Métodos in vivo para determinar disponibilidade
e digestibilidade
Luciano Hauschild
Plano Apresentação:
• Conceitos gerais
o Disponibilidade (Disp) e biodisponibilidade (Biod)
o Relação
composição
alimentos
e
exigência
nutricional
• Métodos in vivo para determinar disponibilidade e
biodisponibilidade
Plano Apresentação:
• Métodos in vivo para determinar disponibilidade
e digestibilidade dos aminoácidos
Nilva Sakomura e Horacio Rostagno. Métodos de
pesquisa em nutrição de monogástrico
Conceitos:
Disponibilidade e biodisponibilidade
Invited review: Amino acid bioavailability and digestibility in pig
feed ingredients: Terminology and application
Disponibilidade e Biodisponibilidade
Disp.
Biodisp.
Disponibilidade = inclui os processos de de
digestão
Disponibilidade e Biodisponibilidade
Disp.
Digest.
Disponibilidade e Biodisponibilidade
Biodisponibilidade
proporção
absorvido
do
em
=
é
nutriente
uma
definido
como
a
ingerido
que
é
forma
química
potencialmente sustentável para o metabolismo
e sintese protéica ( Batterham,1992)
Disponibilidade
AA
AA
AA
AA
AA
AA
Biodisponibilidade
AA
Exigência líquida
Relação composição alimentos e
exigência nutricional
Biodisp.
Exigência
Líquida
4.2.
Métodos
para
determinar
digestibilidade dos aminoácidos em aves
Digestibilidade de AA
Perdas endógenas:
- Animal (basal)
- Alimento (especifico)
Fermentação
Reação Maillard
AA
AA
AA
AA
AA
AA
AA
Digestibilidade de AA
-Forma química como o AA é absorvido
- Fermentação entérica
- Perdas endógenas (animal e alimento)
AA
AA
AA
AA
AA
AA
Formas de expressar digestibilidade ileal:
Aparente =
Padrão =
Verdadeira =
AA ingerido – AA ileal excretado
AA ingerido
AA ingerido – (AA ileal excretado – AA basal end)
X 100
X 100
(AA ingerido)
AA ingerido – (AA ileal excretado – AA end total)
AA ingerido
Mensuram desaparecimento
AA no trato digestivo
X 100
4.2. 4. Protocolo para determinar a
digestibilidade dos aminoácidos com
galos cecectomizados
o Aves:
Galos cecectomizados a partir 20 semanas
o Duração
96 horas (48 hs jejum e 48 hs coleta)
o Delineamento
Minimo 5 repetições
Intestinos (Cecos)
o Coleta de excretas:
A cada 12 hs e recomenda-se o uso de bolsa
plásticas presas a região pélvica;
o Quantificação das perdas endógenas
96 horas de jejum com coleta nas últimas 48
horas
o Preparo das amostras
Liofilizadas
a
vácuo
(-40ºC
por
72
posteriormente moidas e análisadas (HPLC).
hs)
e
Alimentação
precisa
Coleta
excreta
Coleta
excreta
o Cálculos para determinar os coeficientes de
digestibilidade dos aminoácidos:
CDAAap =
CDAAv =
AA ingerido – (AA excretado)
AA ingerido
AA ingerido – (AA excretado – AA endógeno)
AA ingerido
x 100
x 100
4.2.5. Coleta da digesta ileal em aves:
-
Mais preciso;
- Mais trabalhoso;
- Maior número de animais;
Tabela 15 – Coeficientes de digestibilidade de Proteína Bruta,
determinados pelo métodos de coleta totla em frangos intactos e
cectomizados e pela coleta de digesta
Intactos
Cecectomizados
Ileal
Farelo de soja
58,3a
56,54b
81,16ab
Soja integral tostada
58,3a
56,68b
79,82b
60,25a
60,50a
83,41a
Sem enzima
57,84b
55,57b
80,03b
Com enzima
60,07a
59,58a
82,89a
Efeito de tipos de soja
Soja integral extrusada
Efeito da enzima
4.2.6
Protocolo
para
determinar
digestibilidade ileal dos aminoácidos com
aves (Abate)
o Aves
21 dias de idade; 8 a 15 aves por repetição
o Período experimental
5 a 7 dias de adaptação antes do abate
o Dietas
Dieta ingrediente teste
Dieta sem AA (livre
protéina)
Dieta com AA
cristalinos (100%
digestíveis)
Perdas endógenas
Pode ser utilizado de trabalhos publicados
Abate das aves
Estimular consumo duas horas antes do abate
Coleta da digesta
Imediatamente após o abate, o íleo é exposto por incisão
abdminal e um segmento de 15 a 40 cm, terminando a 4 cm
da junção íleo-cecal, é removido
Processamento das amostras
Liofilização à vácuo
Análises laboratoriais
Indicador
Aminoácidos (HPLC)
o Cálculos para determinar os coeficientes de
digestibilidade dos aminoácidos:
CDAAap =
CDAAv =
AA ingerido – (AA excretado)
AA ingerido
AA ingerido – (AA excretado – AA endógeno)
AA ingerido
x 100
x 100
4.3. Métodos para avaliar digestibilidade
da proteína e de aminoácidos em suínos
Cânula no íleo terminal
Anastomose íleo-retal
Coleta digesta ileal pelo método sacrifício
4.3.2
Protocolo
para
determinar
digestibilidade ileal
Período experimental
5 dias de adaptação
2 coleta
Delineamento experimental
Blocos casualizado, com repetições no tempo
No minimo 4 repetições tempo
a
Determinação
da
proteína
e
aminoácidos
endógenos
Dieta isenta de protéina (DIP) ou
Caseina hidrolizada enzimaticamente
Fornecimento das dietas
2 vezes ao dia
Adicionar indicador
Coleta e processamento da digesta
Várias coletas ao dia em sacos plásticos amarrados
na cânula
Obrigado pela atenção !