Instrução de Trabalho Teste de Coombs indireto Código: Data: IT.LAB.036 Página: Versão: 23/06/2010 1 1 de 2 1062 RESULTADO ESPERADO: Pesquisar anticorpos bloqueadores (incompletos), os quais se fixam às hemácias "in vitro" mas não as aglutinam. PROCESSOS RELACIONADOS: Assistência Diagnóstica e Terapêutica - Laboratório Assistência Diagnóstica e Terapêutica - Laboratório Preparação das amostras de sangue Lavar as hemácias 1 vez com solução salina isotônica. Dispensar 1,0 mL de solução isotônica em um tubo limpo. Pipetar 50 µL (1gota) do concentrado de hemácias lavadas. Homogeneizar. DESCRIÇÃO DO PROCEDIMENTO: RESPONSÁVEL AÇÃO REGISTROS DESCRIÇÃO DA AÇÃO 01.Separar a suspensão de hemácias para o teste Bioquímicos Técnicos de laboratório Colocar em um tubo de hemólise uma gota de suspensão de hemácias a 3-5% escolhidas para o teste (hemácias de doadores, hemácias teste de triagem ou de painés), previamente preparadas em solução salina à 0,9%. 02.Adicionar o soro Bioquímicos Técnicos de laboratório Adicionar duas gotas (100µL) de soro a ser testado em tubo limpo e adequadamente identificado. 03.Adicionar albumina bovina Bioquímicos Técnicos de laboratório Acrescentar 3 gotas de Albumina Bovina a 22%. 04.Colocar em BanhoMaria Bioquímicos Técnicos de laboratório Incubar o tubo em Banho-Maria durante 15-30 minutos a 37°C. Ressuspender suavemente as hemácias e observar a aglutinação macroscópica, sobre uma fonte de luz indireta. 05. Proceder lavagem Bioquímicos Técnicos de laboratório Lavar o conteúdo do tubo por três vezes com solução salina isotônica e decantar o sobrenadante. 06.Adicionar o soro de Coombs Bioquímicos Técnicos de laboratório Acrescentar duas gotas (100 µmL) do soro antiglobulina humana (soro de Coombs) e homogeneizar. 07.Centrifugar Bioquímicos Técnicos de laboratório Centrifugar a 3400 rpm por 20 segundos ou a 1000 rpm por 1 minuto. 08.Fazer a leitura Bioquímicos Técnicos de laboratório Agitar suavemente o tubo pra pesquisar a presença ou não de aglutinação. Resultado positivo: Aglutinação Resultado negativo: Ausência de aglutinação. REFERÊNCIAS: Manual de instruções Albumina bovina -DiaMed. Relatório Gerado pelo SisGQ-Gesleade - www.gesleade.com.br Av. Ministro José Américo de Almeida, 1450 - Torre -J oão Pessoa/PB - CEP: 58040-300 E-mail: [email protected] - Fone: (83) 2106-8627 Instrução de Trabalho Teste de Coombs indireto Código: IT.LAB.036 Data: Página: Versão: 23/06/2010 1 OBSERVAÇÕES GERAIS: HISTÓRICO DE REVISÕES: Não há revisões. ELABORAÇÃO/VALIDAÇÃO: Rossana Karlla - RESPONSÁVEL LABORATÓRIO - Elaborou documento em 23/06/2010 Fábio Medeiros - COORD. LAB. - Validou o documento em 13/09/2010 Katiuscia Barros - ENFERMEIRO* - Aprovou e Disponibilizou o documento em 15/09/2010 Relatório Gerado pelo SisGQ-Gesleade - www.gesleade.com.br Av. Ministro José Américo de Almeida, 1450 - Torre -J oão Pessoa/PB - CEP: 58040-300 E-mail: [email protected] - Fone: (83) 2106-8627 2 de 2