Lab. Biologia Molecular Aplicado ao Diagnóstico
Dept. Análises Clínicas e Toxicologia
Faculdade de Ciências Farmacêutica
Universidade de São Paulo
Aluno: Aécio Assunção Braga
Angiotensin-converting enzyme insertion/deletion and angiotensin type 1
receptor A1166C polymorphisms as genetic risk factors in benign prostatic
hyperplasia and prostate cancer
Erick Sierra Díaz,* José Sánchez Corona,† Roberto Carlos Rosales Gómez,†# Susan Andrea Gutierrez
Rubio,†# José Gonzalo Vázquez Camacho,* Héctor Solano Moreno,* María Cristina Morán Moguel†
São Paulo 2010
INTRODUÇÃO
O que é próstata?
A próstata é uma glândula que só o homem possui e que se localiza na parte baixa do
abdômen. Ela é um órgão muito pequeno, tem a forma de maçã e se situa logo abaixo
da bexiga e à frente do reto. A próstata envolve a porção inicial da uretra, tubo pelo
qual a urina armazenada na bexiga é eliminada.
É também na próstata onde se produz parte do sêmen, líquido espesso que contém os
espermatozóides, liberado durante o ato sexual.
Fonte: http://www.inca.gov.br/conteudo_view.asp?ID=129
INTRODUÇÃO
Fonte: http://blig.ig.com.br/riorestaurador/files/2009/09/prostata.gif
INTRODUÇÃO
Hiperplasia Prostática Benigna (HPB)
o
Ocorre em mais de 50% dos homens com mais de 50 anos de idade; em mais de
80% dos homens com mais de 70 anos de idade
o
Hiperplasia do tecido normal
o
Apresenta freqüentemente focos de tecido claramente neoplásticos (detectados
apenas na autópsia)
o
Acompanhada de pequenos aumentos dos níveis de PSA (mais de 95% dos casos
apresentam níveis inferiores a 10)
Fonte: http://reivax.tripod.com/cancerpg14.htm
INTRODUÇÃO
Fonte: http://www.jornal.uem.br/galeria/albums/jornal_61/normal_j61-000-prostata.jpg
INTRODUÇÃO
Câncer de Próstata
o
É a neoplasia maligna viceral mais comum na população masculina do México
o
Apresentando em 2003, taxa de morbidade 5,94% e taxa de mortalidade 9,90%
o
Nos EUA, representa 1/3 das neoplasias malignas viceral
o
Aparecendo em 17,6% dos homens brancos e 20,6% em Afro-Americanos
o
Com risco de morte 2,8% e 4,7%, respectivamente nessas populações
o
História familiar
INTRODUÇÃO
Loci de sucetibilidade ao CP
o
HPC1/RNASEL
o
HPC2/ELAC2
o
MSR1
o
BRCA2
o
PCAP, HPCX, CAPB, HPC20, CHEK2, PTEN, TP53, AR, CDKN2A e ATBF1
INTRODUÇÃO
Variação genética
o
Variações germinativas (POLIMORFISMOS)
o
Mutações genéticas somáticas
INTRODUÇÃO
Sistema Renina-Angiotensina (RAS)
o
Relação do RAS com o câncer
o
Angiotensina II (peptídeo biologicamente ativo)
- AGTR1
- AGTR2
INTRODUÇÃO
o
A relação do AGT1R com CP (expressão do RNA)
o
O papel da Angiotensina II nos receptores no tratamento do CP
o
A relação da ACE e o CP (fatores genéticos)
MATERIAIS E MÉTODOS
Amostras e genotipagem
o
Revisaram 20 amostras patológicas com câncer de próstata e 20 casos com HBP
o
Período de julho de 2006 à junho de 2007 (Dept. de Patologia da National Western
Medical Centre)
o
Classificaram as amostras através do escore de Gleason
o
Extração de DNA (Lab. De Medicina Molecular do Centro de Ivestigação Biomédica)
MATERIAIS E MÉTODOS
MATERIAIS E MÉTODOS
Amostras e genotipagem
o
PCR
o
RFLP (Hae III)
o
Gel de poliacrilamida 8%
o
População Geral (GP)
o
Comitê Local de Ética e Pesquisa em Saúde
MATERIAIS E MÉTODOS
MATERIAIS E MÉTODOS
Análise estatística
o
Os testes utilizados para análise estatística foram:
- Qui-quadrado (X2)
- Teste t student
o
Para comparar os grupos utilizou-se:
- Teste exato de Fisher
- Odds ratio (OD)
- Intervalo de confiança de 95% (IC 95%)
RESULTADOS
RESULTADOS
Associação de teste para o polimorfismo ACE (HBP x GP)
o
Genótipo e o alelo
- HBP x GP (p = 0,00016)
o
Génotipo-fenótipo com IC de 95%
- D em I x alelo D (p = 0,0001)
- II x DD (p = 0,00120)
- II x ID + DD (p = 0,02244)
- I em D x alelo I (p = 0,00001)
- DD x ID (p = 0,00077)
- DD x II (p= 0,00120)
- II + DD x DD (p = 0,00004)
RESULTADOS
PC x GP para o polimorfismo ACE
o
Para o alelo D
- alelo I x alelo D (p= 0,00062)
- II x ID (p= 0,03550)
- II x DD (p= 0,00161)
- II x ID + DD (p= 0,00599)
o
Para o alelo I
- alelo D x alelo I (p= 0,00062)
- DD x II (p= 0,00161)
- II + ID x DD (p= 0,00890)
RESULTADOS
Associação de teste para o polimorfismo AGT1R
o
HBP x GP
- CC x AC (p= 0,03889)
- CC x AA (p= 0,00011)
o
PC x GP
- Para o alelo A em CC x AC (p= 0,00283)
- CC x AA (p= 0,1211)
RESULTADOS
RESULTADOS
DISCUSSÃO
o
O gene ACE está localizado no cromossomo 17q23
o
Descrito pela 1ª vez por Rigat et al.
o
Consistindo na inserção ou deleção do fragmento Alu de 287pb
o
AGT1R localizado no cromossomo 3q23
o
É o principal mediador da angiotensina II
o
Ainda não foram bem descritos a expressão celular e molecular do ADT1R
DISCUSSÃO
Comparação intergrupos do ECA (I / D)
o
Alelo D com maior frequência nos grupos PC e HBP
o
O genótipo DD com menor frequência no grupo GP
o
Diferença significativa entre HBP e GP, em relação a homozigose do alelo D (OR=
21,87 IC 95% = 2,314-206,479)
o
Houve diferença significativa entre PC e GP, em relação a homozigose do alelo D
(OR= 31,66 IC 95% = 1,601-626,212) e heterozigose (OR= 11,40 IC 95% = 0,576225,436)
DISCUSSÃO
Comparação intergrupos do A1166C AGT1R
o
Diferença significativa entre o grupo HBP e PC para o alelo C em heterozigose (OR=
7,429 IC 95% = 1,778-31,040)
o
Houve diferença entre o grupo GP e HBP para o alelo A heterozigoto OR= 56,07 (IC
95% = 0,546-1097,122) e OR= 10,385 (IC 95% = 1,260-414,300)
o
Diferenças encontradas para heterozigoto e homozigoto do alelo A entre o grupo PC
e GP com OR= 22,846 (IC 95% = 1,260-414,300) e OR = 18,692 (IC 95% = 0,870401,830), respectivamente.
CONCLUSÃO
Polimorfismo (I / D) da ECA
o
O polimorfismo (I / D) da ECA está associado com HPB, na presença do alelo D
o
O alelo D está associado com risco maior de CP
o
O alelo I no estado heterozigoto pode atuar como fator protetor de CP
CONCLUSÃO
Polimorfismo A1166C AGT1R
o
A presença do alelo A, principalmente no estado homozigoto, está associado com
risco de HBP
o
O risco de desenvolver CP está associado com a presença do alelo A, porém com
menor o risco quando comparado com aparecimento de HPB
o
O genótipo AC está associado com escore de Gleason moderado
o
A presença do alelo C está associado com risco de ter CP
OBRIGADO!!!