“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de independencia”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
ARTÍCULO:
“Expresión del gen prosistemina de tomate en papa (solanum tuberosum)”
DOCENTE:
BLGO. Hebert Hernan Soto Gonzales
CURSO:
Biotecnología
ESTUDIANTE:
Lidia Marleni Coaquera Zanga
CODIGO:
2018205015
CICLO: VII
ILO-MOQUEGUA-PERU
Fecha de entrega: 27/06/2021
EXPRESIÓN DEL GEN PROSISTEMINA DE TOMATE
EN PAPA (Solanum tuberosum)
Autores
Araujo-Burgos y Raó R.
OBJETIVO
INTRODUCCIÓN
Es ampliar
Los
El conocimiento sobre el
rol biotecnológico de la
prosistemina
mecanismos de defensa de la
planta
pueden ser de
ubicado en la región
terminal C del
precursor
tipo constitutivo
y está
están
último codifica para
sistemina
siempre presentes en la planta
de los cuales el
además
contiene 11
exones
gen prosistemina
el
estudio de la expresión del gen
prosistemina
Los
genotipos transgénicos de papa PR
presentan la inserción del ADNc
de
de
tomate en papa y del mismo gen
al cual se le ha borrado la porción
que codifica para la sistemina.
prosistemina de tomate y los
genotipos transgénicos PRx
contienen el mismo gen incompleto.
Sobre todo, la
función de este
precursor
para
incrementar la resistencia
endógena
de la
planta frente al estrés
biótico
en una
especie diferente al
tomate.
MATERIALES Y MÉTODOS
los
Transformación genética de
Agrobacterium
Una
Control de células de
Agrobacterium
el
vectores binarios PR y PRx están
en células de E.C. cepa DH5α.
colonia solitaria de las
células cultivadas en LB
agar con antibióticos
ADN, control de electroforesis
en gel de agarosa al 1%.
ADN plasmídico, control con
electroforesis en gel de agarosa
al 1%.
el
Las
células transformadas se inoculan con
LB agar con antibióticos selectivos.
Luego
se
realizó el test de
ketolactosa
transgénico.
creció in vitro en caldo
MS20 a 21°C
Transformación genética de
papa
las
Material vegetal
Se
Extracción y análisis de
ADN genómico
Extracción y análisis de ARN
total
Extracción y análisis de
proteínas totales
Análisis de expresión
génica
El
en
el
virulencia de la bacteria se
indujo usando el medio
simplificado de inducción, SIM
La
Plantas transformadas y no
transformadas de variedad
0.5 g de hojas de papa
congeladas en nitrógeno
líquido se molieron.
un
Todos
los
productos de la amplificación
mediante PCR y RT-PCR
La
método estándar de extracción
en base a fenol/cloroformo.
Un
vitroplantas se transfirieron a suelo
estéril y crecieron hasta la producción
de tubérculos.
4 a 6 semanas de edad se utilizaron
en todos los experimentos
de
colectó material vegetal en nitrógeno
líquido, el ADN genómico se aisló.
ARN total se aisló de
las hojas usando
las
litro de solución de
tampón salino fosfato
gen Elongation Factor 1-alpha fue el gen
endógeno de referencia usado para
normalizar los niveles de expresión.
se
se
se
observaron en gel de agarosa al
2% y se visualizaron con luz UV.
calidad de ARN se vio con
electroforesis en gel de agarosa 1.2%.
obtuvieron dos geles
idénticos para el análisis
Western
eligió entre 90 y 135
pares de bases (bp)
tiñó con azul brillante de
Coomassie para visualizar
proteínas
Otro gel se usó en la
transferencia electroforética
con membranas de
nitrocelulosa (BioRad)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
CONCLUSIONES
La expresión del
Transformación vegetal y caracterización molecular de
los transgénicos.
Un
total, de 29 líneas PR y 29 líneas PRx fueron positivas en el
análisis PCR, todos los transformantes positivos se transfi
rieron in vivo en invernadero.
no
afecta los genes relacionados con respuesta
a patógenos como GluB2 y PR1b.
los
genes de las prosisteminas endógenas relacionadas
con el mecanismo de defensa, Prosys y ProHypSys
Una
banda de proteína con un peso molecular aparente de
37 kDa se detectó en controles positivos de tomate.
Ninguna de
gen prosistemina en papa
las dos
no
fueron afectados por el transgen
bandas de proteínas se observó en plantas de papa no
transformada
Plantas transgénicas mostraron un efecto específico
en la expresión de genes de defensa.
sugieren que la
terminal N de prosistemina también juega un rol en la
activación de algunos genes de defensa en papa
Las dos
líneas transgénicas de papa mostraron una sobre
expresión en Lox3
Link de artículo: http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S230796062013000100003&lng=es&nrm=iso