COLETA, TRANSPORTE E PROCESSAMENTO
DE AMOSTRAS CLÍNICAS NO LABORATÓRIO DE
MICROBIOLOGIA:
ÊNFASE: LÍQUIDOS DIVERSOS & SANGUE
Profa. Cláudia de Mendonça Souza
Depto Patologia
Faculdade de Medicina
UFF
Qual a melhor forma de transporte para
amostras de líquidos orgânicos (pericárdico,
ascítico, pleural, líquor, sinovial) e como
devem ser processados para a realização de
exames microbiológicos?
Após a coleta, transferir para um TUBO ESTÉRIL e
enviar ao laboratório no máximo em 2h em TA ou,
inocular
diretamente
em
FRASCOS
DE
HEMOCULTURA (> 1 mL).
Anticoagulantes (EDTA, Citrato de sódio, Heparina)
são inibidores para alguns microrganismos.
 SPS (polietanol sulfonato de sódio): melhor
opção.
Amostras (<1mL): coletar em tubo estéril,
centrifugar (15 min) e utilizar o sedimento para
preparação de esfregaço (Gram) e inoculação nos
meios de cultura (4 dias).
COLETA DE LÍQUIDOS
 Diversos são os líquidos que podem ser
recebidos no Laboratório de Microbiologia:
 Líquido pleural, ascítico, de diálise
peritoneal, pericárdico, sinovial, amniótico.
 Volumes > 1mL podem ser inoculados
diretamente em frascos de hemocultura.
 Quanto > o volume cultivado, > a probabilidade
de isolamento do patógeno.
COLETA DE LÍQUIDOS ORGÂNICOS
Líquido pleural
Líquido ascítico
Líquido pericárdico
Líquido sinovial
Coleta - Líquor
Punção lombar (entre a 4a e 5ª vértebra lombar).
Antissepsia da pele: álcool 70%, clorexidina alcoólica a 0,5%
Processamento - Líquor
Devido à gravidade dessas infecções, o laboratório deve estar
preparado para realizar o diagnóstico de modo rápido e preciso
 Material clínico: LCR
• Amostra colhida em tubo estéril e encaminhada com
urgência
• Não refrigerar!
• Amostras refrigeradas podem inibir e até impedir o
crescimento de MO’s, no entanto essas amostras servem
para a pesquisa de antígenos
• Volume mínimo de 2mL para bactérias e 7mL para fungos
 Geralmente, a concentração dos MO’s no líquor é baixa
(< 103 UFC/mL): centrifugar a amostra para concentrá-los
Centrifugar a amostra 4.500 – 5.000 rpm/ 15min
Semear em AS, CHOC e
MacConkey
Incubar a 35°C em estufa
com 5% de CO2 por 24h
Placas (-)
Emitir
resultado
parcial
negativo
Gram do sedimento
Placas (+)
Identificação e
TSA
Liberação
do
resultado
final
Incubar por 24h
Placas (-)
Emitir
resultado
negativo
DETECÇÃO DIRETA DE ANTÍGENOS
BACTERIANOS NO LÍQUOR
Teste de aglutinação pelo látex
“Kit” para a pesquisa de antígenos no líquor de:
• Neisseria meningitidis
• Streptococcus pneumoniae
• Haemophilus influenzae
• Streptococcus agalactiae
• Escherichia coli
Recomenda-se não utilizar
como método único de
diagnóstico, mas realizar
também Gram e Cultura
(-)
(+)
Coleta - Sangue
• Anti-sepsia da pele é muito importante (tintura de
iodo, alcóol 70% ou clorexidina).
Taxa aceitável de contaminação: 3%
Coletas inadequadas podem levar ao
isolamento de microrganismos
contaminantes, não relacionados com o
processo infeccioso.
 Fazer a coleta na ascensão do pico febril e
antes da antibioticoterapia.
 Colher de 2-3 amostras (punções diferentes)
PROCESSAMENTO - Sangue
Sistemas manuais
 Incubação em até 7 dias
 Maior possibilidade de contaminação
 Mais laborioso
PROCESSAMENTO - Sangue
 Sistemas automatizados
 Incubação em até 5 dias
 Detecção do CO2
 Bacteremias verdadeiras geralmente
apresentam positividade com um tempo < 48h
 Positividade no sistema: fazer o Gram e
reportar rapidamente
melhor evolução
Bact/Alert- BioMerieux
PROCESSAMENTO - Sangue
 Sistemas automatizados
BACTEC - BECTON DICKINSON