CARACTERIZAÇÃO IMUNOQUÍMICA DE ANTICORPOS MONOCLONAIS
CONTRA TOXINAS DO VENENO DA ARANHA Loxosceles Sp.
Sabrina Karim Silva - I.C. Voluntária TN/UFPR
Larissa M. Alvarenga; Juliana F. de Moura; Alessandra B. Finco
MÉTODO
Os anticorpos foram produzidos a partir da fusão de células
do baço de um camundongo BALB/C imunizado com o
veneno de Loxosceles intermedia. Os anticorpos
secretados pelo hibridoma 4F10A12 foram purificados por
cromatografia de afinidade em Sepharose-Proteína-G. A
purificação originou o mAb12, com pureza comprovada por
corrida eletroforética em gel de poliacrilamida.
REFERÊNCIAS
MINISTÉRIO DA SAÚDE. Guia de vigilância epidemiológica. 7ed. Brasília. 2009.
OKAMOTO C.K.. Análise do papel do sistema complemento na injúria a
células renais causada pelo veneno da aranha Loxosceles. Tese de doutorado.
USP. São Paulo, 2012.
RESULTADOS
Através da técnica de
ELISA foi possível verificar
que o monoclonal mAb 12
reconhece proteínas das
três espécies principais de
Loxosceles encontradas no
Paraná.
Entretanto,
o
veneno
de
Loxosceles
gaucho apresentou maior
reatividade comparado com
os demais.
ELISA
Absorbância
(492nm)
INTRODUÇÃO
Loxoscelismo (envenenamento acidental causado por
aranhas do gênero Loxosceles, popularmente conhecida
como aranha marrom) é considerado um problema de
saúde pública. A dificuldade em identificar precocemente
o loxoscelismo pode comprometer o tratamento. Com isso,
o objetivo desse trabalho é caracterizar anticorpos
monoclonais específicos contra toxinas dos venenos de
aranha do gênero Loxoceles e utilizá-los na produção de
um teste de diagnóstico (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2009;
OKAMOTO, 2012).
L.intermedia
0.6
0.4
0.2
0
L.gaucho
L.laeta
(C-)
Venenos
Figura 1. Reatividade entre o anticorpo monoclonal mAb12 frente aos venenos de
L. intermedia, L. gaucho e L. laeta.
Imobilizado: 10µg/mL de mAb12. Veneno: 2,5µg/mL. Conjugado: anti-Li HRP 1:2000
CONCLUSÕES
Os produtos desse trabalho irão contribuir com a realização de futuros
testes de imunoblotting e imunoprecipitação para estabelecer uma
caracterização imunoquímica do anticorpo monoclonal mAb12. Este
anticorpo após caracterizado, poderá ser empregado para a construção
e validação de um teste diagnóstico para Loxoscelismo baseado no
reconhecimento de proteínas específicas presente nos soros de
pacientes através do monoclonal mAb12.