MÉTODO DE CALIBRAÇÃO
Profa. Dra. Aline Rodrigues Soares
e-mail: [email protected]
CURVA DE CALIBRAÇÃO OU CURVA ANALÍTICA
 Uma curva de calibração mostra a resposta de um método analítico para
quantidades conhecidas de constituinte.
 Soluções contendo concentrações conhecidas de constituinte são
chamadas de solução padrão.
 Soluções contendo todos os reagentes e solventes usados na análise, sem
adição do constituinte que se deseja analisar, são chamadas de solução
em branco. O branco mede a resposta instrumental do procedimento
analítico para impurezas ou espécies interferentes nos reagentes.
Curva de Calibração Externa
1ª Etapa: Soluções padrão: Prepara-se soluções de concentrações
conhecidas e diferentes do constituinte em análise. Geralmente estas
soluções são obtidas por conveniente diluição de uma solução padrão
estoque.
2ª Etapa: Medidas de sinal analítico: Medidas do sinal instrumental para as
soluções padrão e branco (5 níveis de concentração no mínimo).
3ª Etapa: Construção do gráfico do sinal obtido x concentração do analito.
Exemplo: Determinação do teor de ferro em uma amostra de refresco
artificial, utilizando o método de calibração externa.
Preparar todas as soluções-padrão à partir de uma solução estoque 10
mg/L
Exemplo: Determinação do teor de ferro em uma amostra de refresco
artificial, utilizando o método de calibração externa.
Concentração
Fe (mg/L)
Absorbância
(nm)
Absorbância
(nm)
Absorbância
(nm)
Absorbância
média
Absorbância
média
corigida
Branco (0)
0,002
0,003
0,005
0,003
0
0,50
0,022
0,023
0,023
0,023
0,020
1,00
0,044
0,046
0,047
0,046
0,043
2,00
0,086
0,073
0,090
0,083
0,08
3,00
0,131
0,132
0,133
0,132
0,129
4,00
0,172
0,177
0,177
0,175
0,172
0.2
0.18
0.16
Absorbância
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0
0.5
1
1.5
2
2.5
-0.02
Concentração (mg/L)
3
3.5
4
4.5
E aí?
Como determinar a concentração
de Fe na amostra?
0.2
0.18
0.16
Absorbância
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0
0.5
1
1.5
2
2.5
-0.02
Concentração (mg/L)
3
3.5
4
4.5
 Determinar a melhor reta que passa pelos pontos experimentais
A equação de uma linha reta é: y = ax + b
y = variável dependente
x = variável independente
a = inclinação da reta
b = intersecção no eixo dos y
b
a
Calcula-se:
A inclinação: a = Qxy/Qxx
O intercepto: b = y – ax
Onde:
Qxx   ( xi  x ) 2   xi2 
Qxy
( xi ) 2
N
x y

  ( xi  x )( yi  y )   x y 
i
i
i
N
i
Coeficiente de correlação – utilizado para estimar o ajuste dos pontos
experimentais à linha que é utilizada para estabelecer a relação linear.
[(x  x )( y  y )]
r
{[ ( x  x ) ][ ( y  y ) ]
i
i
i
2
2 1/ 2
i
i
i
i
-1 ≤ r  +1
14
Resposta instrumental
12
10
8
R=1
6
4
2
0
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
Concentração
Em química analítica normalmente se trabalha com valores de r > que 0,99 (em módulo)
Determinação do teor de ferro em uma amostra de refresco artificial:
Absorbância (nm)
1- 0,092
2- 0,095
3- 0,094
Qual a concentração de Fe nessa amostra?
Determinação da curva de
calibração no excel
Exemplo: Determinação do teor de ferro em uma amostra de refresco
artificial, utilizando o método de calibração externa.
Concentração
Fe (mg/L)
Absorbância
(nm)
Absorbância
(nm)
Absorbância
(nm)
Absorbância
média
Absorbância
média
corigida
Branco (0)
0,002
0,003
0,005
0,003
0
0,50
0,022
0,023
0,023
0,023
0,020
1,00
0,044
0,046
0,047
0,046
0,043
2,00
0,086
0,073
0,090
0,083
0,08
3,00
0,131
0,132
0,133
0,132
0,129
4,00
0,172
0,177
0,177
0,175
0,172
0.2
0.18
0.16
Absorbância
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
y = 0,043x - 0,0013
R² = 0,9987
0.04
0.02
0
0
0.5
1
1.5
2
2.5
-0.02
Concentração (mg/L)
3
3.5
4
4.5