Genética Molecular
em Análises Clinicas
A Replicação
Prof.Doutor José Cabeda
Genética
A Replicação






Detalhes químicos (Animação)
Múltiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
A Replicação






Detalhes Químicos
Múltiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
Múltiplos pontos de replicação

Ori C (E.Coli)
 repetições de 9 mers e 15 mers em cerca de 240bp
 estas repetições são locais de ligação da proteína DnaA
Origem do SV40 contem cerca de 65bp

ARS (“autonomous replicating sequence”- levedura)

Elemento A (15 bp) e Elementos B1,B2,B3 (Locais de
ligação da ORC
 sequência rica em AT

A Replicação





Multiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
A Replicação





Multiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
A Replicação





Multiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki (Animação)
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
Animação
A Replicação





Multiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
As telomerases
Permitem que em cada divisão a cadeia
“lagging” não fique mais curta depois da
remoção do primer de RNA do fragmento
de Okasaki
 São transcriptases reversas “modificadas”
 produzem DNA a partir de um molde de
RNA a elas ligado
 Produzem DNA repetitivo

Animação
A Replicação





Multiplos pontos de replicação por cromossoma
A replicação ocorre nas duas cadeias do DNA
 A replicação é contínua na cadeia “leading”
 A replicação é descontínua na cadeia “lagging”
Fragmentos de okasaki
Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase
A correcção de erros incorporada na polimerase
Trabalho concertado de um
complexo sistema enzimático
animação
Genética Molecular
em Análises Clinicas
A Transcrição
Prof.Doutor José Cabeda
Genética
A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa

O RNA no cerne da Genética





Transcrição
 produção de mRNA
 A regulação génica depende da semivida do mRNA
Primers de RNA na replicação
O tRNA intervem na tradução
O rRNA intervem na tradução
Alguns vírus só utilizam o RNA
A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa

Polimerases do RNA


Eucariotas:
 Tipo I – rRNA (50-70%)
 Tipo II – hnRNA (20-40%; mRNA)
 Tipo III – restantes espécies de RNA
(10%;tRNA, snRNA)
 Mitocondrias
 Cloroplastos
Formadas por várias subunidades com funções
específicas
A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa

Promotores
Tata Box
Promotor
da Pol I
Promotor da Pol III
A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa

Pol é posicionada
por TBP
Iniciação da transcrição
animação
Abertura da hélice
Transcrição (animação)



Fase de iniciação
 Reconhecimento do DNA e posicionamento
 Abertura da hélice
 Incorporação do primeiro nucleótido
Fase de elongação
 Migração da zona de DNA aberto
 Elongação do hnRNA
Fase de terminação
Transcrição

Processamento do RNA (animação)
 Adição do CAP
 Poliadenilação
 splicing
mRNA
animação
A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa

A Transcrição
O RNA como espécie central na genética
 Tipos de polimerases do RNA. Cofactores
 Promotores
 Mecanismo da Transcrição
 Papel da instabilidade do RNA.
 Transcrição reversa
