PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA DISCIPLINA DE BIOQUÍMICA Prof. Raimundo Jr, M.Sc. Aula 03 – Identificação de Aminoácidos INTRODUÇÃO Os aminoácidos componentes de uma proteína podem ser genericamente caracterizados se, após sua hidrólise, efetuarmos a reação da ninhidrina. A ninhidrina (hidrato de tricetoidrindeno) reage com aminoácidos produzindo cor púrpura. É uma reação inespecífica quanto à identidade do aminoácido, sendo a reação dependente da presença de grupos amina livres. O aminoácido prolina, na verdade um iminoácido, ao reagir com a ninhidrina produz coloração amarela. OBJETIVO PRINCIPAL • Realizar reação específica para detecção de aminoácidos. MATERIAL Água destilada Tubos de ensaio Solução de ninhidrina 0,1% (p/v) Solução de aminoácidos Pipetas, luvas descartáveis, pêra e Becker. PROCEDIMENTOS Tubos Identificação 01 Branco 02 Teste 01 03 Teste 02 Reagentes 0,5mL de água destilada + 2mL de solução de ninhidrina 0,5mL da solução de proteínas + 2mL de solução de ninhidrina 0,5mL da solução de aminoácidos + 2mL de solução de ninhidrina Cor Colocar os tubos em banho-maria a 100ºC, por 10 minutos; Observar o desenvolvimento de cor nos tubos. ATIVIDADES A partir de suas observações e com base na leitura da bibliografia recomendada, responda às questões que se seguem: 1. Identifique a cor de cada tubo após o aquecimento em banho-maria. 2. Justifique o porquê do desenvolvimento de cor em todos os tubos. 1