Área de Ciências da Saúde – Curso de Farmácia Disciplina: Biotecnologia Farmacêutica Professora: Juliana C. Schmidt Aula Prática: BIOINFORMÁTICA I – ESTRUTURA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS E PROTEÍNAS NOÇÕES DE BIOINFORMÁTICA Nas últimas décadas surgiram três áreas de pesquisa (alguns autores consideram somente uma) que estão caminhando juntas: a Bioinformática, que pode ser descrita como a aquisição, análise e estoque de informação biológica, especificamente de ácidos nucleicos e proteínas; a Biologia Molecular Computacional, que é a que estuda o desenvolvimento de algoritmos e programas computacionais para resolver problemas nesta área e; a Genômica Computacional, que realiza uma análise integral da informação genômica. Todas têm crescido enormemente motivadas pelos projetos Genomas em curso. Um dos objetivos fundamentais destas áreas é converter a informação contida na seqüência de nucleotídeos ou de proteínas (linguagem biológica) em conhecimento bioquímico e biofísico (funções estruturais, funcionais e evolutivas). Na realidade o que se procura é decodificar uma linguagem desconhecida, extraindo o seu significado biológico. Esforços na área de banco de dados mantiveram-se na mesma taxa elevada em que as seqüências vêm sendo produzidas, permitindo aos investigadores o acesso público a estes dados de forma praticamente instantânea. Laboratório de Bioinformática do LNCC/MCT BANCOS DE DADOS NCBI www.ncbi.nlm.nih.gov O National Center for Biotechnology Information (NCBI) foi estabelecido em 1988 como um recurso nacional para informação de biologia molecular: NCBI criou banco de dados público; Conduz pesquisas em biologia computacional; Desenvolve programas para análise de dados de genomas; Dissemina informação biomédica. É uma divisão da National Library of Medicine (NLM) no National Institute of Health (NIH) dos EUA. EBI www.ebi.ac.uk O European Bioinformatics Institute (EBI) é uma organização acadêmica sem fins lucrativos que pertence ao European Molecular Biology Laboratory (EMBL). O EBI é um centro para pesquisa e serviços em bioinformática e administra bancos de dados de informações biológicas incluindo, seqüências de ácidos nucléicos e proteínas e estruturas macromoleculares. PDB (Protein Data Bank) www.pdb.org É um banco de dados de estruturas 3D de proteínas e ácidos nucléicos. Fornece uma variedade de ferramentas e recursos para estudar a estrutura tridimensional de macromoléculas biológicas, bem como relaciona-la com a seqüência de aminoácidos, função biológica e doenças. Quando obtemos uma seqüência de nucleotídeos qualquer, ela por si só nos é inútil, é apenas uma “sopa de letras”. Sua utilidade terá início quando pudermos extrair a informação contida nela. Entre todos os tipos de informação contidos numa seqüência de nucleotídeos, talvez encontrar um gene seja o mais importante. BUSCA DE QUADROS ABERTOS DE LEITURA EM SEQUÊNCIA DE NUCLEOTÍDEOS (Open Reading Frame - ORF) Em uma sequência de nucleotídeos é possível encontrar regiões codificadoras de proteínas. Para tanto, é necessário buscar as trincas de nucleotídeos (códons) que indicam o inicio da tradução e o final da tradução. Uma região codificadora contendo nº de nucleotídeos múltiplo de três e compreendida entre um códon de início e o códon de término de tradução é denominada de Quadro Aberto de Leitura (Open Reading Frame – ORF). A partir de uma seqüência de nucleotídeos são possíveis 6 diferentes quadros de leitura, conforme ilustrado na figura a seguir: ATIVIDADE 1 – Transcrever a seqüência de DNA em RNA - você pode converter a seqüência de DNA em RNA manualmente, ou; usando um programa conversor existe um em http://www.fr33.net/seqedit.php ATIVIDADE 2 – Traduzir a seqüência de DNA ou RNA em seqüência de aminoácidos - entrar no site www.expasy.org entrar em Proteomic tools encontrar o link Translate colar a seqüência de DNA ou RNA dentro da janela e clicar em Translate sequence. ATIVIDADE 3 – Encontrar um gene numa seqüência de nucleotídeos - entrar no site do NCBI - clicar no link ORF FINDER - colar a sequência de nucleotídeos fornecida dentro da janela - clicar em Orf Find irão aparecer os 6 quadros abertos de leitura possíveis verificar qual deles corresponde ao quadro correto.