Universidade de Brasília
Instituto de Ciências Biológicas
Departamento de Biologia Celular
Bioquímica e Biofísica Experimental – 121886 – 02/2011
Prática 01 – 19 de agosto – prof. Fernando Fortes
Resumo: Informações sobre procedimentos gerais e de segurança em laboratórios científicos,
utilização de pHmetro e fita indicadora de pH e influência do pH no comportamento de misturas e
soluções.
Objetivo: Familiarizar-se com utensílios de laboratórios e com procedimentos padrão de segurança
(dos quais o primeiro é manter o SILÊNCIO, a ATENÇÃO e a CALMA). Dar a definição de pH e
pOH e quais os instrumentos usados para determiná-los, além de identificar e explicar o efeito do
pH no comportamento de algumas substâncias em misturas ou em soluções. Será necessário que ao
final da prática o aluno seja capaz de determinar ou estimar o pH de uma solução utilizando um
pHmetro, seguindo um procedimento coerente com a precisão da medição e com as normas de
segurança de laboratório.
PARTE A - manipulando o pHmetro
Material
pHmetro de bancada ou portátil
soluções-padrão pH 4,0 - pH 7,0 - pH 9,0
100 mL de água destilada
soluções A, B e C
10 mL de HCl 1 M
10 mL de HCl 100 mM
10 mL de HCl 10 mM
10 mL de NaOH 1 M
10 mL de NaOH 100 mM
10 mL de NaOH 10 mM
pipetas de vidro, pera, pisceta com água destilada e recipientes plásticos.
Procedimento
IMPORTANTE: PARA DETERMINAR O pH DE TODAS AS SOLUÇÕES E
SUBSTÂNCIAS VOCÊ DEVE MANTER SEMPRE A AGITAÇÃO, E ESPERAR A
ESTABILIZAÇÃO DO VALOR POR NO MÁXIMO 10 SEGUNDOS, QUANDO O VALOR
DE pH DEVE SER ANOTADO, SEM A INTERRUPÇÃO DA AGITAÇÃO
a. Inicialmente retire o eletrodo do pHmetro da solução de repouso e lave-o por
aproximadamente 5 segundos utilizando pisceta com água destilada. Utilize o
recipiente indicado para a coleta de rejeitos, colocando-o logo abaixo do eletrodo
durante a lavagem.
b. Seque o bulbo do eletrodo através de leves toques com o papel toalha.
c. Insira o eletrodo na primeira solução padrão de pH e após estabilização anote o valor
encontrado (UTILIZE A TABELA NO FIM DO PROTOCOLO PARA TODAS AS
ANOTAÇÕES DE pH E DEMAIS DADOS).
d. Repita o procedimento para as outras soluções padrão, sempre lavando o eletrodo
entre as medições.
e. Determine o pH das soluções A, B e C (guarde essas soluções para a parte B do
experimento)
f. Insira o eletrodo em 50 mL de HCl 0,1 M e aguarde 30 segundos. Retire e lave bem
o eletrodo com água destilada (procedimento para ativação rápida da membrana).
g. Determine o pH de 100 mL de água destilada, adicione 1 mL de HCl 10 mM e anote
o pH resultante.
h. Adicione 1 mL de HCl 100 mM na mesma solução anterior (100 mL de água
destilada na qual você adicionou 1 mL de HCl 10 mM) e anote o pH resultante.
i. Adicione 1 mL de HCl 1M na solução resultante do item anterior e anote o pH.
j. Descarte a solução, lave muito bem o recipiente, enxaguando com água destilada por
no mínimo 10 vezes.
k. Insira o eletrodo em 50 mL de HCl 0,1 M e aguarde 30 segundos. Retire e lave bem
o eletrodo com água destilada (procedimento para ativação rápida da membrana).
l. Determine o pH de 100 mL de água destilada, adicione 1 mL de NaOH 10 mM e
anote o pH resultante.
m. Adicione 1 mL de NaOH 100 mM na mesma solução anterior (100 mL de água
destilada na qual você adicionou 1 mL de NaOH 10 mM) e anote o pH resultante.
n. Adicione 1 mL de NaOH 1M na solução resultante do item anterior anote o pH.
PARTE B – Utilização de fita indicadora e comportamento de misturas a variações de pH
- Material
fita indicadora de pH e padrão de cor.
soluções A, B e C
10 mL de HCl 20 %
50 mL de bicarbonato de sódio 2 M
10 mL de NaOH 5 M
50 mL de uma suspensão de 2,19 gramas de EDTA em água destilada.
Dados: bicarbonato de sódio (NaHCO3) (MM = 84,01). EDTA (etileno diamino
tetraacético - tente desenhar a fórmula estrutural C10H16N2O8) (MM = 292).
pipetas de vidro, pera, pisceta com água destilada e recipientes plásticos.
- Procedimento
a. estime o pH das soluções A, B e C utilizando as fitas indicadoras de pH e os padrões
de cor.
b. Adicione aos poucos à solução de bicarbonato de sódio 10 mL de HCl 20% e anote o
comportamento da solução.
c. Adicione o EDTA aos 50 mL de água destilada e agite por 1 minuto. Aos poucos,
sempre anotando o volume adicionado, adicione NaOH 5 M à suspensão de EDTA e
anote o comportamento da suspensão (atenção: veja a última pergunta do protocolo!
está em negrito e sublinhado!).
Questões para discussão:
1) Quais as possíveis causas para o pH determinado para a água ser diferente de 7 ?
2) Qual o pH resultante da adição de 10 mL de HCl 0,01 M em 1 litro de água? (considere que
o volume final permanece 1 L e que o pH original da água é 7).
3) Qual a concentração de H+ numa solução de pH = 4,8 ? E de uma com pH = 2,3 ? e numa de
pOH = 5,4?
4) Qual a concentração de H+ numa solução de pH = 8,9 ? E de uma com pH = 12,1?
5) Explique o comportamento da solução de carbonato de sódio ao entrar em contato com o
ácido clorídrico.
6) Explique a estratégia usada por você (e as alternativas sobre as quais você especulou) para
tornar a suspensão do EDTA numa solução verdadeira.
7) Calcule quantas gramas de bicarbonato de sódio foram dissolvidas em água para se
confeccionarem 100 mL de uma solução 2 M.
8) Qual a concentração da solução final de EDTA após a dissolução? (lembre de levar em conta
o volume final, e não o inicial.)
Tabela para anotação dos resultados:
solução-padrão pH=4,0 solução-padrão pH=7,0 solução-padrão pH=9,0
pH
solução A
solução B
solução C
pH
Água
destilada
Após adição de Após adição de Após adição de
1mL de HCl 10 1mL de HCl 1mL de HCl 1M
mM
100 mM
Água
destilada
Após adição de Após adição de
1mL de NaOH 1mL de NaOH
10 mM
100 mM
pH
Após adição de
1mL de NaOH
1M
pH
Solução A
Solução B
pH estimado pela fita
indicador
Adição de HCl 20% à solução de bicarbonato de sódio 2M.
Consequência:
Adição de NaOH 5M à suspensão de EDTA.
Consequência:
Volume de NaOH 5 M adicionado até a completa dissolução do EDTA:
Concentração final do EDTA na solução:
Solução C