www.lge.ibi.unicamp.br A Natureza Molecular do Gene - I BG 280 – Aula 12 Gonçalo Disponível em www.lge.ibi.unicamp.br/~goncalo/BG280 Etapas - I www.lge.ibi.unicamp.br 1. Evolução 2. Hereditariedade Etapas - II www.lge.ibi.unicamp.br 3. Thomas Morgan a. b. Drosophila – Genes – Cromossomos Prêmio Nobel: 1933 4. O que é o Material Genético ???? Princípio Transformante www.lge.ibi.unicamp.br 5 - Frederick Griffith - 1928 O Princípio do DNA www.lge.ibi.unicamp.br 6. Friedrich Miecher -Isolamento de moléculas -1869 – Núcleo de Linfócito -Nucleina 7. Phoebus Theodor Levene - 1931 - DNA: bases nitrogenadas, açúcar e fosfato - Polímeros - DNA # RNA Investigando o PT www.lge.ibi.unicamp.br 8. Avery, McCarty e McLeod, 1943 Proteína Lipídios Açúcares RNA DNA Avery e o Nobel www.lge.ibi.unicamp.br Avery undoubtedly discovered that DNA is the carrier of the genetic material when he showed that DNA from strains of bacteria with high pathogenicity could transform strains with low to high pathogenicity. His first publication on this topic appeared as early as 1944. Avery was nominated several times between 1932 and 1942 for work on polysacharide antigens. From 1945 he was nominated every year for his discovery concerning DNA. At the time many scientists thought of DNA, with its four different building blocks, as having too simple a structure to be the genetic material. Instead they favored the idea that proteins, with their 20 different amino acids, were more likely to be the genetic material and did not trust the enzyme digestions used by Avery to remove protein from his preparation of DNA. By the time the scientific community, including the Nobel Committee, had accepted Avery's data, he had passed away. Experimento do Liquidificador www.lge.ibi.unicamp.br 9. Alfred Hershey e Marta Chase O DNA: Atores Coadjuvantes www.lge.ibi.unicamp.br 10. Erwin Chargaff, 1949 A=T G=C Conclusão: Nenhuma 11. Alexander Todd, 1950 A Guerra do DNA O Santo Graal www.lge.ibi.unicamp.br 12. Linus Pauling -Orbitais -Alfa hélice -Folha Beta -Vitamina C -Ativista anti nuclear -Etc... A Tripla Hélice 1951 A Guerra do DNA www.lge.ibi.unicamp.br 12. Rosalind Franklin 13.Watson e Crick A Síntese www.lge.ibi.unicamp.br O Mais Belo Experimento da Biologia www.lge.ibi.unicamp.br 14. M. Meselson A Busca do Gene www.lge.ibi.unicamp.br 15. Beadle e Tatum, 1943 Neurospora crassa Um gene, uma enzima Sequenciamento de Proteina www.lge.ibi.unicamp.br 16. Frederick Sanger, 1955 Mutação = Troca de AA www.lge.ibi.unicamp.br 16. Pauling, Vernon Ingram Ácido Glutâmico Valina (S) -Anemia falciforme -Tripsina -> Hemoglobina Genética de Fagos www.lge.ibi.unicamp.br 17. Seymour Benzer, 1950s Phago Lambda l www.lge.ibi.unicamp.br Mapeamento Fino dos Genes - I www.lge.ibi.unicamp.br Mutantes rII -Cresciam em cepa K12, mas não K12l -Diferença: infecção simples ou dupla -Dois grupos de complementação, A e B -Nova + A = lise, então N = B e vice versa -Mutações -Ponto (ver. 10-2 – 10-8) -Deleção – sem reversão Mapeamento Fino dos Genes - II www.lge.ibi.unicamp.br -Benzer isolou 2000 mutantes rII -145 não revertiam = deleções -Cruzou os mutantes entre si e mapeou as deleções -Ex. 1x2 – NS/ 2x3 – NS/ 1x3 - S 1--------2--------3------etc. Mapeamento Fino dos Genes - III www.lge.ibi.unicamp.br - Mapeamento de deleção de mutação de ponto K12 K12l (WT/total) x 2 x 100 Conclusões do Benzer www.lge.ibi.unicamp.br -Mapeou 2400 mutantes rII -Conseguiu distinguir 304 sites -Genes eram divisíveis por mutações -Mutações correspondiam a um bp -Mutações mapearam em 2 cistrons complementares -Propôs que seriam 2 polipeptídeos -Genes seriam divisíveis -Evolução do um gene-uma enzima para -Um gene, um polipeptídeo INAUGURA A GENÉTICA MOLECULAR Código Genético www.lge.ibi.unicamp.br 18. Francis Crick e Sidney Brenner Proflavina -Reversão de mutantes rII -Mas não eram exatamente selvagens Codons são triplets Supressão www.lge.ibi.unicamp.br