TRADUÇÃO
PERPETUAÇÃO
EXPRESSÃO
Outros RNAs são transcritos além do RNA
mensageiro
RNAs TRANSPORTADORES (tRNA)
(
Ativam aminoácidos para a síntese proteica
65 a 110 nucleotídios
Estrutura secundária em forma de trevo e
tridimensional em forma de L.
Seqüência CCA 3’ terminal
RNAs RIBOSSÔMICOS
Formam os ribossomos juntamente com proteínas
Outros RNAs
snRNA
TRADUÇÃO
A seqüência de bases do RNA é
traduzida na seqüência de
aminoácidos da cadeia
polipeptídica
Componentes requeridos para síntese de
proteínas
Ribossomos;
RNAs de transferência (tRNA);
Molde de mRNA;
Enzimas para ativação dos aminoácidos: aminoacil sintetases (catalisam a
ligação de um aminoácido específico com o tRNA específico);
Fatores de iniciação –IFs (procariotos), eIFs (eucariotos);
Fatores de alongamento (EFs): catalizados pela peptidil transferase;
Fatores de liberação (RF –releasing factor);
Como uma seqüência de bases do RNA é
traduzida em uma seqüência de aminoácidos?
Código genético
•“Dicionário”
“Dicionário” : correspondência de uma sequência de bases nucleotídicas e
uma sequência de aminoácidos.
•1960 – Nirenberg et. al.
•são necessárias 3 bases (um triplete)
) para codificar cada aminoácido.
Código genético
Características:
Na maioria das vezes o códon AUG representa o início da cadeia polipetídica, permitindo a
Na
ligação do aminoácido metionina em eucariotos e formilmetionina em procariotos.
3 códons de parada “stop codons”
O código é degenerado = o mesmo aminoácido pode ser codificado por mais de um triplete.
ÉÉ quase universal, variações em mitocôndrias por exemplo.
Dos 64 códons 61 codificam aminoácidos
CÓDIGO GENÉTICO
O código genético é degenerado.
CÓDIGO GENÉTICO ALTERADO
variantes nucleares
•
•
•
Mycoplasma capricolum
– UGA codifica triptofano.
Alguns ciliados.
– UAA e UAG codificam glutamina.
Levedura (candida).
– CUG codifica serina ao invés de
leucina.
VARIANTES MITOCÔNDRIAIS
RIBOSSOMOS
Compostos de:
-subunidades menores – que ligam o tRNA ao mRNA
-subunidades maiores – que catalisam a formação de ligações peptídicas.
A subunidade maior mais a menor é composta de 3 moléculas de rRNA
ligadas a proteínas (procariotos) e 4 moléculas de rRNA ligadas a
proteínas (em eucariotos)
Subunidades ribossomais
ribossomais: ribonucleoproteínas
RIBOSSOMOS-sítios
sítios de ligação
Contém 4 sítios de ligação para moléculas de RNA
sítios de ligação para o tRNA:
- sítio para ligação do mRNA
- sítio A (sítio de ligação aminoacil-tRNA:: prende a molécula de tRNA carregado com o
aminoácido que está entrando
- sítio P (sítio de ligação peptidil-tRNA):
): prende a molécula de tRNA que está ligada a
extremidade crescente da cadeia polipeptídica
- sítio E (sítio de saída)
RNAs TRANSPORTADORES (tRNA)
(
“adaptador” uma extremidade ligada a um aminoácido e outra
pareada a um códon.
Reconhece códons no RNA mensageiro e confere que o aminoácido
correto seja incorporado a cadeia peptídica em crescimento.
Seqüência CCA 3’ terminal
Seqüência anticódon
O processo de tradução envolve
Ativação dos aminoácidos
Ligação dos t-RNAs aos aminoácidos corretos:
aminoacilação; é catalisada por aminoacil-tRNA sintetases.
sintetases
o complexo aminoácido-tRNA é denominado aminoacil
tRNA.
Mg
Aminoácido + tRNA+ATP
2+
Aminoacil
Aminoacil-tRNA
+ AMP + PPi
Aminoacil-tRNA
tRNA sintetase
Aminoacil tRNA sintetases
Tradução em procariotos
(E. Coli)
) Seqüências que no mRNA são sinais para iniciar a tradução:
1) PROCESSO DE INICIAÇÃO
(E. Coli)
2) PROCESSO DE ALONGAMENTO
1° passo
2° passo
3° passo
3) Terminação
- Stop codons:
UAG
UAA
UGA
- Fatores de liberação:
RF-1: UAA e UAG
RF-2: UGA e UAA
Atuam no sítio A e requerem a
presença do peptidil-tRNA em P
Tradução em eucariotos
PROCESSO DE INICIAÇÃO
•
REVIEW Nature Structural Biology 7, 356 - 361
(2000) - Eukaryotic translation initiation.
•
The eukaryotic cap and poly(A) tail binding proteins,
eIF4E and Pab1p, play important roles in the initiation
of protein synthesis.
The recent structures of the complex of eIF4E bound
to the methylated guanosine (cap) found at the 5'end
of messenger RNA (mRNA), the complex of eIF4E
bound to peptide fragments of two related translation
factors (eIF4G and 4E-BP1), and the complex of the Nterminal fragment of Pab1p bound to polyadenylate
RNA have revealed that eIF4E and Pab1p contain at
least two distinct functional surfaces. One surface is
used for binding mRNA, and the other for binding
proteins involved in translation initiation.
•
Tradução - Eucariotos
Modificação covalente:
Glicosilação
Processamento após ou
durante a síntese de proteínas
Dobramento
Clivagem proteolítica
Modificações covalentes
Degradação
No processamento de proteínas a glicosilação é
um dos processos mais comuns
Endereçamento de proteínas:
Inibição da síntese protéica por antibióticos
Estreptomicina
Bloqueia o sítio A do ribossomo bacteriano
e inibe a associação do aminoacil-tRNA
Causa leitura incorreta dos códons e
inibe a iniciação
Inibição da síntese protéica por toxinas
Toxina da difteria : bloqueia a atividade de eEF2