Conhecimentos Técnicos Específicos da Área:
Questões Objetivas (vale 1,0 ponto cada)
1ª Questão: O estudo de inibidores é de
fundamental importância na elucidação de vias
metabólicas. Dentre as características dos
diversos tipos de inibidores, qual a única
alternativa correta?
A) Os inibidores alostéricos são irreversíveis.
B) Os inibidores competitivos causam redução da
Vmax da enzima.
C) Os inibidores não-competitivos são análogos
não metabolizáveis de substratos.
D) A Km e a Vmax são diminuídas pelo inibidor
incompetitivo.
E) Os inibidores irreversíveis têm seus efeitos
compensados pelo excesso de substrato.
2ª Questão: Há muito tempo já se tem
conhecimento de que as atividades de uma
mesma enzima determinadas em diferentes
espécies
só
podem
ser
devidamente
comparadas se as suas condições de ensaio
forem devidamente padronizadas. Qual a
alternativa
abaixo
não
condiz
com
padronização de ensaio enzimático.
A) A temperatura ótima de uma enzima é aquela
na qual a enzima apresenta a sua maior atividade,
constante por um período de tempo.
B) A força iônica não interfere na atividade
enzimática, apenas o tipo de tampão usado.
C) As atividades enzimáticas devem ser
determinadas em seu pH ótimo.
D) Temperaturas superiores à temperatura ótima
podem causar desnaturação de enzimas.
E) Se possível, a concentração do substrato usado
deve ser cerca de 10x o valor de sua Km.
3ª Questão: A respeito da velocidade máxima
(Vmax) e da constante Michaeliana (Km) de
enzimas, é incorreta a afirmação:
A) Km corresponde à concentração do substrato
com a qual a enzima alcança 50% da Vmax .
B) Vmax é a mais elevada atividade de uma enzima
determinada em condições padronizadas.
C) O valor da Km é aumentado pelo inibidor
competitivo.
D) O valor da Km não se altera na presença do
inibidor não-competitivo.
E) Os valores de Vmax e Km não são alterados pela
presença de inibidores irreversíveis.
4ª Questão: São vantagens das enzimas frente
os catalisadores químicos, com exceção da
alternativa:
A) Baixo consumo de energia.
B) Baixa estabilidade do preparado enzimático.
C) Alta atividade catalítica em temperatura
ambiente.
D) Baixa produção de subprodutos.
E) Alta especificidade ao(s) substrato(s) da reação.
5ª Questão: São cuidados que precisamos ter na
extração de RNA, com exceção de:
A) Sempre que possível, coletar a amostra e
armazená-la em TRIZOL, sob refrigeração
adequada.
B) Usar materiais plásticos descartáveis novos
(tubos e ponteiras).
C) Armazenar o extrato final na geladeira a
aproximadamente 8 oC.
D) Usar micropipetadores automáticos exclusivos
para este procedimento.
E) Usar luvas descartáveis de látex.
6ª Questão: São importantes propriedades de
proteínas que, uma vez conhecidas, contribuem
para os procedimentos de sua purificação, com
exceção de:
A) Tamanho.
B) Carga elétrica.
C) Solubilidade.
D) Velocidade máxima.
E) Atividade biológica.
7ª Questão: O espectrofotômetro é um
equipamento de grande utilidade em um
laboratório de bioquímica. Sobre o uso deste
equipamento, estão corretas as afirmativas
abaixo, exceto:
A) Cubetas de quartzo são de uso obrigatório para
a “leitura” de analitos que absorvem luz
ultravioleta.
B) Para análises fotométricas e varreduras de
comprimentos de ondas, as amostras devem ser
“lidas”,
prioritariamente,
em
temperatura
ambiente.
C) A varredura tem sempre como objetivo a
análise quantitativa do analito.
D) O coeficiente de absortividade molar de um
analito é geralmente apresentado como M-1.cm-1.
E) No caso de análise de analitos preparados em
solventes, a absortividade deste deve ser sempre
descontada.
8ª Questão: A espectrofluorimetria é um
método muito usado na análise de atividades
enzimáticas. No emprego deste método só está
correta a seguinte afirmativa:
A) A análise da fluorescência deve ser feita
usando-se cubetas de quartzo com dois lados
polidos.
B) A fluorescência é muito influenciada pela
mudança do pH do meio.
C) A luz emitida é aquela que atinge a amostra.
D) A excitação da amostra é feita por um feixe de
laser.
E) Através deste método são possíveis apenas
análises qualitativas.
9ª Questão: As diversas técnicas eletroforéticas
são utilizadas como alternativas favoráveis em
etapas finais de purificação de proteínas e na
elucidação de sua massa molecular relativa,
dentre outras finalidades. A respeito desta
técnica é incorreto afirmar:
A) Quando a “corrida” eletroforética é controlada
pela corrente elétrica empregada, devemos levar
em consideração o número de géis usados.
B) A focalização isoelétrica é uma etapa
fundamental da eletroforese bidimensional.
C) Dodecil sulfato de sódio e β-mercaptoetanol
são usados em conjunto para desnaturar as
proteínas, torná-las negativamente carregadas e
reduzir as pontes dissulfeto.
D) A iodoacetamida é usada em separações
eletroforéticas que visem o sequenciamento de
proteínas pelo método de degradação de Edman,
com o objetivo de evitar o bloqueio do Nterminal.
E) A eletroforese in natura é geralmente usada
para localizar uma proteína no gel, com a
finalidade de determinar sua massa molecular
relativa.
10ª Questão: São vantagens dos sequenciadores
de proteínas que empregam espectrômetros de
massas frente àqueles que empregam o método
de degradação de Edman, exceto:
A) É muito mais rápido.
B) Seus resultados são mais fáceis de analisar e
mais confiáveis.
C) Sequencia proteína com N-terminal bloqueado.
D) Não requer padrões de aminoácidos.
E) Favorece a automatização do processo.
11ª Questão: A respeito da zimografia, apenas é
correto afirmar:
A) É uma técnica eletroforética que permite a
separação e o estudo apenas de zimogênios.
B) É uma técnica eletroforética que permite a
separação e a classificação de enzimas.
C) É uma técnica eletroforética na qual as
proteínas são reveladas por radioatividade.
D) É uma técnica eletroforética na qual as
proteínas são reveladas por prata.
E) É uma técnica eletroforética na qual as
proteínas são reveladas através de reagente
preparado a base de zimogênio.
12ª Questão: A respeito do sequenciamento de
proteínas pelo o método de degradação de
Edman, é incorreta a afirmação:
A) Cada aminoácido demora de 30 minutos a uma
hora para ser elucidado.
B) A técnica necessita do emprego de padrões de
aminoácidos.
C) Cada aminoácido removido do peptídeo ou
proteína em análise é separado por HPLC.
D) A análise permite o emprego de amostras
parcialmente purificadas.
E) A análise dos resultados é relativamente
simples e independe de programas especializados.
13ª Questão: A respeito da revelação de
proteínas em gel de poliacrilamida é incorreto
afirmar:
A) A revelação por Coomassie Blue é mais fácil e
barata.
B) A revelação por prata deve ocorrer no escuro.
C) A revelação por prata é cerca de 5 a 10 vezes
mais sensível que por Coomassie Blue.
D) As revelações por Coomassie Blue e prata são
reversíveis, embora difíceis de executar.
E) O excesso de Coomassie Blue é geralmente
removido por metanol.
14ª Questão: São informações fornecidas pela
elucidação da sequência de aminoácidos de
uma proteína, exceto:
A) Informações a cerca de sua estrutura
tridimensional.
B) Informações a cerca de sua evolução.
C) Informações a cerca de seu nível de expressão.
D) Informações a cerca de sua função.
E) Informações a cerca de sua localização celular.
15ª Questão: A respeito da focalização
isoelétrica em meio líquido, só é correto
afirmar:
A) É uma técnica de purificação de proteínas mais
apropriada para pequenas quantidades de
amostras.
B) É uma técnica de purificação de proteínas que
separa este analito de acordo com a sua massa
molecular relativa.
C) É uma focalização isoelétrica feita em cuba de
eletroforese horizontal.
D) A proteína migra de um líquido para um gel.
E) É uma técnica de purificação de proteínas que
emprega grandes quantidades de amostras.
16ª Questão: A respeito da cromatografia de
afinidade é correto afirmar, exceto:
A) Em muitos casos, um análogo do substrato da
enzima é usado para eluí-la da coluna.
B) Alteração do pH é uma boa opção para eluir o
analito da coluna.
C) Inibidores de enzimas geralmente são usados
para melhorar a especificidade da ligação do
analito que se quer purificar.
D) Grandes volumes de amostra podem ser usados
nesta técnica, desde que não se exceda a
capacidade de ligação da resina ao analito que se
queira purificar.
E) É, provavelmente, a técnica que apresenta a
maior facilidade e maior eficiência na purificação
de diversas proteínas.
17ª Questão: A respeito da eletroforese capilar é
apenas correto afirmar:
A) É uma técnica eletroforética que permite, em
uma única “corrida”, separar substâncias
positivas, negativas e neutras.
B) Nesta técnica, de uma mistura de substâncias
positivas, negativas e neutras - estas últimas são as
primeiras a serem eluídas.
C) Esta técnica requer um volume de amostra
superior às outras técnicas eletroforéticas.
D) O fluxo eletroosmótico tem pouca importância
nesta técnica.
E) É uma das mais antigas eletroforeses
conhecidas.
18ª Questão: A respeito do uso da
cromatografia líquida de alta eficiência
(HPLC) é correto afirmar, exceto:
A) O emprego de pré-colunas aumenta a
durabilidade de suas colunas.
B) A fase reversa consiste do emprego de
solventes polares para a eluição dos analitos.
C) A fase móvel deve ser sempre submetida a
procedimentos que visem à remoção dos gases
dissolvidos na mesma.
D) Para evitar a contaminação de suas tubulações,
deve-se de preferência mantê-las preenchidas com
metanol durante os médios e longos intervalos de
uso.
E) A pressões aplicadas ao seu sistema e colunas
devem respeitar os respectivos manuais.
19ª Questão: Primers universais são aqueles
que permitem a amplificação de um
fragmento de DNA presente:
A) em um único gênero.
B) em uma única espécie.
C) em diferentes espécies.
D) em diferentes gêneros.
E) nenhuma das alternativas anteriores.
20ª Questão: Os PCR como toda técnica
possui controles. Quando os controles estão
adequados, o resultado do PCR observado
apresenta:
A) produto de amplificação em todos os seus
controles com o mesmo tamanho do fragmento
observado nas amostras.
B) produto da amplificação com tamanho
esperado presente em apenas um dos controles.
C) produto da amplificação ausente em todos os
controles e amostras com produtos de
amplificação do tamanho esperado.
D) produto de amplificação de PCR no controle
negativo e ausência de amplificação no controle
positivo.
E) as alternativas “a” e “d” estão corretas.
21ª Questão: O resultado de um PCR pode
ser visualizado por:
A) SDS-PAGE.
B) eletroforese 2D.
C) eletroforese de sistema horizontal ou
vertical.
D) DGGE.
E) PFGE.
22ª Questão: Uma reação de sequenciamento
se difere de uma de PCR principalmente
por:
A) utilizar um único iniciador.
B) apresentar uma concentração maior de
dNTP.
C) não utilizar tampão com magnésio.
D) utilizar didNTP em substituição ao dNTP.
E) utilizar uma transcriptase.
23ª Questão: No sequenciamento, o resultado
é apresentado, simultaneamente a leitura das
amostras, em softwares na forma de:
A) sequência de aminoácidos.
B) eletroferograma.
C) sequência em formato FASTA.
D) valores de comprimento de onda.
E) todas as alternativas acima.
24ª Questão: No estudo de proteômica
podemos empregar:
A) DGGE e PFGE.
B) SDS-PAGE e Southern Blotting.
C) 2D e Northern Blotting.
D) Westhern Blotting e DGGE.
E) SDS-PAGE e 2D.
25ª Questão: Qual dos organismos abaixo é
empregado na técnica de clonagem para
viabilizar a multiplicação do material de
interesse?
A) Aspergillus flavus.
B) Pseudomonas aeruginosa.
C) Saccharomyces cerevisae.
D) Escherichia coli.
E) Agrobacterium tumefasciens.
26ª Questão: Na clonagem, “células
competentes” são:
A) a marca comercial da estirpe empregada.
B) a fase de crescimento da estirpe.
C) o processo de eletroporação.
D) sinônimo de “células transformadas”.
E) as alternativas “c” e “d” estão corretas.
27ª Questão: Na clonagem, a seleção das
células transformadas é uma etapa essencial,
possibilitada pelo emprego de:
A) vetores.
B) plasmídeos.
C) genes repórteres.
D) antibióticos.
E) todas as alternativas estão corretas.
Conhecimentos Técnicos Específicos da Área:
Questões Discursivas (valem no máximo 11 (onze) pontos cada uma)
- cada questão pode ser desenvolvida na página que é apresentada e em seu verso
28ª Questão: Considerando uma enzima de comportamento Michaeliano, cuja K m seja aproximadamente 100
µM, proponha um experimento para aferir esta constante cinética. Desenvolva os seguintes passos:
1- Cite um conjunto de concentrações finais do substrato usado,
2- Simule um gráfico de Michaelis-Menten com os possíveis resultados dos ensaios com a enzima,
3 - Simule um gráfico de Lineweaver-Burk (duplos recíprocos) com os possíveis resultados dos ensaios com a
enzima. Explique como a Km e Vmax podem ser calculadas através deste gráfico.
29ª Questão: Explique fisicamente como se dão os fenômenos de fluorescência e absorvância e como tais
fenômenos podem ser utilizados para avaliar os aspectos estruturais de macromoléculas, bem como para
avaliar o crescimento celular.
30ª Questão: Relacione todas as etapas desde a submissão de uma amostra à técnica de PCR até o
sequenciamento da mesma. Descreva sucintamente cada etapa sinalizando sua importância.