................................................... 40
5.2.15. Cloreto ................................................................................................................... 41
6. CONCLUSÕES..................................................................................................................... 43
7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...................................................................................... 44
v
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
AST ..................... aspartato aminotransferase
ATP ...................... trifosfato de adenosina
CoQ10 ................. co-enzima Q10
CoQ .................... co-enzima Q10
Q10 ..................... co-enzima Q10
Q .......................... co-enzima Q10
Ca ........................ cálcio
CV ........................ coeficiente de variância
DMS ..................... diferença mínima significativa
HDL...................... lipoproteínas de alta densidade
K .......................... potássio
LDL ...................... lipoproteína de baixa densidade
MDH ..................... malato desidrogenase
Mg ........................ magnésio
Na ........................ sódio
NAD ........................ nicotinamida adenina dinucleotídeo, difosfopiridina nucleotídeo
NADH................... dinucleotídeo de adenina nicotinamida
NOEL ................... nível no qual não foram observados efeitos adversos
P .......................... fósforo
PTH ...................... paratormônio
S .......................... coordenada geográfica de latitude sul
TCA...................... ácido tricloroacético
TG ........................ triglicerídeos
TGO ..................... transaminase glutâmico oxalacética
VLDL.................... lipoproteína de muito baixa densidade
WGR .................... coordenada geográfica de longitude
vi
LISTA DE TABELAS
Páginas
Tabela 1. Teores de coenzima Q10 em alimentos. .............................................. 12
Tabela 2. Dados de ganho de peso médio, expressos em kg/animal/dia e, ganho de
peso total, expressos em kg.animal-1, em função da suplementação e da época de
amostragem.......................................................................................................... 22
Tabela 3. Valores de glicose plasmática, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época de amostragem. .................................... 23
Tabela 4. Dados de cálcio sérico, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época de amostragem. .................................... 25
Tabela 5. Dados de fósforo, expressos em mg/dL, em função da suplementação
com CoQ10 e da época da amostragem. ............................................................. 27
Tabela 6. Uréia sérica, expressa em mg/dL, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem. ..................................................................... 28
Tabela 7. Albumina sérica, expressa em g/L, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem. ..................................................................... 31
Tabela 8. Lipídeos séricos totais, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 32
Tabela 9. Atividade de fosfatase alcalina sérica, expressa em UI/L, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 32
Tabela 10. Magnésio sérico, expressos em mg/dL, em função da suplementação
com CoQ10 e da época da amostragem. ............................................................. 34
Tabela 11. Creatina sérico, expresso em mg/dL, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem. ..................................................................... 35
vii
Tabela 12. Dados de proteína total sérica, expressos em g/L em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 36
Tabela 13. Dados de colesterol total sérico, expressos em g/l em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 37
Tabela 14. Dados de colesterol HDL sérica, expressos em g/l, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 37
Tabela 15. Dados de triglicerídeos séricos, expressos em mg/dL em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 39
Tabela 16. Dados de enxofre sérico, expressos em mg/l em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem. .................................... 40
Tabela 17. Dados de aspartato aminotransferase sérico, expressos em U/L em
função da suplantação com CoQ10 e da época da amostragem. ........................ 41
Tabela 18. Dados de Cloreto sérico, expressos em U/L em função da suplantação
com CoQ10 e da época da amostragem. ............................................................. 42
viii
LISTA DE FIGURAS
Páginas
Figura 1. Processo de redução da CoQ10 (I) a semiquinona (II) e a ubiquinol (III),
segundo Cordeiro (2006). ....................................................................................... 5
Figura 2. Estruturas químicas da CoQ10 (OVERVAD, 1999). ............................... 6
Figura 3. CoQ10 funcionando como um transportador de electrons na cadeia
respiratória (CORDEIRO, 2006). ............................................................................ 7
Figura 4. Hemi-síntese da coenzima Q10.............................................................. 11
Figura 5. Animais utilizados no experimento. ........................................................ 14
Figura 6. Contenção de animal para aferição de seu peso. .................................. 15
Figura 7. Coleta de sangue.................................................................................... 16
Figura 8. Tubos destinado à análise bioquímica e elementar. ............................... 17
Figura 9. Teores de glicose plasmática em bezerras da raça Holandesa, submetidos
à suplementação com coenzima Q10 injetável. ..................................................... 24
ix
RESUMO
Objetivou-se avaliar os efeitos da suplementação de bezerras lactentes da raça
Holandesa, com coenzima Q10 (CoQ10), sobre o desempenho ponderal e o perfil
metabólico, uma vez que na literatura nacional e internacional consultada não foram
encontrados dados da utilização de tal técnica na produção animal, com exceção,
como substrato na produção in vitro de embriões bovinos. O experimento foi
conduzido na Fazenda São Carlos, localizado no município de Descalvado/SP (21º
57’ 05" S, 47º 37’ 26" WGR) e, instalado em delineamento inteiramente casualizado,
com 2 tratamentos (T1 – Testemunha, peso vivo médio de 40,3±3,1 kg; T2 suplementação parenteral de CoQ10, 20 mg/animal aplicados em intervalos de 28
dias, peso vivo médio de 39,4±4,1 kg) e 12 repetições. O experimento teve duração
de aproximadamente 56 dias, sendo que, no início e, posteriormente em intervalos
de 28 dias, foram realizadas pesagens e amostragem de sangue, em jejum prévio
de 12 horas. Os animais foram manejados em abrigos individuais, com alimentação
à vontade e aleitados pela manhã e pela tarde (2 litros de sucedâneo em cada
período). A suplementação com CoQ10 promoveu melhora no desempenho
ponderal de bezerras da raça Holandesa (38% superior), esta melhora pode ser
justificada
pelas
alterações
ocorridas
no
perfil
metabólico
dos
animais
suplementados. Entre os atributos relacionados com o metabolismo energético,
pode-se ressaltar que os níveis de glicose foram superiores entre os animais
suplementados e, entre os constituintes da fração lipídica somente o HDL
apresentou-se elevado entre os animais suplementados. Nenhuma alteração foi
constada no metabolismo protéico e, entre os constituintes da fração mineral,
alterações significativas foram observadas nas concentrações séricas de enxofre
(redução) e cloreto (aumento).
1
1. INTRODUÇÃO
Com a finalidade de buscar melhorias na taxa de crescimento animal, peso e
qualidade de carcaça houve a necessidade de se fazer uso de técnicas de
melhoramento genético, podendo-se citar a inclusão de novas raças, cruzamentos,
procedimentos de seleção da população e, que resultaram em aumento da
produtividade. Neste contexto os requerimentos nutricionais foram modificados e a
suplementação de nutrientes exigidos em pequenas quantidades ganhou um novo
cenário, visto que os principais alimentos utilizados na alimentação animal passaram
a não suprir as novas exigências.
A Ubiquinona (também chamada de Coenzima Q10, Coenzima Q e abreviada
como CoQ10, CoQ, Q10 ou Q) é uma benzoquinona presente em praticamente
todas as células do organismo que participa dos processos de produção de ATP. Por
ser essencial a esse processo, órgãos com maior demanda energética como o
coração, o cérebro, os rins e o fígado apresentam maiores concentrações de
CoQ10.
A sua obtenção pode ser por síntese endógena, ingestão de alimentos ou
através de suplementos orais (OVERVAD et al., 1999).
Parte da CoQ é sintetizada a partir da tirosina, enquanto outra parte, é
sintetizada a partir de Acetil-CoA pela via do mevalonato, mesma via utilizada nos
primeiros passos da biossíntese do colesterol. Por apresentar uma parte de sua
síntese em comum com essa molécula, alguns medicamentos para a diminuição da
pressão e dos níveis de colesterol sanguíneo são responsáveis pela inibição da
produção de CoQ10.
Por sua capacidade de transferir elétrons e, portanto, trabalhar como um
antioxidante, a Coenzima Q10 também é utilizada como suplemento nutricional em
humanos. A produção de CoQ diminui com a idade, o que aumenta a necessidade
de sua suplementação, já que a falta de CoQ10 pode causar danos no cérebro, em
outros órgãos e em mitocôndrias do corpo todo.
Baseado nas características químicas e biológicas da Coenzima Q10 e, além
das evidências consistentes sobre a sua função no metabolismo energético das
células, o presente trabalho tem por objetivo avaliar os efeitos da sua
2
suplementação parenteral, no desempenho ponderal e no perfil metabólico de
bezerras da raça Holandesa, na fase de aleitamento, visando a contribuir na
elucidação das respostas à suplementação desta categoria animal.
3
2. OBJETIVOS
2.1.
Objetivo geral
Os efeitos benéficos da Q10 em humanos têm sido amplamente publicados
nos últimos anos. Levando isso em consideração, o presente trabalho tem como
objetivo geral levantar informações básicas sobre os efeitos da suplementação desta
coenzima em bezerros lactentes da raça Holandesa.
2.2.
Objetivos específicos
De maneira específica, pretende-se:
I. Avaliar os efeitos da suplementação com CoQ10, sobre o perfil metabólico de
bezerras da raça Holandesa submetidos às condições de desmama, utilizando as
informações para justificar alterações no desempenho ponderal.
II. Avaliar os efeitos da suplementação com CoQ10, no desempenho ponderal de
bezerras lactantes.
III. Explorar os efeitos da suplementação com CoQ10, para esta categoria animal,
visto que nenhum trabalho com animais de produção foi encontrado na literatura.
4
3. REVISÃO DE LITERATURA
3.1.
Características da coenzima Q10 (COQ10)
Esta molécula foi primeiramente isolada das mitocôndrias existentes nas
células no coração de vacas, recebendo o nome de coenzima Q10. Nesse mesmo
ano, atribuiu-lhe o nome de Ubiquinona, uma vez que é uma quinona existente em
células de vários tecidos (CORDEIRO, 2006).
Sua estrutura química foi identificada em 1958. Em termos químicos a
ubiquinona é designada por 2,3-dimetoxi-5-metil-6-decaprenil-1,4-benzoquinona (I)
(Figura. 1).
Figura 1. Processo de redução da CoQ10 (I) a semiquinona (II) e a ubiquinol (III),
segundo Cordeiro (2006).
A quantidade de CoQ10 existente no plasma sanguíneo de humanos encontrase entre 0,75-1,00 µg/ml, estando 75% na forma reduzida, ubiquinol (III). O conteúdo
total no corpo, estima-se que seja 1,0-1,5g, encontrando-se a maior parte em células
musculares (OVERVAD, 1999).
A coenzima Q10, também conhecida como Ubidecarenona, é uma vitaminasímile lipossolúvel comumente conhecida como Ubiquinona, CoQ e vitamina Q10.
Essa substância está envolvida na transferência de elétrons na cadeia mitocondrial,
5
cuja principal função é a produção de ATP, sendo essencial em várias atividades
relacionadas ao metabolismo energético (OVERVAD, 1999).
Somente a partir de meados dos anos 80 que a comunidade científica veio
realmente compreender a multivariedade de funções que esta substância exerce no
corpo humano. As doses, dependendo da idade (ser humano) e das necessidades
individuais, podem variar de 50 a 200mg/dia, sendo que em animais de produção,
não foram encontrados valores de referência na literatura consultada.
A CoQ10 é um nutriente ou agente terapêutico quase perfeito, devido à sua
baixa toxicidade e porque a suplementação com CoQ10 não provoca perturbações
maiores no metabolismo da CoQ10 endógena. Por último, pode ter efeitos
extraordinários sobre o resultado do tratamento de uma série de graves condições
mórbidas.
Algumas das propriedades biológicas da CoQ10 podem explicar seu papel
biológico. É cofator essencial da produção celular de energia e componente
essencial da cadeia respiratória da mitocôndria, desempenhando um importante
papel na produção de ATP, principal fonte de energia celular.
Trata-se de uma substância lipossolúvel que apresenta 10 unidades de
isopreno. Nos indivíduos saudáveis é biossintetizada normalmente, apresentando-se
em duas formas: oxidada (ubiquinona) e reduzida (ubiquinol) (Figura 2).
Figura 2. Estruturas químicas da CoQ10 (OVERVAD, 1999).
6
3.2.
CoQ10 e produção de energia
A CoQ10 é um componente essencial do sistema de transporte de íon da
membrana plasmática (PMIT) da mitocôndria para a síntese de ATP. A principal
parte da produção de ATP ocorre no interior da membrana da mitocôndria, onde a
CoQ10 fica alocada. A CoQ10 dá suporte à síntese de ATP no interior da membrana
e estabiliza a membrana celular, preservando, deste modo, sua integridade e função
(DUTTON et al., 2000; CRANE, 2001).
A CoQ10 apresenta particular relevância em eucariontes, uma vez que é
essencial no processo de respiração celular, produção de ATP, que ocorre nas
mitocôndrias.(BERG et al., 2003 e NELSON & COX, 2004)
Nas mitocôndrias desempenha um papel crucial, funcionando como um
transportador de electrons na cadeia respiratória, tal como é observável na Figura 3.
Assim, esta molécula existe em maior quantidade em órgãos com maior
necessidade energética, como o coração, o cérebro, o fígado e os rins (CORDEIRO,
2006).
Figura 3. CoQ10 funcionando como um transportador de electrons na cadeia
respiratória (CORDEIRO, 2006).
Devido à sua função intrínseca no crescimento celular, metabolismo de energia
(síntese de ATP) e efeito protetor contra o estresse oxidativo, a CoQ10 é um forte
substrato a ser usado no crescimento de células em cultivo. Todavia, devido à sua
estrutura química, é extremamente lipolítica e praticamente insolúvel em água.
7
3.3.
CoQ10 e função antioxidante
Na forma reduzida atua como importante antioxidante no corpo (CUPP &
TRACY, 2003; TURUNEN, 2004; DALLNER & STOCKER, 2005), sendo esta função
já convencionada. A forma reduzida ubiquinol representa 80% do total da CoQ10 no
plasma humano, sendo um importante antioxidante nas lipoproteínas do plasma. O
ubiquinol inibe a oxidação das proteínas e lipídios na membrana celular e, previne o
início da peroxidação lipídica, que é uma injúria oxidativa ao DNA e outras moléculas
(THOMAS & STOCKER, 2000).
A CoQ10 atua como um antioxidante através de vários mecanismos que são
essenciais e são classificados em dois mecanismos: 1) reação direta com os
radicais livres; 2) regeneração da forma ativa da vitamina E pela redução do radical
alfa-tocoferil (QUINN et al.1999; ARROYO et al.,2000).
Através destas funções, a suplementação de CoQ10 tem efeito benéfico na
manutenção da saúde (DALLNER & STOCKER, 2005).
3.4.
Biossíntese
Segundo Cordeiro (2006) o pirofosfato de isopentenilo é um importante
precursor na biossíntese da CoQ10, do colesterol, carotenóides e algumas
proteínas. Pode ser obtido mediante dois processos distintos: um é a via do
mevalonato,
usado
pelas
leveduras,
archaebactérias
e
animais,
enquanto
eubactérias, algas verdes e cloroplastos de plantas superiores o produzem por outra
via.
De acordo com artigos mais recentes, a biossíntese da CoQ10 começa no
retículo endoplasmático e é completada nas membranas do complexo de Golgi, a
partir das quais a quinona é transportada para diferentes sítios na célula. A
ubiquinona pode ser encontrada nas mitocôndrias, no complexo de Golgi, no retículo
endoplasmático, nos lisossomas, nos peroxissomas e na membrana plasmática
(CORDEIRO, 2006).
8
3.5.
CoQ10 e outras funções
Sabe-se que é biossintetizada nos tecidos vivos, mas a necessidade orgânica
desse cofator essencial também pode ser suprida por meios dietéticos (encontrada
na carne bovina, sardinha, espinafre e no amendoim).
Nos últimos 15 anos, vários trabalhos científicos, têm apontado e confirmado
inúmeras
e
importantíssimas
ações
de
CoQ10,
dentre
as
quais
(www.mapric.com.br):
●Aumento da capacidade imunológica.
●Redução do tempo de cicatrização.
●Melhora da resposta ao trauma cirúrgico.
●Diminuição da incidência de doenças neurodegenerativas.
●Melhora a função tireoidiana.
●Melhora a taxa fertilidade.
●Reduz a incidência da doença periodontal, que é uma das principais causas
de perda dentária.
●Ajuda nos controles do diabetes e aumenta a resposta ao esforço físico.
●É, entretanto, no coração, aonde os efeitos desta substância são mais
impressionantes. Inúmeros e recentes estudos científicos, realizados nos mais
importantes centros de pesquisa do mundo, são unânimes em apontar exuberantes
benefícios para o coração humano, quando suplementamos a CoQ10. O grupo de
condições cardíacas é bastante extenso e inclui: insuficiência cardíaca congestiva,
cardiomiopatia,
hipertensão,
angina,
prolapso
mitral,
arritmias
variadas,
aterosclerose, peroxidação lipídica, proteção do miocárdio durante cirurgias
cardíacas, dentre outras.
●Neutraliza os radicais livres. É parte importante do sistema de defesa
antioxidante da célula. A CoQ10, além de servir como cofator da produção de
energia, funciona como um antioxidante tão eficaz quanto a vitamina E no tecido
cardíaco, mas menos eficiente em tecido hepático. Este estudo sugere que a
suplementação de CoQ10 deve ser incluída em qualquer programa antioxidante
abrangente.
●Retarda o processo de envelhecimento. A propriedade anti-envelhecimento
pode ser devida à capacidade da CoQ10 de melhorar o estado de energia das
células e aumentar a eficiência da utilização do oxigênio. O conteúdo de CoQ10
9
diminui com o avançar da idade, especialmente nos tecidos cardíaco e hepático.
Protegendo as células contra a peroxidação, a CoQ10 aumenta a tolerância de
idosos e sedentários ao exercício físico e pode corrigir falhas do sistema
imunológico.
●O declínio dos níveis de CoQ10 pode ser uma possível explicação para uma
série de condições associadas ao envelhecimento, como uma maior vulnerabilidade
às infecções bacterianas e virais. Estudos efetuados em ratos com CoQ10
demonstraram parciais de declínios na função imunológica relacionados com a
idade.
●Pesquisas de longevidade em ratos demonstraram que a suplementação
semanal de CoQ10 (em forma de emulsão) aumentou significativamente a duração
da vida quando o tratamento foi iniciado no ponto médio da expectativa de vida. As
doses usadas nos ratos foram mais ou menos equivalentes a dose de 30 miligramas
por dia de CoQ10 utilizada em seres humanos. Na dose de 30 a 800 mg/dia não foi
constatada alteração clínica.
3.6.
Produção
A coenzima Q10 pode ser obtida por processos sintéticos, semi-sintéticos e
por fermentação, utilizando leveduras ou bactérias (CORDEIRO, 2006).
Uma das mais recentes sínteses químicas desenvolvidas é a de Negishi et al
2001. Neste processo sintético, a cadeia isoprenóide lateral é sintetizada com uma
grande estereoseletividade e com rendimentos elevados, só possível recorrendo a
acoplamentos sucessivos, catalizados por paládio, com sintões de (E)-isopreno,
neste caso com (E)-1,4-diiodo-2-metil-1-buteno.
As reações que utilizam paládio são muito importantes do ponto de vista da
síntese orgânica, uma vez que permitem obter produtos que de outra maneira são
difíceis de obter (TSUJI, 1996; CLAYDEN et al. 2001). Neste caso especifico, os
acoplamentos que ocorrem são reações de trasmetalação, um vez que, para além
do paládio, encontra-se presente outro metal, o zinco. O rendimento obtido para
síntese da CoQ10 recorrendo a este processo sintético é de 26% (CORDEIRO,
2006).
As hemi-sínteses químicas caracterizam-se por serem utilizados produtos
naturais como materiais de partida. No caso deste processo semi-sintético, utiliza-se
10
o solanesol, um composto encontrado na cinza do tabaco, como material de partida
para a síntese da cadeia isoprenóide lateral da CoQ10. A vantagem que este
processo apresenta, em relação ao método exclusivamente sintético, é que os
rendimentos obtidos por este processo são mais elevados, uma vez que esta síntese
envolve menos passos reacionais (CORDEIRO, 2006).
Figura 4. Hemi-síntese da coenzima Q10 realizada por Lipshutz et al., (2005).
No que diz respeito a processos fermentativos para a obtenção da CoQ10,
são conhecidos diversos microorganismos, bactérias e leveduras, que produzem
CoQ10, sendo por isso objeto de patente. Em 1998 foi publicado um trabalho em
que foram selecionadas três estirpes de bactérias como excelentes produtoras de
CoQ10: Agrobacterium tumefaciens KY-3085 (ATCC4452) Paracoccus denitrificans
KY-3940 (ATCC19367) e Rhodobacter sphaeroides KY-4113. Estas estirpes
exibiram um crescimento favorável, num meio contendo melaço de cana, licor de
milho e amônia (CORDEIRO, 2006)
11
A CoQ10 também pode ser produzida por E. coli recombinada, mas a
especificidade que se obtêm para a produção desta molécula é ainda baixa,
carecendo assim de melhoramentos (CORDEIRO, 2006).
3.7.
Fontes dietéticas e consumo de CoQ10
A CoQ10 está presente em uma variedade de alimentos (Tabela 1). O maior
nível de CoQ10 foi avaliado em carne vermelha e de peixe. Vegetais e produtos
lácteos contêm níveis relativamente baixos.
A média de consumo de CoQ10 em alimentos é estimada em próximo de 10
mg. Segundo Weber et al. (2001), a média de consumo de CoQ10 na população da
Dinamarca foi estimada em 3-5mg/dia em função do consumo de carne. Já Kamei et
al. (1986) observaram consumo médio entre 4 a 21 mg/dia e Hallström (1993)
estimou consume entre 2 mg/dia e 20 mg/dia .
De maneira geral, a CoQ10 no corpo humano tem origem em três fontes:
síntese endógena, ingestão de alimentos e suplementação da dieta.O nível médio
da concentração de CoQ10 do plasma humano é de 0,8µg/mL. A deficiência pode
resultar da diminuição da ingestão de alimentos, defeito na biossíntese de CoQ10,
aumento do uso de CoQ10 pelo corpo (estresse oxidativo), ou combinação destes
fatores (KALLEN et al., 1989).
Tabela 1. Teores de coenzima Q10 em alimentos, segundo alguns autores.
Alimentos
Carne bovina
Carne de aves
Peixes
Brócolis
Leite
Ovo
Teor de CoQ10 (µg/100 g de peso úmido)
Kamei (1986) Weber (1997) Mattila (2001) Kubo (2008)
3100
3100
3650
3030-4010
2100
1700
1400
1710-2500
550-6430
430-2700
850-1590
180-13000
860
660
701
40
10
31
370
150
120
73
De acordo com o Healthcare (2003), a suplementação de 100µg/dia de CoQ10
é necessária para tecidos deficientes, o que não pode ser encontrado em uma dieta
normal.
A Coenzima Q10 é absorvida no intestino delgado, sendo que a
biodisponibilidade é maior quando a fonte é a carne bovina.
12
A excreção é realizada basicamente pelas fezes, mas pode ocorrer via ducto
biliar. Cerca de 62,5% da dose administrada oralmente é recuperada nas fezes
durante uma dupla dosagem (2 dias com 333 mg/dia e 5 dias com 100 mg/dia)
(LUCKER et al., 1984).
3.8.
Níveis de segurança
De acordo com William et al. (1999), em estudos de toxicidade em ratos, foi
observada, na 52ª semana de suplementação, tolerância em fêmeas e NOAEL: dose
sem efeito observado (mg/kg de peso/dia) na concentração de 1.200 mg/kg/dia. Para
o homem é aceitável uma ingestão diária de 12 mg/kg/dia, calculada da NOAEL pela
aplicação do fator de segurança de 100, por exemplo, 720mg/60kg/dia. Outros níveis
foram relatados por diferentes pesquisadores, como 900 mg/kg/dia (IKEMATSU et al.,
2006) e 1.200 mg/kg/dia (HATHCOCK et al., 2006)
Pesquisadores australianos notificaram que a ingestão máxima deve ser 150
mg/kg/dia (www.tga.gov.au). O “The Japan Health Food & Nutrition Food Association”
publicou que a ingestão máxima deve ser 300 mg/kg/dia (www.jhnfa.org). Já na
Bélgica, foi proposto ingestão máxima de 200 mg/kg/dia.
13
4. MATERIAL E MÉTODOS
4.1.
Local do experimento
O experimento foi instalado e conduzido na Fazenda São Carlos, no município
de Descalvado, SP, coordenadas geográficas 21º51’41,7”S e 47º39’31,5”WGr. As
análises laboratoriais foram realizadas no Laboratório de Biogeoquímica e Nutrição
Animal da Universidade Camilo Castelo Branco, UNICASTELO, Descalvado, SP.
4.2.
Animais
Foram utilizadas 24 fêmeas lactentes da raça Holandesa, PO, malhada de
preto, peso vivo médio de 40 kg no início do experimento.
Figura 5. Animais utilizados no experimento.
4.3.
Manejo alimentar
Diariamente, foram fornecidos 2 L de sucedâneo no período da manhã e da
tarde, ração peletizada e volumoso composto da mistura de feno de Tiffton
(Cynodon dactilon) e silagem de milho, ad libtum.
14
4.4.
Delineamento experimental e tratamentos
O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado, com
dois tratamentos e 12 repetições. Os tratamentos avaliados foram: T1. Testemunhasem suplementação parenteral de CoQ10; T2. Suplementação parenteral de CoQ10
– 20 mg/animal a cada 28 dias.
O tratamento T2 com a suplementação de CoQ10 foi caracterizado pela
aplicação de injetável de 2mL/animal, , via sub-cutânea, de solução contendo 1% de
CoQ10.
Os dados foram analisados como medidas repetidas no tempo.
4.5.
Pesagem dos animais
A pesagem dos animais foi realizada sempre, após a amostragem de sangue,
evitando-se que este estresse adicional interferisse nas características bioquímicas
do sangue. Para tal, os animais foram submetidos ao jejum total por 12 horas. As
pesagens foram realizadas no tempo zero (início do experimento) e, posteriormente,
a cada período de 28 dias.
Figura 6. Contenção de animal para aferição de seu peso.
15
4.6.
Amostragem e avaliações nas amostras de sangue
Amostras de sangue foram obtidas no tempo zero (início do experimento) e,
posteriormente, em intervalos de 28 dias (duas amostragens, totalizando 56 dias de
experimento), através de punção da jugular, utilizando-se agulhas descartáveis
(40x12) e, tomando-se o cuidado de deixar o sangue fluir pela parede do tubo sem
turbilhonamento, evitando a hemólise (DIRKSEN et al, 1993).
Foram utilizados dois tubos, dos quais um não apresentava anticoagulante,
destinado à análise bioquímica e elementar, e, o outro tubo contendo fluoreto de
potássio, o qual foi destinado à dosagem de glicose.
Figura 7. Coleta de sangue.
Após a colheita de sangue, os tubos destinados à análise dos parâmetros
bioquímicos do sangue foram encaminhados ao Laboratório para serem efetuadas
as análises.
Foram realizadas as seguintes determinações bioquímicas no sangue: glicose,
uréia, proteína total, albumina, minerais (cálcio, fósforo, magnésio, cloreto, enxofre),
creatinina, fosfatase alcalina, teor de lipídios totais, triglicérides, colesterol total,
TGO, HDL.
A lavagem dos utensílios para colheita das amostras de sangue, além dos
utilizados para procedimentos de análise laboratorial, seguiram procedimentos de
16
rotina no laboratório de Nutrição Animal e Biogeoquímica, UNICASTELO,
Descalvado, SP.
Figura 8. Tubos destinado à análise bioquímica, elementar e dosagem de glicose.
4.6.1. Teores de cálcio e fósforo no soro
O cálcio foi determinado através de kit, sendo o método baseado na
determinação colorimétrica em comprimento de onda de 570 nm ou filtro laranja do
complexo formado entre o cálcio e a cresolftaleína em meio alcalino (DOLES, 2000).
O fósforo inorgânico foi determinado por kit, sendo o princípio do método
baseado na reação do fosfato com o molibdato em meio ácido, formando o
complexo fosfomolibdato, sendo este reduzido pela presença de ácido ascórbico,
resultando em complexo de cor azul, cuja absorbância foi lida a 660 nm ou com filtro
vermelho (DOLES, 2000).
4.6.2. Teores de magnésio e cloreto no soro
Através de kits colorimétricos, procedeu-se á determinação dos teores de
magnésio e cloreto nas amostras de soro sanguíneo.
A metodologia para determinar magnésio baseou-se na reação do íon, em
meio alcalino, com o corante de Mann e Yoe com leitura em espectrofotômetro
505nm (DOLES, 2000).
17
O princípio para determinar a concentração de cloretos consistiu na formação
de um complexo colorido através da reação do íon com sulfoxicianeto de mercúrio e
nitrato férrico, lendo-se a absorbância a 510 nm ou com filtro verde (ZALL et al.,
1956).
4.6.3. Teor de glicose no plasma
O teor de glicose no plasma sanguíneo foi determinado através de kit
enzimático (DOLES, 2000). O método baseou-se na reação da glicose com a glicose
oxidase, formando-se como produto ácido glicônico e peróxido de hidrogênio. Em
uma segunda etapa, o peróxido formado, na presença de 4-aminoantipirina e
peroxidase, deu origem a um complexo de coloração avermelhada, cuja absorbância
foi medida a 510 nm, ou filtro verde.
4.6.4. Teores de colesterol total e colesterol HDL nas amostras de soro
O teor de colesterol total nas amostras de soro sanguíneo foi determinado
através de kit enzimático, tendo como princípio a reação dos ésteres de colesterol
com a colesterol esterase, formando ácidos graxos e colesterol livre que, na
presença da colesterol esterase, forma colesterona e peróxido de hidrogênio. O
peróxido, na presença da 4-aminoantipirina, produz um complexo de coloração
avermelhada, cuja absorbância foi lida a 510 nm ou filtro verde.
O procedimento para determinar o colesterol HDL consistiu na precipitação
seletiva das lipoproteínas de baixa densidade (LDL) e as de muito baixa densidade
(VLDL) na presença de polietilenoglicol, sendo a fração HDL determinada pelo
método enzimático já descrito (DOLES, 2000).
4.6.5. Teores de triglicerídeos nas amostras de soro
Os triglicerídeos foram determinados nas amostras de soro sanguíneo,
utilizando-se de kit enzimático. As reações envolvidas na determinação podem ser
assim resumidas: os triglicerídeos, na presença de lípase, produzem glicerol e
ácidos graxos. O glicerol, na presença de ATP e glicerolquinase, forma glicerol-3P e
ADP. Em uma terceira etapa, o glicerol-3P, na presença da glicose fosfato oxidase,
18
produz peróxido de hidrogênio, entre outros compostos. O peróxido, por sua vez, na
presença de 4 aminoantipirina e peroxidase, forma um complexo de coloração
avermelhada, cuja absorbância foi lida a 510 nm ou com filtro verde (DOLES, 2000).
4.6.6. Teores de lipídios totais nas amostras de soro
O teor de lipídios totais nas amostras de soro sanguíneo, fração representada
pelos triglicerídeos, colesterol e fosfolipídios, foi determinado pelo método que se
baseia na liberação, por hidrólise, dos ácidos graxos presentes no soro através do
ácido sulfúrico, os quais, por sua vez, reagem com a vanilina em meio ácido,
formando um complexo de cor rósea, cuja absorbância foi determinada a 510 nm ou
com filtro verde (DOLES, 2000).
4.6.7. Determinação de teores de enxofre na amostra de soro.
Os teores de enxofre nas amostras de soro sangüíneo foram determinados
conforme a metodologia descrita em Krugsheld et al., (1979). Foram adicionados a
500 µL de soro, 2 mL de TCA (50 g L-1), deixando-se em repouso por 10 minutos.
Decorrido este período, as amostras foram centrifugados a 3000 rpm por 15
minutos. Então, a 1 mL do sobrenadante adicionaram-se 0,25 mL de solução de
BaCl2 ( 20 g de BaCl2 e 10 g de dextran por litro de solução), seguindo-se repouso
de 35 minutos, após o que foi feita a leitura da absorbância do precipitado de BaSO4
em comprimento de onda de 360 nm. O branco consistiu em 1 mL de sobrenadante
e 0,25 mL de dextran (10 g por litro de solução).
4.6.8. Determinação da proteína total e da uréia nas amostras de soro
Para a determinação dos teores de proteína sérica e de uréia total nas
amostras de soro sanguíneo foi utilizado kit colorimétrico.
No caso da proteína sérica, o princípio foi baseado na reação do biureto
(sulfato de cobre, citrato trissódico, carbonato de sódio e hidróxido de sódio) com a
proteína da amostra, lendo-se a absorbância do complexo colorido a 510 nm ou com
filtro verde (CELM, 1999).
19
A determinação do teor de uréia nas amostras de soro foi baseada na
formação de cor pela reação da uréia com a diacetilmonoxina, em meio ácido. A
absorbância do produto colorido foi lida a 510 nm ou com filtro verde (FOSTER &
HOCHHOLZER, 1971).
4.6.9. Determinação de creatinina em amostras de soro
Na determinação da creatinina sérica, utilizaram-se kits colorimétricos de ponto
final, que se baseiam na reação da creatinina com picrato alcalino (reação de Jaffé),
produzindo um cromógeno vermelho, sendo a leitura efetuada em comprimento de
onda de 500 nm (CELM, 1999).
4.6.10.
Determinação da atividade de fosfatase nas amostras de soro
A amostra de soro foi incubada com p-nitrofenilfosfato (substrato) que, sob a
ação da fosfatase, sofre hidrólise, com liberação p-nitrofenil que, na presença de
meio alcalino, apresenta coloração amarela, determinada por espectrofotometria no
visível. A quantidade de p-nitrofenil tem relação direta com a atividade de fosfatase
(DOLES, 2000).
4.6.11.
Determinação da albumina nas amostras de soro
A albumina presente na amostra reage com o verde de bromocresol em meio
ácido, formando um complexo colorido que é quantificado espectrofotometricamente.
A absorbância do complexo formado, medida em 630 nm, é diretamente
proporcional à concentração de albumina na amostra analisada (PETERS et al.,
1982).
4.6.12.
Determinação transaminase glutâmico oxalacética (TGO)
A aspartato aminotransferase (AST/TGO) cataliza a transferência do grupo
amino do aspartato para 2-oxoglutarato com a formação de oxalacetato e glutamato.
O oxalacetato é reduzido a malato por ação da malato desidrogenase (MDH), e
20
paralelamente a coenzima NADH é oxidada a NAD+ . A coenzima NADH tem um
coeficiente de absorção molar elevado em 340 nm, sendo quase nula a absorção de
NAD em 340 nm. A oxidação de NADH é diretamente proporcional à atividade da
AST/TGO. A atividade enzimática é então calculada através da diminuição da
absorvância da solução de NADH em 340nm (BURTIS et al., 1994)
21
5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
5.1. Desempenho ponderal
Na Tabela 2, encontram-se os resultados obtidos do ganho em peso médio,
expressos em kg.dia-1, divididos em intervalos de 28 dias, e do ganho de peso total,
expresso em kg.animal-1, assim como a comparação de médias.
Tabela 2. Dados de ganho de peso médio, expressos em kg/animal/dia e, ganho de
peso total, expressos em kg.animal-1, em função da suplementação e da época de
amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
DMS
CV % (Tratamento)
CV % (Período)
Ganho de peso médio (kg/dia)
28 dias
56 dias
0,235 b
0,265 b
0,353 a
0,342 a
0,061
0,063
34,43
35,42
Ganho de peso total
(kg)
14,00 b
18,99 a
3,07
22,02
Letras minúsculas comparam médias, na coluna, pelo teste de Tukey P< (0,05).
CoQ10 (-) Tratamento sem suplementação.
CoQ10 (+) Tratamento com 20 mg CoQ10.
A suplementação com 20 mg de CoQ10 afetou significativamente o ganho em
peso nos dois períodos avaliados (P<0,01) e, independente do período, os animais
suplementados apresentaram ganhos superiores. A média dos suplementados e não
suplementados, nos dois períodos, foi de 0,347 kg/dia e 0,250 kg/dia,
respectivamente, sendo a diferença entre tratamentos de 97 g (38,80% superior).
Esta diferença em ganho de peso fez com que os animais com suplementação
apresentassem, na desmama, superioridade de 4,99 kg de ganho de peso total
(P<0,01).
Os valores de ganho de peso total, nos tratamentos sem suplementação e
com suplementação, foram de 14kg e de 18,99 kg, respectivamente. Os resultados
do ganho de peso observados não puderam ser comparados com dados de
literatura uma vez que não foram encontrados trabalhos na área com bovinos.
22
5.2. Perfil Metabólico
5.2.1. Glicose plasmática
Na tabela 3, pode-se observar que, na primeira amostra de sangue obtida, os
níveis de glicose foram inferiores entre os animais suplementados com CoQ10, fato
este não observado na segunda amostragem, apesar dos valores plasmáticos de
glicose serem ligeiramente superiores entre os animais que receberam CoQ10. Os
valores de glicose nas três amostragens, não tiveram uma constância sendo
observada redução e um aumento dos valores no tratamento com suplementação de
CoQ10, e igualmente, no grupo controle.
Tabela 3. Valores de glicose plasmática, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época de amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
81,05
aA
59,98 bB
61,54
76,90 aAB 72,22 aB
83,72
78,97
66,10
72,63
10,46
Parcela
22,51
Subparcela
14,57
bB
aA
Média
DMS
67,52
77,61
10,47
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação de 20 mg CoQ10
Na Figura 9, encontram-se os resultados obtidos de glicose plasmática,
expressos em mg.dL-1, divididos em intervalos de 28 dias, assim como a
comparação de médias.
A suplementação com CoQ10 elevou a concentração plasmática de glicose
nos dois períodos avaliados (Figura 9). Níveis mais elevados de glicose plasmática
podem justificar, em parte, as diferença de ganho em peso de animais
suplementados e não suplementados (QUIGLEY et al., 1991).
Entre os metabólitos sanguíneos mais usados para avaliar o estado
energético estão a glicose, o beta-hidroxibutirato (BHB) e os ácidos graxos não
esterificados ou livres (AGL) (PAYNE & PAYNE,1987)
23
Figura 9. Teores de glicose plasmática em bezerras da raça Holandesa, submetidos
à suplementação com coenzima Q10 injetável. Letras maiúsculas comparam médias
no tempo de amostragem e, letras minúsculas compraram médias de tratamentos
em um mesmo período amostral.
Apesar de a glicose ser o metabólito selecionado para avaliar o estado
energético dos ruminantes, trabalhos têm demonstrado certa contrariedade nos
resultados, uma vez que mecanismos homeostáticos que controlam a glicemia
tornam difícil estabelecer uma clara relação entre estado nutricional e níveis de
glicose, pois além de grande parte dos tecidos utilizarem ácidos graxos livres (AGL)
e corpos cetônicos como fonte energética, o fígado destes animais possui alta
função neoglicogênica.
O nível de glicose plasmático é o indicador menos expressivo do perfil
metabólico para avaliar o estado energético devido à insensibilidade da glicemia a
mudanças nutricionais e à sensibilidade ao estresse. A glicemia, todavia, pode ser
de utilidade em condições de déficit energético severo e em animais que não estão
em gestação e em lactação.
Segundo Quigley et al. (1991), espera-se redução dos níveis de glicose sérica
com o avanço da idade, em razão da atividade fermentativa ruminal. Entretanto,
esses autores relataram que, nos animais de até 14 semanas de idade, os níveis de
glicose podem ser maiores, em decorrência da adaptação fisiológica da mudança de
pré-ruminante para ruminante. Segundo Nussio et al.(2003) mostram claramente,
em seu experimento, redução nas concentrações de glicose plasmática com o
avanço da idade dos animais.
24
Os valores séricos de glicose encontram-se próximos aos relatados por
Quigley et al. (1991), com valores médios de 76 mg/dL.
Os fatores climáticos como a umidade e a temperatura relacionadas às
estações do ano, também, podem influenciar os valores dos teores de glicose, pois
em meses mais quentes há aumento da freqüência respiratória causando rápida
utilização da glicose sangüínea pelos músculos respiratórios e assim resultando em
uma queda na glicemia sob stress do calor. (POGLIANI & BIRGEL JUNIOR, 2007)
5.2.2. Cálcio sérico
Na tabela 4, pode-se observar que a utilização de coenzima Q10 não afetou
os níveis séricos de cálcio. Foi observada redução nas concentrações séricas do
elemento com o aumento da idade dos animais.
O cálcio é um mineral que está intimamente associado ao metabolismo.
Apresenta-se no plasma, na forma livre ionizada (cerca de 45%) e na forma
orgânica, associada a proteínas, principalmente albumina (cerca de 45 %). Estas
duas formas estão em equilíbrio e sua distribuição final depende do pH, da
concentração de albumina e da relação ácido-base. Quando existe acidose, há uma
tendência para aumentar a forma ionizada de Ca. Uma queda no nível de albumina
causa diminuição do valor de Ca sangüíneo (CHALLA et al., 1989). Seu nível no
plasma é bastante constante nas espécies animais, localizando-se entre 8 a 12
mg/dL (GONZALEZ et al., 2000).
Tabela 4. Dados de cálcio sérico, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época de amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
11,01
9,88
9,10
10,99
10,28
9,62
11,00 A
10,08 B
9,36 C
0,49
Parcela
9,69
Subparcela
7,00
Média
10,00
10,30
DMS
a
a
0,48
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey P<(0,05)..
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação de 20 mg CoQ10
25
O cálcio, mineral mais abundante no organismo animal, é essencial na
formação do esqueleto, coagulação do sangue, regulação do ritmo cardíaco,
excitabilidade neuromuscular, ativação de enzimas e permeabilidade de membranas
(McDOWELL, 1999).
Os valores observados estão de acordo com os parâmetros fisiológicos de
bovinos, descritos por González & Silva (2003).
O sistema endócrino envolvendo a vitamina D3, o paratormônio (PTH) e a
calcitonina, responsáveis pela manutenção dos níveis sanguíneos de cálcio, atua de
forma bastante eficiente para ajustar-se à quantidade de cálcio disponível no
alimento e às perdas que acontecem, principalmente na gestação e na lactação. O
firme controle endócrino do Ca faz com que seus níveis variem muito pouco (17%)
comparado com o fósforo (variação de 40%) e o magnésio (variação de 57%).
Portanto, o nível sanguíneo de cálcio não é um bom indicador do estado nutricional,
enquanto que os níveis de fósforo e magnésio refletem diretamente o estado
nutricional com relação a estes minerais (WITTWER et al., 1993).
Os níveis de Ca e P no sangue são regulados pelo paratormônio, calcitonina
e pela vitamina D e estão inter-relacionados (CAVALHEIRO & TRINDADE, 1992).
A absorção de Ca no intestino diminui com a idade. Quando ocorrem
desequilíbrios, os animais mais velhos não são capazes de mobilizar reservas,
sendo, portanto, mais suscetíveis a sofrerem hipocalcemia. Este transtorno também
foi detectado em animais que têm alta produção de leite, devido à grande perda de
Ca, diariamente (GONZALEZ, 2000).
Denek et al. (2006), estudando o efeito da carga de calor na utilização de
nutrientes e nos parâmetros do sangue de 16 cordeiros Awassi de 2 anos de idade,
alimentados com diferentes níveis e tipos de forragem, observaram que as
concentrações de Ca no soro foram afetadas pelo tipo e nível da forragem, mas não
pela carga de calor (MARQUES, 2007).
5.2.3. Fósforo
A concentração sérica de fosfato inorgânico não foi afetada pela utilização de
CoQ10 ou pelo tempo de amostragem (Tabela 5). A média de fosfato inorgânico
26
sérico nos animais suplementados e não suplementados foi de 7,97 mg/dL e 7,76
mg/dL, respectivamente.
O fósforo circulante no organismo de ruminantes está tanto na forma orgânica
como na inorgânica, predominando a forma inorgânica numa relação de 4:1, sendo
que esta forma está presente principalmente no plasma e predominantemente
ionizado. Nos eritrócitos, o P está ligado na forma de éster (BARCELLOS, 1998).
Timm (2001) afirma que os níveis de fósforo podem permanecer inalterados
no sangue por longos períodos após exposição à deficiência. No entanto, valores
baixos asseguram o diagnóstico de carência.
Tabela 5. Dados de fósforo, expressos em mg/dL, em função da suplementação
com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
0
Período experimental (dias)
28
56
8,04
8,38
7,39
7,71
9,20
0,83
Parcela
Subparcela
21,61
26,30
7,97
6,49
A
6,68
DMS
7,76
6,88
10,03
B
Média
1,45
B
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação de 20 mg
CoQ10
Estes valores estão de acordo com os parâmetros fisiológicos normais nos
bovinos, descritos por González & Silva (2003).
5.2.4. Uréia sérica
Na tabela 6, pode-se observar que, nas três amostragens realizadas, os
valores séricos de uréia não foram afetados pela suplementação com CoQ10. Houve
redução na concentração deste metabólito com o aumento da idade dos animais,
ocorrendo diferença significativa somente entre os valores obtidos na primeira e
terceira amostragens.
27
Tabela 6. Uréia sérica, expressa em mg/dL, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
32,41
32,04
29,24
36,90
32,29
30,08
34,66
A
32,16 AB
29,66
4,86
Parcela
25,24
Subparcela
21,62
Média
31,23
33,09
DMS
a
a
3,96
B
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação de 20 mg
CoQ10
Valores de concentração sanguínea da uréia são determinados pela
velocidade de desintoxicação da amônia e pela quantidade e velocidade de sua
síntese hepática, considerando-se a sequência de eventos proteólise e formação de
aminoácidos; desaminação de aminoácidos e produção de amônia; utilização da
amônia para síntese protéica microbiana e/ou condensação de duas moléculas de
amônia com CO2 para formação de uréia (CONTRERAS, 2000).
A avaliação do perfil metabólico, ligada ao estado nutricional e desempenho
reprodutivo, tem despertado o interesse de diversos pesquisadores, enfocando
principalmente as maiores exigências nutricionais associadas com o melhor
desempenho produtivo dos rebanhos, em contraponto, apresentam queda nas taxas
reprodutivas e maior teor dos metabólicos protéicos do sangue, como uréia e
albumina (PEIXOTO et al., 2007).
Os níveis de uréia sanguínea além de sofrerem influência do fator etário
também se alteram em função da ingestão protéica (BENESI et al, 2005).
Para se determinar a concentração de uréia no sangue é importante
considerar a quantidade de proteínas ingeridas na ração, pois animais que são
alimentados com dietas deficitárias em proteínas apresentam valores baixos de
uréia no sangue (GONZALEZ et al., 2000).
Outro fator que também está relacionado à concentração de uréia no sangue
é a energia. Gonzales et al. (2000) observou que bovinos que utilizavam dietas com
déficit de energia mostraram valores altos de uréia no sangue.
28
Cerca de 60 a 80% da proteína é transformada em amônia no rúmen, que é
utilizada pelos microrganismos ruminais para a síntese de suas proteínas
estruturais. A amônia absorvida chega ao fígado por via sangüínea, onde é
transformada em uréia. A proteína degradável está acompanhada por proteínas não
degradáveis que escapam à utilização ruminal, sendo absorvida na forma de
aminoácidos no intestino delgado. A diminuição da ingestão de energia influi
inversamente na concentração de amônia ruminal devido à redução da síntese
protéica microbiana, elevando a concentração de uréia sangüínea. Dessa forma, os
valores de concentração sanguínea da uréia são determinados pela velocidade de
desintoxicação da amônia e pela quantidade e velocidade de sua síntese hepática,
considerando-se esta seqüência de eventos: proteólise e formação de aminoácidos;
desaminação de aminoácidos e produção de amônia; utilização da amônia para
síntese protéica microbiana e/ou condensação de duas moléculas de amônia com
CO2 para formação de uréia (CONTRERAS, 2000).
Mas ainda vale lembrar que, além dos fatores mencionados anteriormente
como agentes que interferem na concentração da uréia, o parto e a lactação
também podem ser responsáveis por alteração na concentração de uréia
(MARQUES, 2007).
Segundo Mulholland et al. (1976), o principal fator controlador dos níveis de
uréia no plasma é a formação de amônia no rúmen, e o nível de uréia no sangue
parece refletir as modificações na produção de amônia ruminal. Desta forma, a
concentração de uréia no sangue é influenciada pela extensão que os aminoácidos
absorvidos são oxidados e pela absorção de amônia do rúmen, refletindo
substancialmente a extensão do balanço de nitrogênio da dieta, considerando-se
tanto as exigências dos microrganismos ruminais como as do animal hospedeiro
(MARQUES, 2007)
5.2.5 Albumina sérica
Na tabela 7, pode-se observar que, nas três amostragens realizadas, os
valores séricos de albumina não foram afetados pela suplementação de CoQ10. Os
menores
valores
foram
observados
na
terceira
amostragem,
diferindo
significativamente da segunda amostragem.
29
No caso das proteínas, os dois principais indicadores do metabolismo em
ruminantes são os níveis séricos de uréia e albumina; a uréia demonstra o estado
protéico do animal em curto prazo, enquanto que a albumina o demonstra em longo
prazo (PAYNE & PAYNE, 1987).
A albumina é considerada o indicador mais sensível para determinar o estado
nutricional protéico; valores persistentemente baixos de albumina sugerem
inadequado consumo protéico. Ela é a principal proteína plasmática sintetizada no
fígado e representa cerca de 50 a 65% do total das proteínas séricas, além de
contribuir com 80% da osmolaridade do plasma sanguíneo. Entretanto, para detectar
mudanças significativas na concentração de albumina, é necessário um período de
pelo menos um mês, devido à baixa velocidade de síntese e de degradação desta
proteína no ruminante (PAYNE & PAYNE, 1987).
A bioquímica das proteínas séricas é de primordial importância na avaliação
do estado nutricional, podendo indicar alterações metabólicas e auxiliar no
diagnóstico clínico de diversas enfermidades. Para uma interpretação correta dos
resultados obtidos, existe a necessidade de se conhecer os valores de referência
para as diferentes espécies, raças, sexos e idades de animais criados em diferentes
regiões do Brasil, e sob diversas condições de manejo (BARIONI et al., 2001).
Wittwer et al. (1987) defendem que a albuminemia pode variar ao longo do
ano em função das variações climáticas e o efeito destas sobre as pastagens. No
verão, é comum encontrar altos níveis de albumina sérica, pelo fato das pastagens
apresentarem melhor qualidade. González et al. (2000) relataram variações mensais
de uréia e albumina em novilhas de corte em pastagens nativas do Rio Grande do
Sul, sendo janeiro e junho os meses em que ocorre maior deficiência de substratos
protéicos na dieta, com maior falta em junho, indicada pela queda simultânea de
albumina e uréia sangüíneas neste mês. Nos meses de março e julho, haveria uma
moderada deficiência de proteína, que se reflete na diminuição da uréia sanguínea
sem, porém, atingir a albumina.
Segundo Guyton (1978) a albumina é a principal responsável pela
manutenção da pressão osmótica no soro sangüíneo, podendo a sua concentração
30
variar, também, em conseqüência da flutuação de outras classes de proteínas
séricas (citado por MARQUES, 2007)
A hipoalbuminemia pode afetar o metabolismo e as concentrações obtidas de
outras substâncias devido ao papel da albumina como transportador, principalmente
de cálcio, fructosamina e ácidos graxos livres, além de causar queda da pressão
osmótica do plasma com probabilidade de levar a ascite, o que ocorre quando a
concentração de albumina cai para menos de 20 g/L. Aumentos de albumina ficam
praticamente restritos a situações de desidratação (GONZÁLEZ, 2010).
Tabela 7. Albumina sérica, expressa em g/L, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
25,14
26,42
23,61
27,26
27,98
24,24
26,20 AB
27,20
A
23,93
2,38
Parcela
16,97
Subparcela
13,22
Média
25,06
26,50
DMS
a
a
2,14
B
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação de 20 mg CoQ10
5.2.6 Lipídeos totais séricos
Na tabela 8, pode-se observar que durante o período experimental não houve
efeito significativo da suplementação com CoQ10 nos teores séricos de lipídeos
totais. Valores inferiores foram observados na segunda amostragem do período
experimental.
31
Tabela 8. Lipídeos séricos totais, expressos em mg/dL, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
221,84
139,19
244,03
231,92
159,56
224,57
226,88
A
149,38 B
234,30
30,92
Parcela
15,44
Subparcela
21,70
Média
201,69
205,35
DMS
a
a
15,37
A
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
5.2.7 Fosfatase alcalina sérica
Na tabela 9, pode-se observar que os valores séricos na terceira amostragem
(56 dias) foram inferiores nos animais recebendo suplementação com CoQ10, sendo
que nos demais períodos não houve diferença significativa entre os tratamentos.
Pode–se observar também, que os níveis séricos foram mais constantes nos
animais com suplementação com CoQ10, não havendo diferenças significativas
entre os períodos de amostragem, fato não observado entre os animais sem
suplementação.
Tabela 9. Atividade de fosfatase alcalina sérica, expressa em UI/L, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
108,11 aA
87,03 aB
107,75
97,18
aA
86,53 aA
85,12
102,65
86,78
96,44
13,76
Parcela
22,24
Subparcela
14,84
aA
bA
Média
DMS
100,96
89,61
14,00
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
32
Em animais normais, a atividade da fosfatase alcalina (ALP) origina-se
principalmente dos ossos e fígado. Elevações nas atividades desta enzima são
observadas em animais em crescimento ou em adultos com atividade osteoblástica.
A atividade da ALP pode também estar elevada nas doenças hepáticas agudas e
crônicas; porém, aumentos marcantes não são indicativos de colestase (TENNANT,
1997).
Autores, como Luvizotto (1984), em estudos realizados considerando
condições patológicas como o hiperparatireoidismo em bovinos, encontrou
correlação entre os níveis do Ca e os níveis da fosfatase alcalina e afirmou que a
relação entre eles era de proporcionalidade inversa. Simensen (1970) e Coles
(1984) consideraram que a fosfatase alcalina participa dos processos de aposição
óssea e também do processo de reabsorção e, por isso, em casos de
hiperparatireoidismo,
seus
níveis
mostram-se
elevados.
A
condição
de
hiperparatireoidismo a que se referem esses autores é condizente com o a situação
de baixos índices de Ca na dieta animal (Hiperparatireoidismo nutricional
secundário).
5.2.8 Magnésio sérico
Na tabela 10, pode-se observar que, não houve efeito da suplementação com
CoQ10 ou do tempo de amostragem sobre os valores séricos de magnésio.
O magnésio é o quarto elemento mais abundante no organismo e está
associado com o Ca e o P nos tecidos e no metabolismo animal (CAVALHEIRO &
TRINDADE, 1992). Não existe controle homeostático do Mg, por isso a sua
concentração sangüínea reflete diretamente o nível da dieta.
O
controle
renal
de
Mg
está
mais
direcionado
para
prevenir
a
hipermagnesemia, mediante a excreção do excesso de Mg pela urina. Diante de
uma deficiência de Mg, seus níveis na urina caem a praticamente zero. Assim, os
níveis de Mg na urina também podem ser indicadores da ingestão do mineral.
33
Tabela 10. Magnésio sérico, expressos em mg/dL, em função da suplementação
com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
0
2,37
2,25
2,31
A
0,19
Parcela
Subparcela
Período experimental
28
56
2,47
2,18
2,40
2,33
2,44
A
2,26
Média
2,34
2,33
DMS
a
a
0,15
A
13,65
11,79
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
A hipomagnesemia tem sérias consequências para os ruminantes podendo
levar até a morte, enquanto que a hipermagnesemia não causa maior transtorno. A
hipomagnesemia pode levar à tetania hipomagnesêmica, doença causada pela
baixa ingestão de Mg na dieta ou pelo consumo aumentado de compostos que
causam interferência com o Mg, tais como potássio e proteínas. O Mg está mais
disponível em forragens secas e em concentrados do que em pastos frescos.
Pastagens jovens com altos níveis de proteína e K inibem a absorção de Mg. O Mg
é absorvido no intestino mediante um sistema de transporte ativo que pode ser
interferido pela relação Na:K e ainda pela quantidade de energia, de Ca e de P
presentes no alimento. A hipomagnesemia também pode ser consequência de uma
excessiva lipólise em decorrência de uma deficiência de energia.
O nível de Mg no perfil metabólico pode indicar estados subclínicos antes de
surgir o problema (nível normal 2,0-3,0 mg/dL), sendo especialmente útil antes do
parto para evitar problemas de tetania no pós-parto, geralmente complicados com
febre de leite (WITTWER et al., 1993).
5.2.9 Creatina sérica
Na tabela 11, pode-se observar que os valores séricos na terceira
amostragem (56 dias) foram inferiores nos animais recebendo suplementação com
CoQ10, sendo que nos demais períodos não houve diferença significativa entre os
tratamentos. Entre os animais sem suplementação pode-se observar que ocorreu
34
aumento nos níveis séricos com o avançar da idade, fato não observado entre os
animais suplementados.
A creatinina sérica é uma substância nitrogenada não protéica, formada a
partir do metabolismo muscular da creatina e da fosfocreatina, não sendo
influenciada na sua formação, nem pela dieta ou pelo catabolismo protéico, por isso
não sofreria influência dos fatores etários ou sexuais.
A capacidade funcional renal vai sendo gradativamente assumida pelo
neonato, refletindo no comportamento observado para a creatinina (BENESI, 2005).
Ao nascimento várias alterações ocorrem para permitir a sobrevivência dos
neonatos. Os rins assumem o controle do balanço hidroeletrolítico e as trocas
gasosas são realizadas pelos pulmões, assumindo esses órgãos as funções da
placenta. Em razão disto, a creatinina sérica avaliada em sua pesquisa sofreu uma
queda de 50 % nas primeiras 24 horas de vida dos bezerros avaliados
provavelmente devido ao aumento do fluxo sanguíneo renal que ocorre ao longo da
primeira semana de vida (BENESI, 2005).
Tabela 11. Creatina sérico, expresso em mg/dL, em função da suplementação com
CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
1,05
aB
0,92
aB
1,47
1,25
aA
1,01
aB
1,19
1,15
0,96
1,33
0,21
Parcela
26,68
Subparcela
20,71
aA
bAB
Média
DMS
1,15
1,15
0,23
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, (oQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
Adams et al. (1993) relataram que o alto teor de creatinina ao nascimento
reflete a pobre remoção placentária e, não um mau funcionamento dos rins fetais.
Quando o neonato é sadio, suas taxas séricas de creatinina diminuem nos dias
subseqüentes devido a ação renal. Este mesmo decréscimo foi relatado por Egli &
Blum (1998).
Segundo Benesi (2005) é incorreto acreditar numa possível influência
nutricional nos teores deste catabólito, pois os resultados obtidos para creatinina
35
sérica em sua pesquisa mostraram-se mais homogêneos do que aqueles
observados para uréia sérica, descartando-se tal possibilidade.
A possível influência da constituição muscular sobre os teores séricos de
creatinina também foi descartada devido a homogeneidade dos resultados ao longo
dos 30 dias experimentais (BENESI, 2005).
5.2.10. Proteínas séricas totais
Na tabela 12, pode-se observar que, não houve efeito da suplementação com
CoQ10 sobre os valores séricos de proteína total. Os maiores valores foram obtidos
na primeira amostragem, não diferindo significativamente da terceira.
As principais proteínas plasmáticas são a albumina, as globulinas e o
fibrinogênio. Elas estão envolvidas em múltiplas funções, tais como a manutenção
da pressão osmótica e da viscosidade do sangue, o transporte de nutrientes,
metabólitos, hormônios e produtos de excreção, a regulação do pH sanguíneo e a
participação na coagulação sanguínea.
Tabela 12. Dados de proteína total sérica, expressos em g/L em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
28
56
5,46
5,96
5,54
5,69
A
5,50
B
5,82
0
6,16
5,69
5,92
0,33
Parcela
Subparcela
Média
5,86
5,64
DMS
a
a
0,46
AB
16,43
8,19
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey P<(0,05).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação, CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg CoQ10
As proteínas sanguíneas são sintetizadas principalmente pelo fígado, sendo
que a taxa de síntese está diretamente relacionada com o estado nutricional do
animal, especialmente com os níveis de proteína e de vitamina A, e com a
funcionalidade hepática. A hipoproteinemia pode ser indicadora de estados de
subnutrição, bem como de insuficiência ou de lesão hepática e hemorragias.
Animais jovens têm valores menores que os animais adultos (PAYNE & PAYNE,
1987). Hiperproteinemia pode ser observada em casos de desidratação, infecções,
36
tumores e, artificialmente, em amostras hemolisadas. Foram relatados valores de
proteína total sérica em vacas da raça Holandesa no sul do Brasil de 84,5 + 18,8 g/L
(GONZÁLEZ et al., 1996).
5.2.11. Colesterol total e HDL séricos
Na Tabela 13, pode-se observar que não houve efeito da suplementação com
CoQ10 sobre os valores séricos de colesterol total, no entanto, com base nos dados
da Tabela 14, pode-se observar que a concentração sérica de HDL foi superior nos
animais com suplementação de CoQ10, não havendo efeito do tempo de
amostragem.
Tabela 13. Dados de colesterol total sérico, expressos em g/l em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
90,51
130,56
130,68
93,50
132,63
130,10
92,01
B
131,60
A
130,39
7,73
Parcela
11,28
Subparcela
9,37
Média
117,25
118,74
DMS
a
a
6,51
A
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg CoQ10
Tabela 14. Dados de colesterol HDL sérica, expressos em g/l, em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
64,54
a
65,55
b
65,29
64,41
a
71,74
a
71,37
64,47
A
68,64
A
68,33
5,19
Parcela
10,01
Subparcela
11,04
b
a
A
Média
DMS
65,13
69,17
3,28
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg CoQ10
O colesterol nos animais pode ser tanto de origem exógena, proveniente dos
alimentos, como endógena, sendo sintetizado a partir do acetil-CoA no fígado, nas
gônadas, no intestino, na glândula adrenal e na pele. A biossíntese de colesterol no
37
organismo é inibida com a ingestão de colesterol exógeno. O colesterol circula no
plasma ligado às lipoproteínas (HDL, LDL e VLDL). Os níveis de colesterol
plasmático são indicadores adequados do total de lipídeos no plasma, pois
corresponde a aproximadamente 30% do total. O colesterol é necessário como
precursor dos ácidos biliares, os quais fazem parte da bile, e dos hormônios
esteróides (adrenais e gonadais). É excretado pela bile, na forma de ácidos biliares,
ou na urina, na forma de hormônios esteróides.
Aumento nos valores do colesterol sanguíneo podem ser observados em
casos de hipotireoidismo, diabetes mellitus, obstrução biliar, síndrome nefrótico,
dieta rica em gorduras, gestação e início da lactação. Os animais mais jovens, em
geral, têm menor teor de colesterol que os mais velhos. Diminuição de colesterol
sanguíneo pode ser observada em casos de insuficiência hepática, dieta baixa em
energia, hipertireoidismo e no pré-parto.
Pogliani & Birgel Jr. (2007) com o intuito de estabelecer os valores de
referência do lipidograma de bovinos, da raça Holandesa, criados no Estado de São
Paulo, examinaram amostras de soro e plasma sangüíneo de 413 bovinos
clinicamente sadios encontrando assim os seguintes valores de referência:
colesterol – entre 86,5 e 120,8 mg/dL para bezerros com até 3 meses.
5.2.12 Triglicerídeos séricos
Na Tabela 15, pode-se observar que, não houve efeito da suplementação
com CoQ10 sobre os valores séricos de triglicerídeos. Os maiores valores foram
obtidos na terceira amostragem, não diferindo significativamente da primeira.
Os triglicérides são ésteres de glicerol e ácidos graxos provenientes da dieta
ou sintetizados no fígado. São transportados no plasma pelas lipoproteínas para o
tecido adiposo, muscular e outros, onde são utilizados como fonte de energia
celular.
Dokovic et al. (2005) mostraram que em vacas cetósicas a concentração
sérica de TG é menor que em vacas sadias porque os TG podem estar se
acumulando no tecido hepático e não saem para a circulação. González et al. (2009)
relatam que 52% de vacas com alta lipomobilização no primeiro mês de lactação e
38
43% de vacas com baixa lipomobilização no terceiro mês de lactação, tiveram
valores de TG <10,6 mg/dL.
Tabela 15. Dados de triglicerídeos séricos, expressos em mg/dL em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
28
56
6,92
12,33
7,50
12,26
A
7,21
B
12,30
0
12,70
11,48
12,09
1,23
Parcela
Subparcela
Média
10,65
10,41
DMS
a
a
0,90
A
17,52
16,77
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
5.2.13 Enxofre sérico
Na Tabela 16, pode-se observar que, aos 56 dias a suplementação com
CoQ10 promoveu redução nos teores de enxofre sérico. Observou-se redução nos
níveis séricos de enxofre com o avançar da idade dos animais, sendo esta redução
de forma mais acentuada nos animais com suplementação de CoQ10.
Usualmente, tem sido recomendada a dosagem dos teores de enxofre dietético
para avaliar o status deste elemento em ruminantes; Entretanto, em relação à
concentração deste nas pastagens, deve-se considerar sua biodisponibilidade, já
que boa parte do enxofre contido nas forragens não está disponível para os
ruminantes, e sua absorção depende ainda da interação com outros elementos
minerais (McDOWELL, 1999). Por esse motivo, alguns autores têm indicado a
dosagem da concentração de sulfato inorgânico sérico em bovinos, a fim de avaliar
o status de enxofre nos animais (KENNEDY & SIEBERT, 1972; ORTOLANI et al.,
2001).
39
Tabela 16. Dados de enxofre sérico, expressos em mg/l em função da
suplementação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
5,00
aA
4,32
aB
3,66
4,64
aA
4,83
aA
2,80
4,82
4,58
3,23
0,50
Parcela
14,67
Subparcela
14,90
aC
bB
Média
DMS
4,33
4,09
0,62
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg CoQ10
5.2.14 Aspartato aminotransferase (TGO)
Na Tabela 17, pode-se observar que, não houve efeito da suplementação
com CoQ10 sobre os valores séricos de aspartato aminotransferase. Aos 28 dias
ocorreu redução nos níveis séricos deste atributo, não diferindo dos valores obtidos
aos 56 dias.
Juntamente com outras enzimas, a dosagem da TGO é mais empregada para
o diagnóstico de doenças hepáticas, cardíacas. Valores elevados dessa enzima
podem ser encontrados em diversas patologias, como: hepatites, cirrose hepática,
necrose hepática, metástase hepática, drogas hepatotóxicas, processo infiltrativo
hepático (tumor), infarto do miocárdio, operações cardíacas, angioplastia e
cateterização
cardíaca,
pancreatite
aguda,
trauma
muscular
esquelético,
queimaduras graves, anemia hemolítica aguda, distrofia muscular progressiva,
mononucleose infecciosa com hepatite, doenças musculares primárias (miopatia,
miosite), doença renal aguda e convulsões recentes (LOPES, 2010).
A aspartato aminotransferase (AST) ou transaminase glutâmico-oxalacética
(GOT ou TGO) é uma enzima encontrada em concentração muito alta no músculo
cardíaco, no fígado, músculos esqueléticos e em menor concentração nos rins e
pâncreas. Nas células hepáticas, a AST localiza-se no citoplasma (40%) e na
mitocôndria (60%). Qualquer lesão tissular ou doença afetando o parênquima
hepático liberará uma maior quantidade da enzima para a corrente sanguínea,
elevando os níveis séricos da AST. Sempre que ocorrer uma lesão hepatocelular de
qualquer etiologia haverá uma grande liberação da enzima AST para a corrente
sanguínea, elevando seus níveis séricos. (LOPES, 2010).
40
Na hepatite virótica aguda, os níveis de AST encontram-se quase sempre
elevados em mais de 10 vezes o limite superior da faixa de referência e em alguns
casos ultrapassam a 20 vezes esse limite superior de normalidade. Entretanto,
dentro de uma a duas semanas, os valores de AST diminuem bastante podendo cair
para a faixa normal ou apresentar ligeiro aumento. (LOPES, 2010). Nos casos de
obstrução extra-hepática, as elevações de AST não são comuns, mas podem
ocorrer quando há lesão parenquimatosa secundária aguda. Na cirrose, as
alterações da AST e seus respectivos níveis vão depender da ocorrência e do grau
de lesão hepatocelular ativa presente. Geralmente, na cirrose inativa os valores de
AST não se alteram. Na cirrose alcoólica ativa, os valores de AST se elevam
moderadamente (LOPES, 2010).
Tabela 17. Dados de aspartato aminotransferase sérico, expressos em U/L em
função da suplantação com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
67,92
71,84
73,05
67,80
73,45
72,24
67,86
B
72,65
A
72,65
2,30
Parcela
5,83
Subparcela
4,63
Média
70,94
71,16
DMS
a
a
2,02
A
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem
estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg
CoQ10
5.2.15. Cloreto
Na Tabela 18, pode-se observar que, aos 56 dias a suplementação com
CoQ10 elevou os teores de cloreto sérico. Animais pertencentes ao tratamento
Testemunha não apresentaram alterações séricas deste atributo durante o período
experimental, no entanto, entre os animais suplementados com CoQ10 observou-se
elevação nos níveis séricos no terceiro período amostral.
O cloreto (Cl-) é o principal íon negativo extracelular do corpo. Sua função mais
importante é manter a neutralidade elétrica, principalmente como uma contrapartida
ao íon de sódio. As alterações séricas de cloreto muitas vezes são acompanhadas
pela perda ou pelo excesso de sódio no corpo.
41
Benesi et al. (2005) encontraram oscilações nos níveis séricos deste atributo
ao longo dos 30 dias do período experimental, no entanto, não foi observada
influência significativa do fator etário sobre os teores séricos deste eletrólito. Tal
constatação também foi descrita por Adams et al. , 1993 que estudaram bezerros
durante as primeiras 48 horas de vida. Isto sugere que este eletrólito não sofreu
influência das diversas variações fisiológicas que ocorrem durante o período
neonatal.
Tabela 18. Dados de Cloreto sérico, expressos em U/L em função da suplantação
com CoQ10 e da época da amostragem.
Tratamentos
CoQ10 (-)
CoQ10 (+)
Média
DMS
CV%
Período experimental (dias)
0
28
56
87,85
aA
84,38 aA
89,93
88,70
aB
87,39 aB
108,25
88,27
85,89
99,09
5,20
Parcela
7,60
Subparcela
6,69
bA
aA
Média
DMS
87,39
94,78
6,03
Médias seguidas pela mesma letra, minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem estatisticamente entre
si pelo Teste de Tukey ( 5% ).
CoQ10(-) Tratamento sem suplementação; CoQ10(+) Tratamento com suplementação com 20 mg CoQ10
42
6. CONCLUSÕES
A suplementação com CoQ10 promoveu melhora no desempenho ponderal de
bezerras da raça Holandesa, que pode ser justificada pelas alterações ocorridas no
perfil metabólico dos animais suplementados. Entre os atributos relacionados com o
metabolismo energético, pode-se ressaltar que os níveis de glicose foram superiores
entre os animais suplementados. Entre os constituintes da fração lipídica, somente o
HDL apresentou-se elevado entre os animais suplementados. Nenhuma alteração foi
constada no metabolismo protéico e entre os constituintes da fração mineral,
alterações significativas foram observadas nas concentrações séricas de enxofre
(redução) e cloreto (aumento).
43
7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ADAMS, R. et al. Physiologic differences between twin and single born beef calves in
the first two days of life. Cornell Veterinary, v. 83, n. 1, p. 13-29, 1993.
ARROYO, A.; KAGAN, V.E.; TYURIN, V.A.; BURGESS, J.R.; DE CABO, R.; NAVAS,
P.; VILLALBA, J.M. NADH and NADPH-dependent reduction of coenzyme Q at the
plasma membrane. Antioxid Redox Signal. v.2, p.251-262, 2000.
BARCELLOS, J.O.J. O papel do fósforo na nutrição de bovinos de corte. In:
GONZÁLEZ, F.H.D.; OSPINA, H.P.; BARCELLOS, J.O.J. (Eds). Nutrição mineral em
ruminantes.2ed. UFRGS, Porto Alegre, RS. Brasil. 1998.
BARIONI, G.; FONTEQUE, H.J.; PAES, P. R.O; TAKAHIRA, R.K.; KOHAYAGAWA,
A.; LOPES, R. S.; LOPES, S. T. A; CROCC, A. J. Valores séricos de Ca, P, sódio,
potássio e proteínas totais em caprinos fêmeas da raça Parda Alpina. Revista
Ciência Rural. Santa Maria, v.31, n.3, p.435-438, 2001.
BENESI, F. J.; COELHO, C. S.; LEAL, M. L. R.; MIRANDOLA, R. M. S.; LISBÔA, J.
A. N. . Parâmetros bioquímicos para avaliação da função renal e do equilíbrio
hidroeletrolítico em bezerras sadias, da raça Holandesa, no primeiro mês de vida.
Braz. J. vet. Res. anim. Sci., São Paulo, v. 42, n. 4, p. 291-298, 2005.
BERG, J. M.; TYMOCZKO, J. L.; STRYER, L. Biochemistry; W. H. Freeman and
Company: New York, 2003.
BURTIS, C.A, ASHWOOD, E.D., TIETZ. Textbook of Clinical Chemistry, 2ªed., 788796, 1994.
CAVALHEIRO, A C. L.; TRINDADE, D. S. Os minerais para bovinos e ovinos criados
em pastejo. Porto Alegre: Sagra-DC Luzzato. 141p. 1992.
CELM. Coletânea de técnicas químicas clínica. São Paulo, 1999. 44 p.
CHALLA, J.; BRAITHWAITE, G. D.; DHANOA, M. S. Phosphorus homoeostasis in
growing calves. Journal of Agricultural Science, Cambridge, v.112, p.217-226, 1989.
44
CLAYDEN, J.; Greeves, N.; Warren, S.; Wothers, P. Organic Chemistry; Oxford
University Press: New York, 2001.
COLES, E. H. Patologia clínica veterinária. 3. ed. São Paulo: Manole, 1984.
CONTRERAS, P. Indicadores do metabolismo proteico utilizados nos perfis
metabólicos de rebanhos. In: GONZALEZ, F. H. D.; BARCELLOS, J. O.; OSPINA,
H.; RIBEIRO, L. A. O. (Eds.) Perfil metabólico em ruminantes: seu uso em nutrição e
doenças nutricionais. Porto alegre, Brasil, Gráfica da Universidade Federal do Rio
Grande do Sul. 2000.
CORDEIRO, F., Coenzima Q10, um composto ubíquo. Faculdade de Ciências e
Tecnologia – Univesidade Nova de Lisboa. Caparica – Portugal – janeiro de 2006. p.
11
COTE, J.F., HOFF, B. Interpretation of blood profiles in problem dairy herds. The
Bovine Practitioner, v. 26, p. 7-11, 1991.
CRANE, F.L. Biochemical functions of coenzyme Q10. J Am Coll Nutr. v.20, p.591598, 2001.
CUPP, M.J.; TRACY, T.S. Chapter 4: Coenzyme Q10 (Ubiquinone, Ubidecarenone),
pp 53-85 In: Dietary Supplements edited by Cupp M.J. e Tracy, T.S. Humana press,
Totowa, New Jersey (2003).
DALLNER, G.; STOCKER, R. Coenzyme Q10, pp 121-131 In: Encyclopedia of
Dietary Supplements edited by Coates PM et al., Marcel Dekker Press, New York
(2005).
DENEK, N. AND A. CAN, 2006. Feeding value of wet tomato pomace ensiled with
wheat strawand wheat grain for awassi sheep. Small Ruminant Research, 65: 260265.
DIRKSEN, G. Sistema digestivo. In: DIRKSEN, G.; GRUNDER, H. D.; STOBER, M.
(Ed). Rosenberger exame clinico dos bovinos. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 1993 p. 166-228.
45
ĐOKOVIĆ, R., ŠAMANC, H., BOŠKOVIĆ-BOGOSAVLJEVIĆ, S., RADOVIĆ, V.
Changes of characteristic blood parameters in ketotic cows. Veterinarski Glasnik, v.
59, suppl. 1-2, p. 221-228, 2005.
DOLES. Catálogo de produtos Doles. Goiana, 2000. 132 p.
DOWNIE, J.G.; GELMAN, A.L. The relationship between changes in body weight,
plasma glucose and fertility in beef cows. Veterinary Research. v. 99, p. 210-212,
1976.
DUTTON, P.L.; OHNISHI, T.; DARROUZET, E.; LEONARD, M.A.; SHARP, R.E.;
CIBNEY, B.R.; DALDAL, F.; MOSER, C.C. Coenzyme Q oxidation reduction
reactions in mitochondrial electron transport (pp 65-82) in Coenzyme Q: Molecular
mechanisms in health and disease. Ed. Kagan VE; Quinn PJ, CRC Press (2000),
Boca Raton.
EGLI, C. P.; BLUM, J. W. Clinical, haematological, metabolic and endocrine traits
during the first three months of life of suckling Simmentaler calves held in acow-calf
operation. Journal of Veterinary Medicine, v. 45, n. 2, p. 99-118, 1998.
ENESI, F. J., COELHO, C. S., I; LEAL, L. M. R., MIRANDOLA, R. M. S., LISBÔA J.
A. N. Parâmetros bioquímicos para avaliação da função renal e do equilíbrio
hidroeletrolítico em bezerras sadias, da raça Holandesa, no primeiro mês de
vida.Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci., 2005, vol. 42, no. 4, pp. 291-298.
FOSTER, L.B.; HOCHHOLZER, J.M. A single reagent manual method for directly
determining urea nitrogen in serum. Clin chem, Washington, v.17, p.921-928, 1971.
GONZÁLEZ F.H.D., HAIDA K., ZANELLA R., FIGUR K. Influência da época do ano
no perfil metabólico em gado leiteiro no sul do Brasil. Arquivos da Faculdade de
Veterinária da UFRGS, v. 24, p. 11-24. 1996.
GONZÁLEZ F.H.D., ROCHA J.A. Metabolic profile variations and reproduction
performance in Holstein cows of different milk yields in southern Brazil. Arquivos da
Faculdade de Veterinária da UFRGS, v. 26, p. 52-64, 1998.
46
GONZÁLEZ, F. H. D. . FERRAMENTAS DE DIAGNÓSTICO E MONITORAMENTO
DAS DOENÇAS METABÓLICAS. Disponível em: <http://www.ufrgs.br/bioquimica >.
Acesso em: 06 julh. 2010.
GONZÁLEZ, F.H.D., MUIÑO, R., PEREIRA, V. et al. Indicadores sanguíneos de
lipomobilização e função hepática no início da lactação em vacas leiteiras de alta
produção. VIII CONGRESSO BRASILEIRO DE BUIATRIA. Belo Horizonte, Brasil,
2009. Anais.
GONZÁLEZ, F.H.D., SILVA, S.C. Introdução à bioquímica clínica veterinária. Porto
Alegre: UFRGS, 2003, 198 p.
GONZÁLEZ,H. D.; BARCELLOS, J.; PATINÕ, H. O.; RIBEIRO, L. A. Perfil
metabólico em ruminantes: seu uso em nutrição e doenças nutricionais. Editado por
Felix H.D. González. Porto Alegre, 2000.
GUYTON, A. C. Digestão e absorção no trato gastrointestinal e distúrbios
gastrointestinais. In: Saunders, W. B. (ed.) Fisiologia Basica. Rio de Janeiro:
Interamericana, 1978. Cap.44, p. 470-480.
HALLSTROM H. Oskadlighetsbed6mning av coenzym Q10. Var F6da 1993;
45:250259.
HATHCOCK, J.N.; RICHARDSON SHAO, A. Risk assessment for coenzyme Q10
(ubiquinone). Regul Toxicol Pharmacol. v.45, p. 282-288, 2006
HATHCOCK, J.N.; RICHARDSON SHAO, A.; JENNINGS, S. Coenzyme Q10
(Ubiquinone) in “The risk assessment and safety of bioactive substances in food
supplements (2006)” by IADSA, pp 26-35.
HEALTHCARE, T.. PDR for Nutritional Supplements, 1st Edition; Coenzyme Q10
(CoQ10) ed by S.S. Hendler pp 103-106, 2003.
IKEMATSU, H.; NAKAMURA, K.; HARASHIMA, S.; FUJII, K.;FUKUTOMI, N. Safety
assessment of Coenzyme Q10 (Kaneka Q10) In healthy subjects: A double-blind,
randomized, placebo-controlled trial. Regul Toxicol & Pharmacol. v. 44, p.212-218,
2006.
47
KALEN, A.; APPELKVIST, E.L.; DALLNER, G. Age-related changes in the lipid
compositions of rat and human tissues. Lipids, v.24, p.579-584,1989.
KAMEI, M.; FUJITA, T.; KANBE, T.; SASAKI, K.; OSHIBA, K.; OTANI, S.; et al. The
distribution and content of ubiquinone in foods. hit J Vitam Nutr Res 1986; 56:576
KENNEDY, P.M.; SIEBERT, B.D. The utilization of spear grass (Heteropogon
contortus): II. The influence of sulphur ou energy intake and rumen and blood
parameters in cattle and sheep. Aust. J. Agric. Res., Melbourne, v. 23, n. 1, p. 45-56,
1972.
KRUGSHELD, K. R. et al. Absorption, serum levels and urinary excretion of inorganic
sulfate after oral administration of
sodium sulfate in the conscious rat.
BiochimtBiophys Acta, Amsterdam, p. 492-500, 1979.
KUBO, H.; FUJII, K.; KAWABE, T.; MATSUMOTO, S.; KISHIDA, H.; HOSOE, K.
Food content of Ubiquinol-10 and Ubiquinone-10 in the Japanese diet, J Food
Composition and Analysis, available online 21 November 2007
LIPSHUTZ, B.H.; LOWER, A.; BERL, V.; SCHEIN, K.; WETTERICH, F. Org. Lett.
2005, 7 (19), 4095 – 4097.
LOPES, H. J. J. Disponível em: <www.goldanalisa.com.br>. Acesso em: 10 fev. 2010
LUCKER,
P.W.;
WETZELSBERGER,
N.;
HENNINGS,
G.;
REHN,
D.
Pharmacokinetics of Coenzyme ubidecarenone in healthy volunteers. Biomed Clin
Aspects of coenzyme Q, v 4, p. 143-151, 1984.
LUVIZOTTO, M. C. R. Aspectos morfológicos, morfométricos e funcionais da tireóide
e das paratireoides na doença periodontal dos bovinos. 1984, 38 f. Dissertação
(Mestrado em Medicina Veterinária) - UFMG, Escola de Veterinária. Belo Horizonte,
1984.
MAACH, L.; GRÜNDER, H. D.; FAIO, A. Hämozytologische und hämobiochemische
Untersuchungen bei schwarzbunten, Klinisch gesunden Aufzuchtkälbern in Marokko.
Deutsche Tierärztliche Wochenschrift, v. 98, n. 3, p. 94-102, 1991.
MARQUES, K. B.; Perfil metabólico de cordeiros em pastejo submetidos a diferentes
ambientes
e
suplementações
alimentares
no
semi-arido
paraibano.
2007.
48
Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Campina Grande Centro de
Saúde e Tecnologia Rural Campus de Patos/PB. 2007.
MATTILA, P.; Kum pulainem: coenzym e Q9 and Q10: contents in foods and dietary
intake. J. Food composition and analysis. 14, 409-417, 2001.
McDOWELL, L.R. Minerais para ruminantes sob pastejo em regiões tropicais,
enfatizando o Brasil. São Paulo: Unesp, 1999. (Boletim técnico, 3).
McKENZIE, H. A.; SMYTHE, L. E. Quantitative trace analysis of biological materials.
In: McKENZIE, H. A.; SMYTHE, L. E. Principles and methods for determination of
trace elements and trace amounts of some macro elements. Amsterdam:Elsevier,
1988. 417p.
MULHOLLAND, J. G.; COOMBE, J. B.; MCMANUS, W.R. 1976. Effect of starch on
the utilization by sheep of a straw diet supplemented with urea and minerals. Aust. J.
Agric. Res., 27:139-153
NEGISHI, E.; LIOU, S.; XU, C.; HUO, S. Org. Lett. 2001, 4 (2), 261-264
Nelson, D. L.; Cox, M. M. Lehninger Principles of Biochemistry; W. H. Freeman and
company: New York, 2004
NUSSIO, C. M. B.; SANTOS, F. A. P.; ZOPOLLATTO, M.; PIRES, A. V.; MORAIS, J.
B. . Processamento de Milho (Floculado vs. Laminado a Vapor) e Adição de
Monensina para Bezerras Leiteiras, Pré e Pós-Desmama Precoce. R. Bras. Zootec.,
v.32, n.1, p.229-239, 2003
ORTOLANI, E.L. et al. Variable on the blood inorganic sulfate concentration in cattle.
Cienc. Rural, Santa Maria, v. 31, n. 3, p. 431-434, 2001.
OVERVAD, K.; DIAMANT, B.; HOLM, L.; HOLMER, G.; MORTENSEN, S. A.;
STENDER, S. Coenzyme Q10 in health and disease. Eur. J. Clin. Nutr. 1999, 53, 764770.
PAYNE J.M., PAYNE S. The Metabolic Profile Test. Oxford University Press. 1987.
49
PEIXOTO L. A. O., OSÓRIO, M. T. M. . Perfil metabólico protéico e energético na
avaliação do desempenho reprodutivo em ruminantes. R. Bras. Agrociência, Pelotas,
v.13, n.3, p. 299-304, jul-set, 2007.
PETERS T., BIAMONT G. T., DOUMAS, B. T., Albumin in serum. In Faulkner W. R.,
MEITES S. Selected Methods of Clinical Chemistry, Volume 9, Washington: AACC
Press, 1982, 319p.
POGLIANI, F. C.; BIRGEL JUNIOR, E. Valores de referência do lipidograma de
bovinos da raça holandesa, criados no Estado de São Paulo. Braz. J. vet. Res. anim.
Sci., São Paulo, v. 44, n. 5, p. 373-383, 2007.
QUIGLEY, J.D.; CALDWELL, L.A.; SINKS, D.D. et al. Changes in blood glucose,
nonesterified fatty acids, and ketones in response to weaning and feed intake in
young calves. Journal of Dairy Science, v.74, n.1, p.250-257. 1991.
QUINN, P.J.; FABISIAK, J.P.; KAGAN, V.E. Expansion of antioxidant function of
vitamin E by coenzyme Q. BioFactors v.9, p.149-154, 1999.
REIST, M., D. ERDIN, D. VON EUW, K. TSCHUEMPERLIN, H. LEUENBERGER, C.
DELAVAUD, Y. CHILLIARD, H. M. HAMMON, N. KUENZI, AND J. W. BLUM.
Concentrate feeding strategy in lactating dairy cows: Metabolic and endocrine
changes with emphasis on leptin. J. Dairy Sci. 86:1690–1706, 2003.
SIMENSEN, M. G. Calcium, inorganic phosphorus, and magnesium metabolism in
health and disease. In: KANEKO, J. J., CORNELIUS, C.E. Clinical biochemistry of
domestic animals. 2. ed. New York: Academic Press, 1970. p. 313-365.
TENNANT, B. C. Hepatic function. In: KANEKO, J. J.; HARVEY, J. W.; BRUSS, M. L.
CLINICAL BIOCHEMISTRY OF DOMESTIC ANIMALS. 5.ed. San Diego: Academic
Press, 1997, Cap.13
THOMAS, S. R.; STOCKER, R. 9 Mechanisms of antioxidant action of ubiquinol-10
for low density lipoprotein. pp 131-150 in Coenzyme Q: Molecular mechanisms in
health and disease edited by Kagan VE and Quinn PJ, CRC Press (2000), Boca
Raton.
50
TIMM, C. D. Deficiência de fósforo. In: DOENÇAS de ruminantes e eqüinos. 2. ed.
São Paulo: Varela, 2001. v. 2, cap. 4, p. 321-328.
TSUJI, J.. Palladium Reagents and Catalysts – Innovations in Organic Synthisis;
John Wiley & Sons: New York, 1996.
TURUNEN, M.; OLSSON, J.; DALLNER, G. Metabolism and function of coenzyme Q.
Biochim Biophys Acta, v.1660, p. 171-199, 2004
WEBER, C. Dietary intake and absorption of coenzyme Q. In: Kagan VE, Quinn PJ:
Coenzyme Q: Molecular mechanisms in health and disease. CRC Press, pp 209215, 2001.
WEBER, C.; BYSTED, A.; HOLMER, G.. The coenzym Q10 content of the average
danish diet. Int J Vit Nutr Res 1997; 67:1223-9.
WILLIAMS, K.D.; MANEKA, J.D.; ABDELHAMEED, M.; HALL, R.L.;, PALMERTE
KITANO, M.; HIDAKA, T. 52-week oral gavage chronic toxicity study with ubiquinone
in rats with a 4-week recovery. Journal of Agriculture Food and Chemistry, v. 47, p.
3756-3763, 1999.
WITTWER F., HEUER G., CONTRERAS P.A., BÖHMWALD T.M. Valores
bioquímicos clínicos sanguíneos de vacas cursando con decúbito en el sur de Chile.
Archivos de Medicina Veterinaria, v. 15, p. 83-88, 1993.
ZALL, D. M.; FISHER, D.; GARNER, M. Q. Photometric determination of chlorides in
water. Anal Chem, Washington, v.28, n.11, p.1665-1668, 1956.
51