COLESTEROL Liquid Plus
FINALIDADE
Kit para determinação quantitativa do Colesterol no soro.
Método CHOD / PAP
SIGNIFICADO CLÍNICO
O colesterol é um esteróide amplamente distribuído pelo organismo podendo aumentar ou diminuir de quantidade no sangue
em circunstâncias diversas.
A determinação de colesterol no sangue é importante no diagnóstico e classificação das lipemias. Outras condições, tais como
doenças hepáticas e da tireóide influenciam nos níveis de colesterol.
Valores aumentados de colesterol são encontrados na nefrose,
hipotireoidismo, doenças colestáticas do fígado e nas hiperlipoproteinemias dos tipos I, IIa, IIb, III e V.
Níveis de colesterol sérico diminuídos são encontrados no hipertireoidismo, doenças consumptivas e desnutrição crônica.
O nível de colesterol sérico juntamente com a hipertensão e o
fumo constituem o grande fator de risco de aterosclerose e
de DCI.
PRINCÍPIO DO ENSAIO
O colesterol livre da amostra, como também o proveniente da
hidrólise dos ésteres por ação do colesterol estearase, é oxidado
a delta-4-colestenona por ação do colesterol oxidase.
O peróxido de hidrogênio produzido, na presença de peroxidase, 4-minofenazona (4-AF) e fenol, forma uma quinonimina com
um pico de absorção a 505 nm. A intensidade de cor é proporcional à concentração de colesterol na amostra.
REAGENTES FORNECIDOS
Código 750240: 2 x 200 ml – Prontos para uso
Reagente: 2 garrafas com 200 ml de solução cada uma.
Padrão: um frasco com 1 ml de Padrão.
Código 752100: 2 x 500 ml – Prontos para uso
Reagente: 2 garrafas com 500 ml de solução cada uma.
Padrão: um frasco com 1 ml de Padrão.
Código 770150: 1 x 500 ml – Prontos para uso
Reagente: 1 garrafa com 500 ml de solução cada uma.
Padrão: um frasco com 1 ml de Padrão.
Composição dos reagentes fornecidos
Reagente:
Fenol 6.0 mmol/l
4AF 0.25 mmol/l
Colesterol oxidase >200 U/l
Colesterol estearase > 350 U/l
Peroxidase >1500 U/l
Tris 200 mmol/l, pH= 7.2
Conservação e estabilidade dos reagentes
Conservar em refrigerador (2-8ºC), não congelar.
Os reagentes são estáveis até a data de vencimento marcada
no rótulo.
Cuidados e precauções
O kit destina-se somente para uso diagnóstico in vitro.
As boas práticas laboratoriais indicam:
- Retirar o reagente da geladeira somente quando em uso, reintegrando-o imediatamente após o uso.
- Transferir o reagente para outro recipiente, como os empre-
gados em automação. Não devolver o excedente para o frasco
original.
- Usar somente pipetas limpas e bem enxaguadas com água
destilada.
- Tampar os reagentes imediatamente após o uso.
- Não expor o reagente à luz ou vapores.
- A caixa e os frascos neste produto não podem ser reutilizados.
Eles devem ser descartados como resíduos perigosos de acordo
com a legislação vigente. O pessoal que manipulá-los deverá
ser devidamente treinado para a manipulação e eliminação pela
instituição ou pelo laboratório que utilizá-los.
Sinais de instabilidade ou deterioração dos reagentes
O reagente pode ter cor rósea, o que não é indício de deterioração. No entanto, o branco do reagente não deve ser maior
que 0.150 D.O. em 505 nm.
MATERIAIS NECESSÁRIOS, MAS NÃO FORNECIDOS
1. Espectrofotômetro ou fotocolorímetro capaz de medir absorbância de 5490-540 nm.
2. Cubetas de leitura.
3. Pipetas e micropipetas para os volumes citados em
PROCEDIMENTO DO TESTE.
4. Cronômetro.
5. Banho-maria a 37 ºC.
COLETA E OBTENÇÃO DA AMOSTRA
Amostra:
- Soro ou plasma.
- A amostra deve ser recolhida após jejum de 12-14 horas.
- O plasma deve ser obtido com EDTA ou heparina.
Condições de conservação da amostra:
- Refrigerador (2-8ºC): estável por 2 dias.
- Freezer (-20ºC): estável por 30 dias.
Substâncias interferentes:
A hemólise moderada e a bilirrubinemia não interferem. A hiperlipemia pode causar turbidez. As amostras turvas devem ser
processadas, diluídas e o resultado deve ser multiplicado por
esta diluição.
Eliminação:
Todos os espécimes devem ser considerados como potencialmente infecciosos, assim como o material em contato com eles.
As boas práticas laboratoriais e regulamentos locais deverão ser
observados para prosseguir com sua eliminação. Um método sugerido é a autoclave a 121ºC durante 1 hora. Os líquidos devem
ser eliminados em hipoclorito de sódio 5%, deixando a inativação proceder por 1 hora.
PROCEDIMENTO DO TESTE
Traga o reagente e os espécimes para a temperatura ambiente
(15-30 ºC) antes do uso.
Rotule 3 cubetas B (Branco), P (Padrão) e A (Amostra) e proceda
como a seguir:
B
P
A
----
----
10 µl
Padrão
----
10 µl
----
Reagente
1ml
1 ml
1 ml
Amostra
Misture e incube por 5 minutos a 37ºC. Leia a absorbância em 505
nm (490-530 nm) acertando o zero com o branco. A cor é estável por
60 minutos.
CÁLCULOS
Absorbância da Amostra
--------------------------------- x 200 = mg/dl colesterol
Absorbância do Padrão
INFORMAÇÃO AOS CLIENTES
Garantia
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO
Linearidade: a reação é linear até 500 mg/dl.
Sensibilidade: aproximadamente 0.66 mg/dl a 505 nm
Precisão: (n=10)
Intraensayo
MEDIA mg/dl
159.6
290.3
386.7
DS mg/dl
± 2.5
± 2.9
± 0.8
C.V. %
± 1.5
± 1.0
± 0.2
GT Laboratório S.R.L. fabrica e comercializa reagentes para diagnóstico in vitro sob
Boas Práticas de Fabricação (Good Manufacturing Practices) certificadas de acordo
com O.M.S./W.H.O. Technical Report Series 908/2003, C.E.E. Res. 91/536 e A.N.M.A.T.
Disp. Nº 3623/1997, ISO 9001:2008 e ISO 13485:2003. Os termos e as condições da
qualidade são absolutos dentro das responsabilidades que correspondem a
GT Laboratório S.R.L.
Fabricado pela GT Laboratorio S.R.L.
Necochea 3274 – Rosário - Argentina
Uso profissional exclusivo. Autorizado pela A.N.M.A.T. PM 121-42.
Diretor técnico: Daniel Gazzola, Bioquímico
INFORMAÇÕES DE CONTATO
E-mail: [email protected]
Site: www.gtlab.com.ar
Código de revisão:75090000/14
Interensayo
MEDIA mg/dl
164.2
289.6
388,0
DS mg/dl
± 3.9
± 2.0
± 1.1
C.V. %
± 2.3
± 0.9
± 0.3
LIMITAÇOES DO TESTE
Contaminação com metais pesados, detergentes e outros inibidores das enzimas, bem como agentes redutores são causa
de baixo desenvolvimento de cor. Oxidantes desenvolvem cor
róseo espúrio. Alguns instrumentos automáticos poderão exigir
calibradores especiais; nestes casos, não utilize o Padrão fornecido.
CONTROLE DE QUALIDADE
As boas práticas laboratoriais recomendam processar diariamente, amostras normais e patológicas. Recomenda-se o uso
de Soro Controle Qualiset GT Lab Nível 1 e 2 (códigos 602.105
e 602.205).
Cada laboratório deverá desenvolver o seu próprio controle interno de qualidade e ações corretivas se exceder os limites de
tolerância aceitáveis.
VALORES DE REFERÊNCIA
Desejável: < 200 mg/dl.
Aceitável: 200-239 mg/dl (Risco moderado).
NOTAS:
1- Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados
desde que se mantenham as proporções indicadas em PROCEDIMENTO DO TESTE.
2- Aplicações para analisadores automáticas estão disponíveis a
pedido do cliente e no site: www.gtlab.com.ar
3- Em equipamentos automáticos é aconselhável calibrar o teste
com calibradores de matriz protéica. Recomenda-se o uso dos
Calibradores Qualiset GT Lab Nível 1 e 2 (Códigos 601105 e
601205).
APRESENTAÇÃO
Código 750240: 2 X 200 ml
Código 752100: 2 X 500 ml
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1- Allain CC.: Clin.Chem. 20:470 (1974)
2- Trinder, P.: Ann. Clin. Biochem. 6,24 (1969).