HemosIL™
ESPAÑOL - Revisión Prospecto 12/2008
Homocysteine - 0020007800
Aplicación
Inmunoensayo automatizado para la determinación cuantitativa de L-homocisteína total
en plasma humano citratado por turbidimetría de partículas de látex en los Sistemas de
Coagulación de IL.
NOTA: Las muestras de pacientes que siguen una terapia de drogas relacionadas con
la S-adenosil-metionina pueden mostrar niveles falsamente elevados de
homocisteína. Los pacientes que estén tomando metotrexano, carbamacepina,
fenitoína, óxido nitroso, anticonvulsivos, o triacetato de 6-azauridina, pueden
tener niveles elevados de homocisteína debido a su efecto en la vía
metabólica. Referirse a la sección Limitaciones/interferencias de este folleto.
Principio
La Homocisteína (Hcy) es un aminoácido sulfurado originado en la demetilación de la
metionina. La Hcy circula en el plasma mayoritariamente en su forma oxidada ligada a
proteínas plasmáticas (principalmente albúmina).1,2 También se encuentran pequeñas
cantidades de homocisteína reducida y de su dímero disulfurado (homocistina). La
suma de todos los tipos de Hcy del plasma (libre y combinada a proteínas) representa
la Hcy total (tHcy).
La Hcy puede ser metabolizada a cisteína o metionina por la acción de varios enzimas,
cofactores o sustratos. Un incremento en el nivel de Hcy en sangre
(hiperhomocisteinemia) puede ocurrir cuando dichas reacciones no están equilibradas.2
Calibrator y otros reactivos: Mezclar suavemente por inversión del vial. El calibrador
y resto de reactivos están listos para su uso.
Nota: Los reactivos no son intercambiables entre lotes.
Los viales que no hayan sido abiertos y se hayan conservado a 2-8°C son estables
hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
136
4,3 - 11,1 µmol/L
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
136
4,0 - 11,2 µmol/L
ACL Futura/ACL Futura Advance
136
4,1 - 10,6 µmol/L
Otros reactivos - Los reactivos abiertos son estables: 2 meses a 2-8°C en el vial
original o 8 horas a 15°C en el vial destapado y colocado en los Sistemas de
Coagulación de IL. No congelar.
Un estudio adicional del rango de normalidad fue realizado en un lugar de Estados
Unidos con 125 muestras de individuos aparentemente sanos:
Para una óptima estabilidad sacar los reactivos de los instrumentos y conservarlos a
2-8°C en sus viales originales bien tapados.
Nota: La concentración de Hcy en el plasma de individuos sanos puede variar con la
edad, sexo, área geográfica y factores genéticos. La literatura científica reporta que los
hombres tienen niveles más elevados de Hcy que las mujeres, y que las mujeres
post-menopáusicas tienen niveles más elevados de Hcy que las pre-menopáusicas.
Durante el embarazo se observa una disminución considerable de los valores de Hcy.
En países con programas de fortificación de ácido fólico se ha observado una reducción
en los niveles de Hcy.1
Método de ensayo
Para instrucciones completas del procedimiento del ensayo referirse al Manual de
Aplicaciones de IL del instrumento correspondiente.
Recolección y preparación de las muestras
Después de la centrifugación de los glóbulos rojos la tHcy es estable en el plasma
hasta 3 días a 2-8°C o 3 meses a -20°C. Las muestras pueden congelarsedescongelarse hasta 3 veces sin ningún efecto en los resultados del ensayo. Después
de congelarse, las muestras deben mezclarse para asegurar su homogeneización.1
Etapa de reducción
Reductor
R1-SS-Hcy
Hcy
(R1 es cualquier residuo-SH)
Etapa enzimática
SAHH
Hcy + Adenosina
SAH
Etapa de aglutinación competitiva
Conjugado
Aglutinación
Látex Anti-SAH +
SAH
Inhibición de la aglutinación
El grado de aglutinación es inversamente proporcional a la concentración de tHcy en la
muestra y se determina midiendo el descenso de la luz transmitida causado por los
agregados.
Nota: Después de la recolección de la sangre y antes de la separación del plasma se
produce un aumento de la tHcy que depende del tiempo y temperatura de conservación
y que puede prevenirse por centrifugación a 1000 x g durante 10 minutos y separación
de los hematíes, antes de 1 hora, o colocando las muestras de sangre en un baño de
hielo hasta su centrifugación (hasta 8 horas).
Reactivos adicionales y plasmas de control
a-SAH Latex Reagent (Núm. Cat. 0020007850): 2 viales x 2 mL de una
suspensión liofilizada de partículas de látex de poliestireno sensibilizadas con un
anticuerpo monoclonal anti-S-adenosil-L-homocisteína (SAH) en un tampón
conteniendo albúmina de suero bovino y 0,02% de BronidoxTM como
conservante.
C
Calibrator (Núm. Cat. 0020007860): 2 viales x 1 mL de S-adenosil-Lhomocisteína (SAH) en PBS (solución tampón fosfato) con conservante.
MEDIDAS DE PRECAUCIÓN Y ADVERTENCIAS:
El tampón, conjugado y calibrador contienen azida sódica (< 0,1%), que puede
reaccionar con las tuberías metálicas dando lugar a azidas altamente explosivas.
Tomar las precauciones adecuadas para su desecho.
Evitar el contacto con los ojos y la piel (S 24/25). No tirar los residuos por el desagüe
(S 29), disponer de este material y su envase en un recipiente adecuado (S 29/35).
Usar indumentaria protectora adecuada, guantes y protección ocular/facial (S 36/37/39).
Este producto es para diagnóstico in vitro.
Preparación
a-SAH Latex Reagent: Disolver el contenido de un vial con 2 mL de agua tipo II CLSI
(anteriormente NCCLS) o equivalente.9 Tapar el vial y homogeneizar suavemente.
Asegurarse de la completa disolución del producto. Mantener el reactivo entre 15-25°C
durante 30 minutos. Mezclar suavemente por inversión del vial antes de su uso. No
agitar.
El estudio de precisión intraserie y total (serie a serie y día a día) fue realizado en
diferentes series. 20
4,8
Controles de Homocisteína
Núm. Cat. 0020007900
Control Hcy nivel II
22,4
1,5
3,5
Cleaning solution (Solución de limpieza)
Núm. Cat. 0009931700
Plasma Hcy
8,1
2,9
5,5
ACL TOP
Control de calidad
ACL ELITE/ELITE PRO/
8/9/10000
Media (µmol/L)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Para realizar un programa completo de control de calidad, se recomienda el uso de dos
niveles de control. Los controles de homocisteína se han designado a este efecto.11
Cada laboratorio debe establecer su propia media y desviación estándar, y debe
realizar un programa de control de calidad para monitorizar sus resultados. Los
controles deben ser analizados como mínimo una vez por cada turno de 8 horas de
acuerdo con la normativa Buenas Prácticas del Laboratorio. Consultar la publicación de
Westgard et al para la identificación y resolución de situaciones anormales del control
de calidad.12
Control Hcy nivel I
12,3
2,3
5,1
Control Hcy nivel II
22,8
4,3
6,2
Plasma Hcy
8,4
2,6
5,9
Media (µmol/L)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Control Hcy nivel I
10,5
3,5
6,0
Trazabilidad de los calibradores y controles
Control Hcy nivel II
21,1
2,6
3,5
El valor del calibrador de Hcy indicado en el folleto ha sido obtenido a través de
múltiples determinaciones en los Sistemas de Coagulación de IL usando lotes
específicos de reactivos y un Calibrador Estándar interno de Hcy.
Plasma Hcy
7,9
3,5
5,6
r
Método de referencia
Como no hay Estándar Internacional de homocisteína, el Calibrador Estándar interno
ha sido preparado diluyendo en un tampón exclusivo una solución concentrada de Sadenosil-L-homocisteína (SAH) en tampón fosfato.13,14
ACL TOP
0,9780
0,2943
0,989
HemosIL Hcy en ACL 9000
ACL Futura/
ACL Advance
0,9459
0,0149
0,989
HemosIL Hcy en ACL 9000
ACL ELITE/ELITE
PRO/8/9/10000
0,8292
0,3505
0,992
Hcy Polarización
Fluorescencia (FPIA)*
Consultar el Manual del Usuario para información adicional.
LR
Precisión:
CV% (Total)
B
Conjugate (Núm. Cat. 0020007840): 2 viales x 2,5 mL de solución de conjugado
en PBS (solución tampón fosfato) con estabilizante y conservante.
Características técnicas
2,0
Los resultados de Hcy se informan en µmol/L.
Cn
Estos resultados se han obtenido utilizando un lote específico de reactivo. Debido a las
muchas variables que pueden afectar a los resultados, cada laboratorio debe establecer
su propio rango de normalidad.
CV% (Intraserie)
El kit de Homocisteína consiste en:
Enzyme (Núm. Cat. 0020007830): 2 viales x 2 mL de solución de S-adenosil-Lhomocisteína hidrolasa recombinante (SAHH) en tampón fosfato con
estabilizante y conservante.
Los rangos han sido calculados como recomienda la Federación Internacional de
Química Clínica (IFCC).19
11,4
Resultados
E
Los valores de Hcy en plasma citrato son aproximadamente un 14,6% inferiores que los
obtenidos en plasma EDTA o heparina debido a la dilución con el anticoagulante.18
Media (µmol/L)
Composición
Reductant (Núm. Cat. 0020007820): 2 viales x 2 mL de adenosina y solución de
Tris (2-carboxietil) fosfina (TCEP) en tampón fosfato con estabilizante y
conservante.
3,5 – 9,3 µmol/L
125
Control Hcy nivel I
Los valores de homocisteína (Hcy) pueden ayudar en el diagnóstico y tratamiento de
los pacientes sospechosos de tener hiperhomocisteinemia o homocistinuria.
Rd
ACL TOP
Los siguientes reactivos y controles no se suministran con el kit y deben pedirse por
separado.
El calibrador de Hcy, cuando se utiliza para calibrar el ensayo de Hcy en los Sistemas
de Coagulación de IL de acuerdo con las recomendaciones establecidas, demuestra
conmutabilidad con los resultados de las muestras de los pacientes.
Buffer (Núm. Cat. 0020007810): 2 viales x 9 mL de PBS (solución tampón
fosfato) con conservante.
Hcy total
ACL TOP
Los niveles de Hcy en el plasma de un paciente pueden medirse automáticamente en
los Sistemas de Coagulación de IL en 3 etapas:
3. Reacción de aglutinación competitiva del látex anti-SAH, con el SAH y el conjugado.
N
Muestras de 136 donantes aparentemente sanos de un banco de sangre en España
fueron usadas para determinar los siguientes rangos de normalidad:
a-SAH Latex Reagent - Estabilidad una vez reconstituido: 2 meses a 2-8°C en el vial
original o 8 horas a 15°C en el vial destapado y colocado en los Sistemas de
coagulación de IL. No congelar.
Recoger nueve partes de sangre recién extraída por punción venosa sobre una parte
de anticoagulante citrato trisódico.10
2. Conversión enzimática de la Hcy libre a S-adenosil-L-homocisteína (SAH) por acción
de la SAH hidrolasa (SAHH) en presencia de un exceso de adenosina.
Se ha realizado un estudio del rango de normalidad utilizando el kit de Hcy.
Sistema
Conservación y estabilidad de los reactivos
Concentraciones muy elevadas de Hcy se encuentran en pacientes con homocistinuria,
una rara alteración genética que causa retraso mental, arterioesclerosis precoz y
tromboembolismo arterial y venoso.1,3 Se conocen otros defectos genéticos menos
severos que también producen niveles moderadamente elevados de Hcy. 1 La
hiperhomocisteinemia, incluso moderada, es un factor de riesgo establecido de
tromboembolismo arterial o venoso.4 Niveles de Hcy elevados también pueden
presentarse secundariamente debido a otras enfermedades como la anemia y/o
astenia,5,6 y la enfermedad renal crónica.7,8
1. Reducción de la Hcy presente en el plasma, como mezcla de formas disulfuradas y
ligada a proteínas, a Hcy libre.
Valores esperados
ACL Futura/
ACL Advance
Correlación:
Sistema
Pendiente Intersección
*Nota: Estudio realizado con pares de plasma citrato sódico (HemosIL Hcy) y plasma
EDTA (método de comparación).
Los resultados del análisis deben ser usados conjuntamente con el resto de
información, incluyendo el contexto clínico.
La precisión y los datos de correlación se han obtenido usando lotes específicos de
reactivos y de controles.
Límite de detección:
Limitaciones/interferencias
Sistema
Las muestras de pacientes que han recibido preparados de anticuerpos monoclonales
con fines diagnósticos o terapéuticos pueden contener anticuerpos anti-ratón (HAMA).
Los anticuerpos anti-ratón presentes en muestras de suero o plasma pueden interferir
en los inmunoensayos que utilicen anticuerpos monoclonales de ratón.15,16 Este tipo de
muestras no deben emplearse en el ensayo de Hcy.
Establecido por comprobación de 20 replicados del Buffer del kit en varios
instrumentos/plataformas utilizando 2 lotes distintos de reactivos. El valor más alto de
los obtenidos (valor promedio ± 3DS) fue considerado el límite de detección:
Concentraciones de hemoglobina hasta 490 mg/dL, de bilirrubina hasta 18 mg/dL, de
triglicéridos hasta 1325 mg/dL, de factor reumatoide hasta 480 UI/mL y de fluoruro
sódico no afectan a los resultados de Hcy en ninguno de los sistemas de coagulación
de IL.
2,4 µmol/L
Sistemas de Coagulación de IL
Sensibilidad funcional:
Establecida por comprobación de diluciones del calibrador del kit y de una muestra baja
de Hcy. Cada dilución se comprobó 5 veces en varios instrumentos/plataformas
utilizando 2 lotes distintos de reactivos. El valor de Hcy más bajo de los reportados con
un error y un CV inferior al 20% fue considerado la sensibilidad funcional:
Nota importante: Las siguientes drogas: metotrexano, carbamacepina, fenitoína,
óxido nitroso y triacetato de 6-azauridina pueden dar elevados niveles de Hcy.17
El mecanismo de acción afecta a diferentes partes de la vía metabólica de la Hcy.
Valor más bajo de Hcy con un error y un CV <20%:
Especificidad analítica
Sistema
No se ha encontrado reacción cruzada con ninguno de los siguientes compuestos cuya
estructura química o uso concurrente puede interferir en el ensayo de Hcy:
Sistemas de Coagulación de IL
Compuesto
S-adenosil-L-metionina
L-cisteína
Adenosina
L-cistationina
L-metionina
DL-homocisteína-tiolactona
Glutation
Concentración analizada Reacción cruzada
0,5 mmol/L
5,0 mmol/L
1,0 mmol/L
2,0 mmol/L
0,4 mmol/L
0,1 mmol/L
100 mmol/L
2,6%
0,0%
0,2%
0,1%
-0,2%
4,7%
0,0%
4,5 µmol/L
Linealidad:
Test Regular
Test Rerun
4,5 - 30 µmol/L
9 - 60 µmol/L
El ensayo no presenta efecto de prozona hasta 600 µmol/L en ninguno de los Sistemas
de Coagulación de IL.
Los instrumentos que tienen activada la capacidad “Auto-Rerun”, realizan una dilución
1:2 automática de las muestras y corrigen el resultado final por el factor de dilución,
expandiendo el rango del test hasta 60 µmol/L. Si el resultado obtenido todavía es
superior al rango válido expandido, es decir las muestras se informan con resultados
por encima de 60 µmol/L, éstas deben diluirse manualmente 1:10 con el Hcy Buffer
(50 µL de muestra + 450 µL de Hcy Buffer) y reanalizarse en el ensayo normal. Los
resultados obtenidos deben multiplicarse por 10, para corregir el factor de dilución.
Nota: Valor del calibrador de Hcy. Referirse a la última página, después de la
Bibliografía, para el valor asignado.
ITALIANO - Revisione dell'inserto 12/2008
Homocysteine - 0020007800
Utilizzo
Composizione
Preparazione dei campioni
Test immunologico automatico per la determinazione quantitativa della L-omocisteina
totale nel plasma umano citratato sui sistemi di coagulazione ACL.
NOTA: I pazienti che sono in terapia farmacologia con S-Adenosil-Metionina possono
presentare valori falsamente elevati di omocisteina. I pazienti ai quali sono
somministrati metotrexato, carbamazepina, fenitoina, ossido nitrico,
anticonvulsivi, o triacetato di 6-azuridina possono presentare valori elevati di
omocisteina a causa degli effetti di questi farmaci sull’emostasi. Fare
riferimento alla sezione Limitazioni/sostanze interferenti di questo inserto.
Il kit Hcy è composto da:
Aggiungere a nove parti di sangue fresco venoso una parte di trisodio citrato.10
Nota: Dopo il prelievo e prima della separazione dalle emazie si ha un aumento del
livello di omocisteina totale nel plasma, in quanto è tempo e temperatura dipendente.
Tale incremento dei livelli plasmatici di Hcy può essere evitato, centrifugando il
campione in esame a 1000 x g per 10 minuti entro un’ora dal prelievo e separando il
plasma, oppure mantenendolo in bagno di acqua e ghiaccio prima della centrifugazione
(fino a un massimo di 8 ore). Dopo separazione dalle emazie la tHcy è stabile nel
plasma per almeno 3 giorni a 2-8°C o per 3 mesi a -20°C.
B
Buffer (Nr. Cat. 0020007810): 2 flaconi da 9 mL di soluzione tampone fosfato
(PBS) con aggiunta di conservante.
Rd
Reductant (Nr. Cat. 0020007820): 2 flaconi da 2 mL di soluzione contenente
adenosina e Tris (2-carbossi-etil) fosfina (TCEP) in tampone Bis-Tris con
aggiunta di conservante.
E
Enzyme (Nr. Cat. 0020007830): 2 flaconi da 2 mL di soluzione contenente Sadenosil-L-omocisteina idrolasi (SAHH) ricombinante in tampone fosfato con
aggiunta di stabilizzante e conservante.
Cn
Conjugate (Nr. Cat. 0020007840): 2 flaconi da 2,5 mL di soluzione di coniugato
in soluzione tampone fosfato (PBS) con aggiunta di stabilizzante e conservante.
LR
a-SAH Latex Reagent (Nr. Cat. 0020007850): 2 flaconi da 2 mL di sospensione
liofilizzata di particelle di lattice di polistirene legata con un anticorpo monoclonale
diretto contro la S-adenosil-L-omocisteina (SAH) in una soluzione contenete
albumina bovina serica e 0,02% di BronidoxTM come conservante.
I seguenti reattivi non sono forniti insieme al kit e devono essere ordinati
separatamente.
Controlli per Omocisteina
Nr. Cat. 0020007900
C
Calibrator (Nr. Cat. 0020007860): 2 flaconi da 1 mL di S-adenosil-L-omocisteina
(SAH) in soluzione tampone fosfato (PBS) con aggiunta di conservante.
Soluzione detergente
Nr. Cat. 0009831700
Principio del metodo
L’omocisteina (Hcy) è un amminoacido solforato derivante dalla demetilazione
intracellulare della metionina. L’ Hcy circola nel plasma prevalentemente nella sua
forma ossidata legata alle proteine del plasma (principalmente l’albumina). 1,2 Possono
essere presenti anche piccole quantità di omocisteina ridotta e di omocisteina-disulfide
(o omocistina). L’omocisteina totale rappresenta la somma di tutte le forme plasmatiche
di Hcy (sia libere che legate alle proteine).
L’Hcy può essere poi metabolizzata a cisteina o a metionina attraverso l’azione di
diversi enzimi, cofattori e substrati. Quando queste vie metaboliche sono alterate, si
verifica un aumento della concentrazione di Hcy nel sangue (iperomocisteinemia).2
Elevate concentrazioni di Hcy si riscontrano nei soggetti affetti da omocistinuria, una
rara patologia genetica, che causa ritardo dello sviluppo intellettuale, arteriosclerosi
precoce, e tromboembolia arteriosa e venosa.1,3 Si riscontrano anche altre anomalie
genetiche meno gravi che portano a concentrazioni di Hcy moderatamente elevate.1
L’iperomocisteinemia, anche se moderata, è considerata un fattore di rischio di eventi
tromboembolici venosi e/o arteriosi.4 Un aumento dei livelli di Hcy può anche essere
secondario ad altre patologie, come anemia e/o astenia,5,6 e nefropatie croniche.7,8
I livelli di Hcy sono misurati automaticamente sui sistemi per la coagulazione ACL in tre
fasi:
1. Riduzione dell’omocisteina, presente nel plasma in esame sotto forma di bisolfuri
misti o legata alle proteine, a Hcy libera.
2. Conversione enzimatica della Hcy libera in S-adenosil-L-omocisteina (SAH) a opera
dell’SAH idrolasi in presenza di un eccesso di adenosina.
3. Reazione di agglutinazione competitiva tra anticorpi anti-SAH e SAH coniugata.
Fase di riduzione
Agente riducente
R1-SS-Hcy
Hcy
R1 = qualsiasi residuo di tiolo
Fase enzimatica
ATTENZIONE:
Il tampone, il coniugato e il calibratore contengono meno del 0,1% di sodio azide che
potrebbe formare azidi esplosive a contatto con tubature metalliche. Prendere le dovute
precauzioni per lo smaltimento.
Evitare il contatto con gli occhi e con la pelle (S 24/25). Non gettare i residui nelle
fognature; non disfarsi del prodotto e del recipiente se non con le dovute precauzioni
(S 29/35). Usare indumenti protettivi e guanti adatti e proteggersi gli occhi/la faccia
(S 36/37/39).
Questo prodotto è per uso diagnostico in vitro.
Preparazione
a-SAH Latex Reagent: Sciogliere il contenuto del flacone con 2 mL di acqua di Tipo II
secondo il documento CLSI (ex NCCLS) o equivalente.9 Chiudere con il tappo e
miscelare delicatamente fino alla completa ricostituzione del materiale. Mantenere il
reagente a 15-25°C per 30 minuti e miscelarlo nuovamente prima dell’uso. Non agitare.
SAHH
Coniugato
SAH
Il valore del Calibratore Hcy indicato è stato assegnato eseguendo repliche successive
sui sistemi di coagulazione ACL con l’impiego di un lotto specifico di reagente rispetto a
uno Standard Interno (Aziendale) di Calibratore Hcy. Poiché non è attualmente
disponibile uno Standard Internazionale per l’omocisteina, lo Standard Interno è stato
preparato diluendo con un tampone dedicato una soluzione concentrata di S-adenosil-Lomocisteina (SAH) in tampone fosfato.13,14
Risultati
I risultati del test Hcy sono riportati in µmol/L. Riferirsi al Manuale dell’Operatore per
ulteriori informazioni. I risultati del test Hcy dovrebbero essere utilizzati insieme ad altre
informazioni, compreso il quadro clinico, per una diagnosi completa.
Al termine dei cicli lavorativi si consiglia di conservare i reagenti a 2-8°C nel flacone
originale per una migliore stabilità.
Inibizione agglutinazione
Metodo
Il grado di agglutinazione è inversamente proporzionale alla concentrazione di Hcy nel
campione ed è determinato misurando la diminuzione della luce trasmessa causata
dagli aggregati. La determinazione dell’omocisteina (Hcy) può facilitare la diagnosi e la
terapia dei pazienti affetti da sospetta iperomocisteinemia o omocistinuria.
Calibratori e materiali di controllo
Conservazione e stabilità dei reagenti
Agglutinazione
Lattice Anti-SAH +
Per un completo programma di controllo di qualità si raccomanda l’uso di due livelli di
controllo.11 I Controlli per Omocisteina Livello 1 e Livello 2 sono indicati per questo
programma. Ogni laboratorio deve definire i valori medi e le deviazioni standard per i
controlli utilizzati nel proprio programma di controllo di qualità. I controlli dovrebbero
essere analizzati almeno una volta ogni 8 ore. Riferirsi al Manuale dell’Operatore per
ulteriori informazioni. Per i casi particolari consultare all’articolo di Westgard et al.12
NOTA: Lotti diversi di reagenti non sono tra loro intercambiabili.
Altri reagenti - I reagenti aperti sono stabili per 2 mesi a 2-8°C nel flacone originale o 8
ore a 15°C su sistemi di coagulazione ACL. Non congelare.
Fase di agglutinazione competitiva
Controllo di qualità
Il Calibratore Hcy, quando viene utilizzato per calibrare il test Hcy sui sistemi di
coagulazione ACL secondo le raccomandazioni IL, soddisfa il requisito di commutabilità
con i plasmi dei pazienti.
a-SAH Latex Reagent - Stabilità dopo la ricostituzione: 2 mesi a 2-8°C, 8 ore a 15°C
sui sistemi di coagulazione ACL nel flacone originale. Non congelare.
SAH
Reagenti ausiliari e plasmi di controllo
Altri reagenti e Calibratore: Capovolgere tutti i reagenti e il calibratore prima dell’uso.
I reagenti e il calibratore sono poi pronti all’uso.
I reagenti sigillati sono stabili a 2-8°C fino alla data di scadenza stampata sull’etichetta.
Hcy + adenosina
I campioni possono essere congelati e scongelati per un massimo di tre volte senza
provocare alterazioni significative dei risultati del test. Dopo scongelamento agitare i
campioni di plasma per garantirne l’omogeneità. 1
Per le metodiche e le procedure di lavoro riferirsi alle applicazioni dedicate degli
strumenti IL.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
Limitazioni/sostanze interferenti
In campioni prelevati da pazienti a cui siano stati somministrati, a scopo diagnostico o
terapeutico, preparati di anticorpi monoclonali di topo è possibile rilevare la presenza di
anticorpi umani anti-topo (Human anti-mouse antibody - HAMA). Gli HAMA presenti nei
campioni di plasma possono interferire negli immunodosaggi che utilizzano gli anticorpi
monoclonali anti-topo.15,16 Tali campioni non devono essere utilizzati nel dosaggio della
Hcy.
I risultati del test Hcy sui sistemi di coagulazione ACL non sono influenzati in presenza
di livelli di emoglobina fino a 490 mg/dL, bilirubina fino a 18 mg/dL, trigliceridi fino a
1325 mg/dL, fattore reumatoide fino a 480 UI/mL e fluoruro di sodio fino a 4,0 g/L.
3800-3797 R2 12/2008
HemosIL™
Attenzione: I seguenti farmaci: metotrexato, carbamazepina, fenitoina, ossido
nitrico e triacetato di 6-azuridina possono provocare un aumento dei livelli di
Hcy17 in quanto il loro meccanismo d’azione influenza, a diversi livelli, il ciclo
metabolico dell’omocisteina.
Specificità analitica
E’ stata verificata ed esclusa una possibile reattività crociata per i seguenti composti la
cui struttura chimica o il cui impiego concomitante potrebbero interferire con il test Hcy:
Composto
Concentrazione
Reattività crociata %
S-Adenosil-L-metionina
L-Cisteina
Adenosina
L-Cistationina
L-Metionina
DL-Omocisteina-tiolattone
Glutanione
0,5 mmol/L
5 mmol/L
1 mmol/L
2 mmol/L
0,4 mmol/L
0,1 mmol/L
100 mmol/L
2,4 %
0,0 %
0,2 %
0,1 %
- 0,2 %
3,7 %
0,0 %
Valori attesi
Utilizzando il kit Hcy è stato determinato il seguente intervallo di normalità.
Sistema
Nr
tHcy
In Spagna, analizzando campioni di 136 soggetti apparentemente sani, donatori, si
sono ottenuti i seguenti risultati:
ACL TOP
136
4,3 - 11,1 µmol/L
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
136
4,0 - 11,2 µmol/L
ACL Futura/ACL Advance
136
4,1 - 10,6 µmol/L
In un altro studio sull’intervallo di normalità effettuato negli Stati Uniti, analizzando
campioni di 126 soggetti apparentemente sani, si sono ottenuti i seguenti risultati:
ACL TOP
125
3,5 - 9,3 µmol/L
Nota: Nei soggetti sani, la concentrazione plasmatica di Hcy può variare in base a età,
sesso, area geografica e fattori genetici. La letteratura scientifica riporta che i valori di
riferimento sono più alti negli uomini rispetto alle donne, mentre le donne che hanno
superato la menopausa hanno valori di Hcy più alti ripetto a quelle in età
pre-menopausa. Durante la gravidanza è stata osservata una riduzione notevole dei
valori di Hcy. Nei paesi che attuano programmi di rafforzamento dell’acido folico si
osservano concentrazioni di Hcy più basse.1
I valori di Hcy ottenuti con plasma citratato sono approssimativamente più bassi del
14,6% rispetto a quelli degli stessi campioni anticoagulati con EDTA o eparina a causa
della diluizione con l’anticoagulante.18
Gli intervalli di riferimento sono stati calcolati seguendo le raccomandazioni
dell’International Federation of Clinical Chemistry (IFCC).19 Tali risultati sono stati ottenuti
utilizzando un lotto specifico di reagente. A causa delle numerose variabili che possono
influenzare i risultati, ogni laboratorio dovrebbe stabilire il proprio intervallo di normalità.
Limite di rilevabilità:
Sistema
Prestazioni
Sensibilità Funzionale:
Precisione:
La precisione, nella serie e totale (tra ciclo e ciclo e tra giorno e giorno), è stata
verificata eseguendo numerosi test.20
ACL TOP
Media (µmol/L)
CV% (nella serie)
CV% (Totale)
Controllo Hcy Livello 1
Controllo Hcy Livello 2
Campione Hcy
ACL ELITE/ELITE PRO/
8/9/10000
11,4
22,4
8,1
Media (µmol/L)
2,0
1,5
2,9
CV% (nella serie)
4,8
3,5
5,5
CV% (Totale)
Controllo Hcy Livello 1
Controllo Hcy Livello 2
Campione Hcy
ACL Futura/ACL Advance
12,3
22,8
8,4
Media (µmol/L)
2,3
4,3
2,6
CV% (nella serie)
5,1
6,2
5,9
CV% (Totale)
3,5
2,6
3,5
6,0
3,5
5,6
Controllo Hcy Livello 1
Controllo Hcy Livello 2
Campione Hcy
Correlazione:
Sistema
Pendenza
10,5
21,1
7,9
Intercetta
r
Metodo di riferimento
ACL TOP
0.9780
0.2943
0.989
HemosIL Hcy su ACL 9000
ACL Futura
0.9459
0.0149
0.989
HemosIL Hcy su ACL 9000
ACL ELITE/ELITE
0.8292
0.3503
0.992
Hcy in immunofluorescenza
PRO /8/9/10000
di polarizzazione*
*NOTA: Questo studio ha confrontato campioni di plasmi di pazienti raccolti in provette
con sodio citrato (HemosIL Hcy) ed EDTA (metodo di riferimento).
I risultati dei test di precisione e di correlazione sono stati ottenuti usando uno specifico
lotto di reagenti e controlli.
Imunoensaio em latex automatizado e melhorado para a determinação quantitativa da
L-homocisteína total no plasma humano citratado nos sistemas de coagulação da IL.
NOTA: As amostras dos doentes que estão medicados com fármacos com S-adenosilmetionina podem apresentar níveis falsamente elevados de homocisteína. Os
doentes que estão a tomar metotrexato, carbamazepina, fenitoína, óxido
nitroso, anticonvulsivantes, ou 6-azuridina triacetato, podem ter níveis elevados
de homocisteína devido ao seu efeito na via de actuação. Consulte a secção
de Limitações/Substâncias interferentes neste folheto informativo.
Resumo e príncipio
A homocisteína é um aminoácido sulfídrico (Hcy) derivado da desmetilação intracelular
da metionina. A Hcy circula no plasma, maioritariamente na forma oxidada ligada a
proteínas plasmáticas (principalmente albumina).1,2 Também estão presentes,
quantidades menores de homocisteína reduzida e de dímeros dissulfidicos Hcy
(homocistina). A adição de todas as espécies de Hcy encontradas no plasma (livre e
ligada ao plasma) representam a Hcy total (tHcy).
A Hcy pode ser metabolizada a cisteína ou a metionina, através da acção de várias
enzimas, cofactores e substratos. Pode ocorrer um aumento do nível sanguíneo de Hcy
(hiperhomocisteinemia) quando ocorrem problemas nestas reacções.2
Em indíviduos com homocistinúria, encontram-se níveis gravemente elevados de Hcy.
Trata-se de uma doença genética rara que provoca atraso mental, arterioesclerose
precoce e tromboembolismo venoso e arterial.1,3 Outros erros genéticos menos graves
podem causar, níveis moderadamente elevados de Hcy .1 A hiperhomocisteinemia,
mesmo que moderada, é um factor de risco bem estabelecido para o tromboembolismo
venoso/arterial.4 O aumento dos níveis de Hcy também podem surgir secundariamente
a alguma doença, tal como anemia e/ou astenia 5,6 e doença renal crónica.7,8
Os níveis de Hcy no plasma dos doentes são medidos automaticamente nos sistemas
de coagulação da IL, em três fases:
1. Redução dos dissulfidos e formas de Hcy ligadas às proteínas misturados,
presentes nas amostras de plasma, a Hcy livre.
2. Conversão enzimática da Hcy livre a S-adenosil-L-homocisteína (SAH) pela
hidrolase SAH (SAHH) na presença de adenosina em excesso.
3. Reacção de aglutinação competitiva entre anti-SAH e conjugado/SAH.
Passo de Redução
Agente redutor
R1-SS-Hcy
Hcy
(R1 é qualquer residuo tiol)
SAH
Passo de aglutinação competitiva
Conjugado
Aglutinaçäo
Anti-SAH Latex +
SAH
Inibiçäo da aglutinaçäo
O grau de aglutinação é inversamente proporcional à concentração de tHcy na amostra
e é determinado pela medição do decréscimo da luz transmitida, causada pelos
agregados.
Os valores de homocisteína (Hcy) podem apoiar no diagnóstico e tratamento de
doentes com suspeita de hiperhomocisteinemia ou homocistinúria.
Composição
O kit Hcy consiste em:
B
Buffer (Cat. No. 0020007810): 2 frascos x 9 mL de PBS (solução de tampão
fosfato) com conservante.
Rd
Reductant (Cat. No. 0020007820): 2 frascos x 2 mL de adenosina e solução Tris
(2-carboxietil) fosfina (TCEP) em tampão Bis-Tris com conservante.
E
Enzyme (Cat. No. 0020007830): 2 frascos x 2 mL de solução S-adenosil-Lhomcisteína-hidrolase recombinante (SAHH) em tampão fosfato com
estabilizante e conservante.
Cn
Conjugate (Cat. No. 0020007840): 2 frascos x 2.5 mL de solução de conjugado
em PBS (solução de tampão fosfato) com estabilizante e conservante.
LR
a-SAH Latex Reagent (Cat. No. 0020007850): 2 frascos x 2 mL de uma
suspensão liofilizada de partículas de latex de poliestireno revestidas com um
anticorpo monoclonal anti S-adenosil-L-homocisteína (SAH) em tampão com
albumina sérica bovina e Bronidox(tm)0.02% como conservante.
C
Conservação e estabilidade dos reagentes
Os reagentes selados são estáveis até ao fim do prazo de validade impresso no frasco,
desde que conservados entre 2-8°C.
a-SAH Latex Reagent - Estabilidade pós-reconstituição: 2 meses entre 2-8°C no frasco
original, 8 horas a 15°C instalado nos Sistemas de coagulação da IL. Não congele.
Outros Reagentes - Os reagentes abertos são estáveis: 2 meses entre 2-8°C no frasco
original, 8 horas a 15°C instalado nos Sistemas de coagulação da IL. Não congele.
Para optimização da estabilidade remova os reagentes do sistema e conserve-os entre
2-8°C no frasco original.
Procedimentos instrumento/teste
Consulte as aplicações adequadas do instrumento IL para conhecer os procedimentos
completos do ensaio.
Colheita e preparação das amostras
Nove partes de sangue venoso recente são adicionados a uma parte de citrato
trissódico.10
Nota: Após a colheita de sangue e antes da separação do plasma, há um aumento
dependente do tempo e da temperatura na tHcy, que pode ser evitado, quer por
centrifugação a 1000 x g durante 10 minutos no espaço de uma 1 hora e removendo o
plasma das células ou mantendo as amostras de sangue em gelo até centrifugá-las
(até 8 horas).
Após a remoção dos eritrócitos, a tHcy é estável no plasma durante pelo menos, 3 dias
entre 2-8°C ou 3 meses a -20°C. As amostras podem ser congeladas-descongeladas
até 3 vezes, sem qualquer efeito significativo sobre os resultados do ensaio. Após
descongelar as amostras, deverá misturá-las para assegurar a homgeneidade.1
Reagentes adicionais e plasmas de controlo
Os seguintes itens não são fornecidos com o kit e têm de ser adquiridos
separadamente.
Américas, Região do Pacífico e Europa
Cat. No.
Homocysteine Controls
0020007900
Cleaning solution
0009831700
Calibrator (Cat. No. 0020007860): 2 frascos x 1 mL de S-adenosil-L-homcisteína
(SAH) em PBS (solução de tampão fosfato) com conservante.
PRECAUÇÕES E AVISOS:
Rastreabilidade dos calibradores e materiais de controlo
Preparação
a-SAH Latex Reagent: Dissolva o conteúdo de cada frasco em 2 mL de água CLSI tipo
II (anteriormente NCCLS) ou equivalente.9 volte a colocar a tampa e rode suavemente.
Assegure-se de que o produto foi completamente reconstituído. Mantenha o reagente
entre 15-25°C durante 30 minutos e inverta-o cuidadosamente para misturar, antes de
utilizar. Não agite com força.
Valore di Hcy misurabile con inaccuratezza e CV < 20%: 4.5 µmol/L
Linearità:
Sistema
Regular Test
Rerun Test
Sistemi di coagulazione ACL
4,5 - 30 µmol/L
9 - 60 µmol/L
L’effetto “prozona” è assente fino a 600 µmol/L sui sistemi di coagulazione ACL.
Con risultati superiori ai 30 µmol/L i campioni in esame devono essere diluiti 1:2 (1+1)
con il Tampone Hcy (es. 200 µL di campione + 200 µL di Tampone Hcy) e rianalizzati.
Gli strumenti con diluizione e ripetizione automatica dei campioni eseguono
automaticamente queste operazioni e la relativa correzione del risultato, estendendo
l’intervallo di linearità fino a 60 µmol/L.
Se si ottiene un risultato al di fuori del limite alto dell’intervallo di linearità (ad esempio
per valori di Hcy superiori a 60 µmol/L), il campione deve essere diluito manualmente
1:10 con il Tampone Hcy (es. 50 µL di campione + 450 µL di Tampone Hcy) e
rianalizzati con la metodica di base. I risultati devono essere poi moltiplicati per il
relativo fattore di diluizione.
Nota: Valore del Calibratore Hcy: consultare l’ultima pagina dopo la bibliografia per il
valore di riferimento.
Sistema
N
tHcy
136 dadores aparentemente saudáveis do banco de sangue espanhol foram utilizados
para determinar os seguintes intervalos normais:
ACL TOP
136
4.3 - 11.1 µmol/L
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
136
4.0 - 11.2 µmol/L
ACL Futura/ACL Advance
136
4.1 - 10.6 µmol/L
Foi realizado um estudo adicional de intervalo normal nos EUA utilizando 126 amostras
de indiv’duos aparentemente saudáveis:
ACL TOP
125
3.5 – 9.3 µmol/L
Nota: A concentração de Hcy no plasma de indivíduos saudáveis pode variar com a
idade, sexo, área geográfica e factores genéticos. A literatura científica atribui aos
homens valores mais elevados do que nas mulheres, e as mulheres pós-menopáusicas
têm valores de Hcy mais elevados do que, as pré-menopáusicas. Durante a gravidez,
observa-se um decréscimo considerável dos valores de Hcy. Os valores de Hcy são
consideravelmente menores. Em países com programas de suplementação com ácido
fólico, podem observar-se níveis reduzidos de Hcy.1
O plasma citratado tem resultados mais baixos, em cerca de 14,6%, em relação ao
plasma heparinizado ou com EDTA, devido à diluição com o anticoagulante.18
Os intervalos foram calculados como recomendado pela International Federation of
Clinical Chemistry (IFCC).19
Estes resultados foram obtidos utilizando um lote específico de reagente. Devido a
muitas variáveis que podem afectar os resultados, cada laboratório deverá estabelecer
o seu intervalo normal.
Características de desempenho
Precisão:
A precisão intra-análise e total (de análise para análise e de dia para dia) foi avaliada
ao longo de múltiplas análises.20
ACL TOP
Média (µmol/L)
CV% (intra-análise) CV% (Total)
Hcy Control Level 1
Hcy Control Level 2
Amostra de plasma Hcy
11.4
22.4
8.1
ACL ELITE/ELITE PRO/
8/9/10000
Média (µmol/L)
Hcy Control Level 1
Hcy Control Level 2
Amostra de plasma Hcy
12.3
22.8
8.4
Média (µmol/L)
Hcy Control Level 1
Hcy Control Level 2
Amostra de plasma Hcy
2.0
1.5
2.9
4.8
3.5
5.5
CV% (intra-análise) CV% (Total)
2.3
4.3
2.6
5.1
6.2
5.9
CV% (intra-análise) CV% (Total)
10.5
21.1
7.9
3.5
2.6
3.5
6.0
3.5
5.6
Correlação:
Sistema
Declive
Intercepção
r
Método comparativo
ACL TOP
0.9780
0.2943
0.989
HemosIL Hcy no ACL 9000
ACL Futura/
0.9459
0.0149
0.989
HemosIL Hcy no ACL 9000
O valor notificado do Hcy Calibrator foi determinado após várias análises nos Sistemas
d e coagulação da IL utilizando lotes de reagentes específicos e contra um lote padrão
de Hcy Calibrator interno.
Como actualmente não está disponível um Padrão internacional de Hcy, o lote padrão
interno de Hcy Calibrator foi preparado pela diluição com um tampão dedicado, uma
solução stock concentrada de S-adenosil-L-homcisteína (SAH) em tampão fosfato.13,14
O Hcy Calibrator, quando é utilizado para calibrar o ensaio Hcy nos Sistemas de
coagulação da IL, de acordo com as recomendações da IL, demonstra comutabilidade
com as amostras dos doentes.
ACL ELITE/ELITE
PRO /8/9/10000
0.8292
0.3503
0.992
Fluorescência Hcy
Imunoensaio de olarização*
Resultados
Estabelecido pela análise de 20 replicados do kit Buffer em múltiplas plataformas de
instrumentos utilizando 2 lotes de reagentes diferentes. O valor obtido mais elevado
(média + 3DP) foi determinado como sendo o limite de detecção:
Os resultados da Hcy são dados em µmol/L.
Consulte o Manual do Operador do instrumento para obter informação adicional.
Para formar um diagnóstico, os resultados do ensaio devem ser utilizados com outra
informação, incluindo o contexto clínico.
Limitações/substâncias interferentes
As amostras de doentes que receberam preparações de anticorpo monoclonal de
ratinho para diagnóstico ou terapêutica, podem conter anticorpos humanos anti-ratinho
(HAMA). Os HAMA estão presentes nas amostras de plasma ou soro podem interferir
nos imunoensaios que utilizam anticorpos monoclonais de ratinho.15,16 Estas amostras
não devem ser analisadas com o ensaio Hcy.
Os resultados da Hcy nos sistemas de coagulação da IL não são afectados pela
hemoglobina até 490 mg/dL, bilirubina até 18 mg/dL, triglicéridos 1325 mg/dL, factor
reumatóide até 480 IUI/mL e fluoreto de sódio até 4.0 g/L.
Nota importante : os fármacos seguintes- metotrexato, carbamazepina, fenitoína,
óxido nítrico e triacetato de 6-azauridina, podem causar níveis elevados de Hcy.17
o mecanismo de acção afecta partes diferentes da via metabólica da Hcy.
Especificidade analítica
O Buffer, o Conjugate e o Calibrator contêm azida sódica em concentração inferior a
0.1%, que pode formar azidas explosivas em contacto com a canalização de metal.
Utilize os procedimentos adequados de eliminação. Evitar o contacto com a pele e os
olhos (S 24/25). Não deitar os resíduos no esgoto; não eliminar o produto e o seu
recipiente sem tomar as precauções de segurança devidas (S 29/35). Usar vestuário de
protecção, luvas e equipamento protector para os olhos/face adequados. (S 36/37/39).
Este produto destina-se a uso em diagnóstico in vitro.
Sono stati analizzati diverse diluizioni del calibratore contenuto nel kit e campioni con
basso valore di Hyc. Ogni diluizione e campione è stato analizzato per 5 volte su
strumenti differenti, utilizzando 2 lotti di reagenti diversi. La sensibilità analitica è stata
calcolata riportando il valore di inaccuratezza più alto, di Hcy, con CV < 20%:
ACL Futura/ACL Advance
São recomendados dois níveis de controlo para um programa completo de controlo de
qualidade.11 Os Homocysteine Controls foram concebidos para este programa. Cada
laboratório deve estabelecer a sua média e o seu desvio padrão e deve também
estabelecer um programa de controlo de qualidade para monitorizar as análises do
laboratório. Os controlos devem ser analisados, pelo menos uma vez, em cada turno de
8 horas, de acordo com as boas práticas de laboratório. Consulte Westgard et al para
identificação e resolução de situações fora do controlo.12
SAHH
Hcy + Adenosina
Outros Reagentes e Calibrador: Inverta para misturar, antes de utilizar. Os reagentes/
calibrador estão prontos a utilizar.
NOTA: Os reagentes não são intercambiáveis entre lotes.
Controlo de qualidade
Passo Enzimático
2,4 µmol/L
Sistemi di coagulazione ACL
PORTUGUÊS - Revisão do folheto 12/2008
Homocysteine - 0020007800
Utilização prevista
Sono stati analizzati 20 replicati del tampone contenuto nel del kit su strumenti
differenti, utilizzando 2 lotti di reagenti diversi. Il limite di rilevabilità è stato calcolato sul
valore più alto (media + 3 DS):
Não foi encontrada reactividade cruzada com os compostos seguintes, cuja estrutura
química ou uso simultâneo possa interferir com ensaio da Hcy:
Composto
S-Adenosil-L-metionina
L-Cisteina
Adenosina
L-Cistationina
L-Metionina
DL-Homcisteína-tiolactona
Glutationa
concentração analisada
% de reactividade cruzada
0.5 mmol/L
5 mmol/L
1 mmol/L
2 mmol/L
0.4 mmol/L
0.1 mmol/L
100 mmol/L
2.4%
0.0%
0.2%
0.1%
-0.2%
3.7%
0.0%
*NOTA: Este estudo utilizou um emparelhamento de citrato de sódio (IL Hcy) versus
EDTA (método comparativo) Amostras de plasma de doentes
A precisão e os resultados de correlação foram obtidos utilizando lotes específicos de
reagentes e controlos.
Limite de detecção:
Sistema
2.4 µmol/L
Sistemas de Coagulação da IL
Sensibilidade Funcional:
Estabelecido pela análise de diluições do kit de calibração e uma amostra Hcy baixa.
Cada diluição foi analisada 5 vezes em múltiplas plataformas de instrumentos utilizando
2 lotes de reagentes diferentes. O valor de Hcy mais elevado notificado com
inexactidão CV <20% foi determinado como a sensibilidade funcional:
O valor mensurável mais baixo de Hcy com inexactidão e CV < 20%: 4.5 µmol/L
Linearidade:
Sistema
Teste regular
Teste de re-análise
Sistemas de Coagulação da IL
4.5 - 30 µmol/L
9 - 60 µmol/L
O ensaio não demonstra efeito de prózona até 600 µmol/L nos sistemas de coagulação
da IL.
Os instrumentos com capacidade de “Auto Rerun” executam a diluição de 1:2 e a
correcção automática dos resultados, alarga o intervalo do teste para 60 µmol/L. Se o
resultado continuar a exceder o intervalo alargado, ou seja, amostras com resultados
acima de 60 µmol/L, então a amostra deve ser diluída manualmente de 1:10 com Hcy
Buffer (50 µL de amostra + 450 µL de Hcy Buffer) e reanalisada no ensaio padrão. O
resultado deve ser multiplicado por 10 para corrigir a diluição.
Nota: Valor do Hcy Calibrator- consulte a última página, a seguir à bibliografia para
saber qual o valor atribuído.
Valores esperados
Realizou-se um estudo de intervalo normal com o kit Homocysteine.
Bibliography / Literatur / Bibliografía / Bibliographie / Bibliografia /Bibliografia / Litteratur / Litteraturförteckning /
1. Refsum H, Smith AD, Ueland PM, Nexo E, Clarke R, McPartlin J, Johnston C, Engbaek
F, Schneede J, McPartlin C, Scott JM. Facts and recommendations about total
homocysteine determinations: an expert opinion. Clin Chem 2004; 50 (1):3-32
2. Finkelstein JD. Methionine metabolism in mammals. J Nutr Biochem 1990; 1:228-237.
3. Mudd SH, et al. Disorder of Transsulfuration. In: C.R. Scriver, A.L. Beaudet, W.S. Sly,
et al., eds. The metabolic basis of inherited disease New York: McGraw-Hill, 1995:
1297-1327.
4. Boushey, Carol J, et al. A Quantitative Assessment of Plasma Homocysteine as a Risk
Factor for Vascular Disease, JAMA, October 4, 1995-Vol 274, No. 13: 1049-1057.
5. Allen, Robert H, et al. Diagnosis of Cobalamin Deficiency I: Usefulness of Serum
Methylmalonic Acid and Total Homocysteine Concentrations, American Journal of
Hematology 1990; 34:90-98.
6. Stabler, Sally P, et.al. The Use of Homocysteine and Other Metabolites in the Specific
Diagnosis of Vitamin B-12 Deficiency J Nutr 126: 1266S-1272S, 1996.
7. Guttormsen AB, Svarstad E, Ueland PM, Refsum H. Elimination of homocysteine from
plasma in subjects with end-stage renal failure. Irish J Med Sci 1995; 164 (Suppl. 15): 8.
8. Bostom AG, Lathrop L. Hyperhomocysteinemia in end-stage renal disease (ESDR):
Prevalence, etiology, and potential relationship to arteriosclerotic outcomes. Kidney Int
1997; 52:10-20.
9. Clinical Laboratory Standards Institute/NCCLS. Preparation and Testing of Reagent
Water in the Clinical Laboratory, Third Edition, CLSI/NCCLS Document C3-A3; Vol. 17
No. 18.
10. Clinical Laboratory Standards Institute/NCCLS. Collection, Transport, and Processing
of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagulation Assays, Fourth Edition,
CLSI/NCCLS Document H21-A4; Vol. 23 No. 35.
11. Zucker S, Cathey MH, West B. Preparation of Quality Control Specimens for Coagulation,
Am J Clin Pathol 1970; 53: 924-927.
12. Westgard JO, Barry PL. Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and
Productivity of Analytical Processes, AACC Press 1986.
13. Refsum H, Ueland PM, Svardal M. Fully Automated Fluorescence Assay for Determining
Total Homocysteine in Plasma. Clin Chem 1989; 35:1921-27.
14. Fiskerstrand T, Refsum H, Kvalheim G, Ueland PM. Homocysteine and other thiols in
plasma and urine: Automated determination and sample stability. Clin Chem 1993; 39:
263-271.
15. Primus FJ, Kelly EA, Hansen HJ, et al. “Sandwich”- Type Immunoassay of
Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving Murine Monoclonal Antibodies for
Diagnosis and Therapy. J Clin Chem 1988; 34: 261-4.
16. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM et al. Human Anti-Murine Immunoglobulin Responses
in Patients receiving Monoclonal Antibody Therapy. Cancer Res 1985; 45: 879-85.
17. Davis RE. Clinical chemistry of vitamin B12. Adv Clin Chem 1985; 24: 163-216.
18. Compatibility of the Abbott IMx Homocystein Assay with Citrate-Anticoagulated Plasma
and Stability of Homocysteine in Citrat Whole Blood. Clin Chem 2001; 47: 1704-1707.
19. Solberg HE. Approved Recommendation (1987) on the Theory of Reference Values.
Part 5. Statistical Treatment of Collected Reference Values. Determination of Reference
Limits. J Clin Chem Clin Biochem 1987; 25: 645-656
20. Clinical Laboratory Standards/NCCLS. Evaluation of Precision Performance of Clinical
Devices- Second Edition; Tentative Guideline. CLSI/NCCLS Document EP5-T2.
Villanova, PA: CLSI/NCCLS, March 1992.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
EP and US Patents
EP 623174/US 5631127/US 5827645, US 5958717/US6063581
ACL, ACL Futura and ACL TOP are trademarks of Instrumentation Laboratory.
©2006 Instrumentation Laboratory
Issued December 2008
REFERENCE VALUE
ACL TOP
C
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance
µmol/L
3800-3797 R2 12/2008
Homocysteine
Printed Insert Sheet:
Revision:
Issued:
C.O.:
0020007800
3800-3797
R2
December 2008
412126
LANGUAGES
ESPAÑOL
ITALIAN
PORTUGUESE
TECHNICAL SPEC'S
PAPER:
SIZE:
PRINT:
PRINT COLOR:
White paper, 50-60 g/m2 weight.
DIN A3 (297 x 420 mm.).
Front/Back.
Front - Top band Green Pantone 382, all remaining type in black.
Back - All type in black.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
3800-3797 R2 12/2008