UNIVERSIDADE COMUNITÁRIA DA REGIÃO DE CHAPECÓ
Área:
Curso:
Matriz:
Componente Curricular:
Turma:
Professor(a):
Área de Ciências da Saúde
1016 - FARMÁCIA
278 - FARMÁCIA - VESPERTINO E NOTURNO
4030035 - BROMATOLOGIA E NUTRIÇÃO EM FARMÁCIA
A
Período: 6
Carga horária: 72 h/a
Ano/Semestre: 2015 / 2
851423 - ANA PAULA ZANATTA
10946 - Raquel Zeni Ternus
Determinação de gordura ou extrato etéreo
Os lipídios são compostos orgânicos altamente energéticos, contêm ácidos graxos essenciais ao
organismo e atuam como transportadores das vitaminas lipossolúveis. Os lipídios são substâncias
insolúveis em água, solúveis em solventes orgânicos, tais como éter, clorofórmio e acetona, dentre outros.
Estes são classificados em: simples (óleos e gorduras), compostos (fosfolipídios, ceras etc.) e derivados
(ácidos graxos, esteróis). Os óleos e gorduras diferem entre si apenas na sua aparência física, sendo que à
temperatura ambiente os óleos apresentam aspecto líquido e as gorduras, pastoso ou sólido (IAL, 2010).
A determinação de lipídios em alimentos é feita, na maioria dos casos, pela extração com solventes,
por exemplo, éter. Quase sempre se torna mais simples fazer uma extração contínua em aparelho do tipo
Soxhlet, seguida da remoção por evaporação ou destilação do solvente empregado. O resíduo obtido não é
constituído unicamente por lipídios, mas por todos os compostos que, nas condições da determinação,
possam ser extraídos pelo solvente. Estes conjuntos incluem os ácidos graxos livres, ésteres de ácidos
graxos, as lecitinas, as ceras, os carotenóides, a clorofila e outros pigmentos, além dos esteróis, fosfatídios,
vitaminas A e D, óleos essenciais etc., mas em quantidades relativamente pequenas, que não chegam a
representar uma diferença significativa na determinação. Nos produtos em que estas concentrações se
tornam maiores, a determinação terá a denominação mais adequada de extrato etéreo. Uma extração
completa se torna difícil em produtos contendo alta proporção de açúcares, de proteínas e umidade. Em
certos casos, podem ser aplicados outros métodos na determinação dos lipídios, tais como: a extração com
solvente a frio (método de Bligh-Dyer ou Folch), hidrólise ácida (método de Gerber ou Stoldt- Weibull) ou
alcalina (método Rose-Gotllieb-Mojonnier) (IAL, 2010).
A determinação de gordura, geralmente se baseia nas propriedades dos lipídeos. Estes compostos
apresentam propriedades físicas que refletem seu caráter hidrofóbico, sendo solúveis em solventes
orgânicos. Os solventes orgânicos são, então, usados na determinação de gordura por extração.
No caso de alimentos, nem sempre é possível extrair diretamente a gordura. Se a amostra for úmida
é necessário proceder uma secagem pois a água impede a penetração total do solvente. Quando os
lipídeos se encontram ligados a proteínas ou açúcares, faz-se necessário uma hidrólise prévia, como no
método de Gerber. Em alguns casos, em vez de combinação de hidrólise e extração, é suficiente tratar a
amostra com uma mistura de clorofórmio e metanol (Método de Bligh-Dyer).
Para amostras que podem ser extraídas diretamente são usados equipamentos que realizam a
extração por solvente como o aparelho de Soxhlet (extração intermitente). O extrato obtido diretamente sem
tratamento prévio, pode conter, além da gordura, quantidades pequenas de ceras, resinas, esteróis e
carotenóides. No entanto, a escolha do método para extração de lipídeos depende do material a ser
analisado e da natureza das subsequentes análises a serem feitas neste extrato lipídico. O método de Bligh
& Dyer pode ser usado para alimentos secos ou para produtos com altos teores de água (como peixes,
vegetais verdes, por ex.). Devido ao uso de solventes polares, há extração de todas as classes de lipídeos.
Como os lipídeos são extraídos sem aquecimento, o extrato pode ser utilizado para avaliar o grau de
deterioração dos lipídeos através do índice de peróxidos e da porcentagem de ácidos graxos livres. O teor
de carotenóides, de vitamina E, de esteróis e a composição de ácidos graxos também podem ser
determinadas no mesmo extrato.
MÉTODO DE BLIGH-DYER
Equipamentos e materiais
Material e Vidraria uso comum
Papel filtro
Isofilme
1 espátula para pesagem do sulfato de sódio anidro – bancada ao lado da balança
1 Pipeta graduada de 10 mL para clorofórmico
1 pipeta graduada de 20 mL para metanol
1 pipeta de 10 mL para sulfato de sódio 1,5%
3 pipetadores
OBS: os quatro últimos itens na capela
Material e Vidraria para cada grupo
1 gral e pistilo
1 béquer de 100 mL
1 béquer de 50 mL
1 pipeta volumétrica de 50 mL
1 pipetador
1 proveta de 10 mL
1 proveta de 15 mL
Reagentes
metanol
clorofórmio
1 funil de vidro
1 funil de decantação
1 tubo de ensaio de 30 mL
1 suporte de tubo de ensaio
1 agitador magnético
1 chapa de agitação
1 espátula
solução aquosa de sulfato de sódio 1,5%
sulfato de sódio anidro
Equipamentos
estufa a 100°C
dessecador
balança analítica
Procedimento
Para produtos com teores de gordura acima de 20% (leite integral em pó, amendoim, sementes,
etc...) pesar entre 2,0 e 2,5 g; e para produtos com porcentagem menor que 20% pesar entre 3,0 e 3,5g. É
essencial que as amostras estejam completamente moídas.
Transferir a amostra pesada para o béquer de 100 mL e adicionar exatamente:
- 10 mL de clorofórmio,
- 20 mL de metanol e
- 8 mL de água destilada.
Tampar hermeticamente e colocar os béqueres num agitador rotativo por 30 min.
Em seguida adicionar exatamente:
- 10 mL de clorofórmio e
- 10 mL da solução de sulfato de sódio 1,5%.
Tampar e agitar por mais 2 minutos. Deixar separar as camadas de forma natural em funil de
decantação ou centrifugar a 1000 rpm por 2 minutos para acelerar a separação.
Descartar a camada superior e retirar cerca de 15 mL da camada inferior (clorofórmio) e colocar
num tubo de 30 mL. Adicionar aproximadamente 1,0 g de sulfato de sódio anidro, tampar e agitar para
remover traços de água que são arrastados na pipetagem da camada inferior. Filtrar rapidamente num funil
pequeno com papel de filtro. A solução obtida deve ser límpida.
Medir exatamente (pipeta volumétrica) 5 mL do filtrado e despejar em béquer de 50 mL previamente
pesado. Colocar o béquer numa estufa a 100 °C até evaporar o solvente (15-20 minutos). Resfriar em
dessecador e pesar em balança analítica.
Onde:
A= peso do béquer + resíduo, em g
B= peso do béquer, em g
C= volume de clorofórmio adicionado, em mL
P= peso da amostra, em g